探针法人型支原体实时定量PCR试剂盒

探针法人型支原体实时定量PCR试剂盒

Probe-quantitative Real-time PCR Kit for Mycoplasma Hominis

 

储存：-20度，避光保存，保质期一年。避免反复冻融。

 

货号：Mqt-hom-20      包装：20个反应

货号：Mqt-hom-50      包装：50个反应

货号：Mqt-hom-100     包装：100个反应

 

试剂盒特点：

1，  特异性检测人型支原体，与其他生物基因组没有交叉反应。

2，  灵敏度高，最低检测极限为每反应7个拷贝。

3，  使用的DNA聚合酶具有抗抑制能力强和热稳定性好的特点；采用热启动方式，可抑制非特异性扩增，降低背景荧光。

4，  带有阳性对照样品，可用于检验试剂盒有效性。

5，  带有UDG酶和dUTP，可降低残留DNA的污染。

 

人型支原体（Mycoplasma Hominis）多形性，通常呈球形（直径0.2–0.3 μm）或丝状，无细胞壁，是已知最小的可独立生存的细菌之一。基因组为环状双链DNA，大小约600–1,000 kb，GC含量低（约27–30%），编码约600个基因，代谢相关基因显著缺失。能量代谢依赖糖酵解和精氨酸水解途径，缺乏三羧酸循环及氧化磷酸化系统。细胞膜富含固醇（如胆固醇），需从宿主获取胆固醇、脂肪酸、氨基酸及核酸前体，为兼性寄生菌。携带的毒力因子有：⑴粘附蛋白——介导宿主细胞（如泌尿生殖道上皮细胞）附着；⑵生物膜——可增强环境抗性及抗生素耐药性；⑶免疫逃逸——无细胞壁，可以避免宿主体液免疫识别，并且通过表面抗原变异降低抗体有效性。

人型支原体属于微需氧或兼性厌氧菌，需复杂培养基（如SP4或PPLO培养基）并补充胆固醇、脂肪酸、核酸前体及10–20%血清，最适生长温度35–37°C，菌落直径50–600 μm，中心致密隆起，边缘透明扁平，呈“荷包蛋”状。人型支原体生长缓慢，培养需2–5天，因此用体外培养法检测时较为耗时，并且灵敏度低，有时需要用显微镜观察，较为麻烦。人型支原体与其他支原体（如生殖支原体）存在抗原相似性，采用抗体法检测时特异性低。采用PCR法检测则有更高的灵敏度和更好的特异性，与其他微生物无交叉影响，检测速度短，仅需几个小时即可。荧光定量PCR相比常规PCR，不仅灵敏度更高，还可以进行定量分析。

探针法人型支原体实时定量PCR试剂盒针对高度保守的膜蛋白移位酶基因设计引物，经BLAST验证，与其他生物基因组没有交叉反应。对13种支原体和31种细菌的检测证实仅对人型支原体有特异性反应。对153个泌尿生殖道样品进行检测，证实本试剂盒灵敏度高于培养法。以gap基因和16S rRNA基因为靶点的PCR方法，由于这两个基因在靶点区域有一些小的突变，导致一些菌株不能识别或灵敏度降低，而本试剂盒的靶点区域，经数十个菌株的测序证实不包含突变。

本试剂盒适用于人型支原体的检测和鉴定。

本产品仅供研究使用。

 

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