密理博 RiOs 8系统验证手册 大量

成功进行双酶切实验之实战手册

酶切位点间没有大片段插入时，才如此。事实上，大部分质粒的多克隆位点都是如此）。 如果出现以下情况，就表明有问题， 1. 单酶切后（B和/或C），与未酶切的DNA样品(D)的电泳位置一样（即依然为超螺旋） 2. 出现线性化质粒及超螺旋质粒两条带。 这意味着：EcoRI和/或HindIII未能进行完全酶切，原因可能是酶部分失活，或者质粒的质量有问题。 此时，即使双酶切只出现一条线性化DNA条带，也可能在线性化质粒中存在大量的单 酶切的载体。

基因编辑小鼠简介及计划生育手册

所有细胞的基因组与编辑后的受精卵完全相同。最后将首建鼠扩繁建系，获得大量的小鼠用于动物实验。 制备基因编辑小鼠分为 6 个步骤：① 制备基因编辑分子工具（cas9、打靶载体 donor 等）② 对雌鼠超数排卵，再与雄鼠交配获得大量受精卵③ 将基因编辑工具显微注射到受精卵内④ 将注射后的受精卵移植给受体母鼠⑤ 仔鼠出生及鉴定筛选⑥ 阳性首建鼠扩繁建系 整个过程的流程图：     四、基因编辑小鼠每个制作步骤的周期   ① 制备基因编辑工具：一般 1~2 个月② 受精卵准备：日常提供，不需额外时间③

Real-time qPCR 手册——手把手教你从菜鸟到高手

数为 1 的系统都达到了灵敏度的极限。PCR 效率是决定反应灵敏度的关键因素。在检测极低拷贝数时的另一个重要的考虑因素是，低拷贝时的模板数量不能按普通情况来预期。相反，它会遵循泊松分布，即进行大量的平行重复，平均应该含有一个拷贝的起始模板，实际上约 37% 不含有拷贝，仅有约 37% 含有1个拷贝，约 18% 实际上含有两个拷贝。因此，为了更可靠地检测低拷贝，必须做大量的平行重复实验来提供统计显著性，并克服泊松分布的限制。 评价荧光 PCR 结果的标准因素 建议 指标 效率 5 个数量级梯度