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- 保存条件:
详见说明书
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详见说明书
- 库存:
100
- 供应商:
上海博湖
- 规格:
50次
【储存条件及有效期】:
-20℃避光保存,避免反复冻融,有效期6个月。
【样本采集、存放及运输】
u 样本采集:各类型样本按照常规方法采集;
u 存放:样本在2~8℃条件下保存应不超过72h,-70℃以下可长期保存,但应避免反复冻融(最多冻融3次);
u 运输:采用冰壶或泡沫箱加冰密封进行运输。
大鼠顶体蛋白(ACR)免疫试剂盒 HIRIP3 HIRA相互作用蛋白3抗体
大鼠叠氮胸苷(AZT)免疫试剂盒 HOOK1 HOOK1蛋白抗体
大鼠凋亡诱导因子(AIF)免疫试剂盒 HIV2 gp41 + gp160 人类免疫缺陷病毒2型/2型艾滋病病毒gp41+gp160抗体
大鼠凋亡相关因子配体(FASL)免疫试剂盒 HIV2 gp120 + gp160 人类免疫缺陷病毒2型/2型艾滋病病毒gp41+gp160抗体
大鼠凋亡相关因子(FAS)免疫试剂盒 HCG3 HCG3蛋白抗体
大鼠淀粉样前体蛋白(βAPP)免疫试剂盒 ErbB4 HER4抗体
大鼠抵抗素样α(Retnla)免疫试剂盒 DTSF 肝素结合性表皮生长因子抗体
大鼠抵抗素(Resistin)免疫试剂盒 HLC8 肺癌相关蛋白8抗体
大鼠低氧诱导因子1α(HIF-1α)免疫试剂盒 Hepatitis C Virus NS5a 丙型肝炎病毒NS5A抗体
大鼠低密度脂蛋白受体(LDLR)免疫试剂盒 Histone H2A.x 组蛋白H2AX抗体
大鼠低密度脂蛋白免疫复合物(LDL-IC)免疫试剂盒 HESX1 同源结构域转录因子HESX1抗体
大鼠低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)免疫试剂盒 HESX1 同源结构域转录因子HESX1抗体
大鼠低密度脂蛋白(LDL)免疫试剂盒 HoxC13 同源盒蛋白HOX13抗体
大鼠的牛血清白蛋白残留检测免疫试剂盒 HOXD8 同源盒转录因子8抗体
大鼠蛋白磷酸酶(PP)免疫试剂盒 HCG Beta(4H7) 人绒毛膜促性腺激素β亚基单抗
大鼠蛋白聚糖4(PRG4)免疫试剂盒 HPV18 E6 protein 人类乳头状瘤病毒18 E6抗体
大鼠蛋白激酶G(PKG)免疫试剂盒 HPV16-E7 人类乳头状瘤病毒16-E7抗体
大鼠蛋白激酶C(PKC)免疫试剂盒 Nuclear Matrix Protein p84 核基质p84蛋白抗体
转基因元件CaMV35终止子LAMP试剂盒大鼠蛋白激酶C epsilon(PKCε)免疫试剂盒 Centromeric histone H3-like protein-2 组蛋白H3样抗体
大鼠蛋白激酶B(PKB)免疫试剂盒 Centromeric histone H3-like protein-1 组蛋白H3样抗体
大鼠弹性蛋白(ELN)免疫试剂盒 His tag 聚组氨酸抗体标签抗体
大鼠弹力蛋白酶免疫试剂盒 HIV1 gp120 艾滋病病毒抗体
大鼠胆囊收缩素/肠促胰酶肽(CCK)免疫试剂盒 HIV gp160 艾滋病病毒-1包膜糖蛋白抗体
大鼠胆碱乙酰转移酶(ChAT)免疫试剂盒 HIV gp41 艾滋病病毒抗体
大鼠胆固醇酯转移蛋白(CETP)免疫试剂盒 HIV1 gp160 艾滋病病毒-1包膜糖蛋白抗体
大鼠胆固醇24S-羟化酶(CYP46)免疫试剂盒 Phospho-Histone H3 (Ser10) 磷酸化组蛋白H3抗体
大鼠胆固醇(CH)免疫试剂盒 HADHSC(mouse, rat) 短链L-3羟烷基辅酶A脱氢酶抗体(小鼠,大鼠)
大鼠单核细胞趋化蛋白4(MCP-4)免疫试剂盒 HOXD10 同源盒蛋白HOXD10抗体
大鼠单核细胞趋化蛋白3(MCP-3/CCL7)免疫试剂盒 HHIPL1 HHIP样蛋白1抗体
大鼠单核细胞趋化蛋白2(MCP-2/CCL8)免疫试剂盒 HOXA10 HOXA10抗体
大鼠单核细胞趋化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)免疫试剂盒 hCG receptor 促黄体生成素受体抗体
大鼠单胺氧化酶(MAO)免疫试剂盒 HER2 receptor(NT) HER2受体抗体(N端)
大鼠大内皮素1免疫试剂盒 HER2 receptor(NT) HER2受体抗体
大鼠催乳素(PRL)免疫试剂盒 H7N9 HA A型禽流感病毒H7N9 M1蛋白抗体
大鼠催产素(OT)免疫试剂盒 HCG alpha 人绒毛膜促性腺激素α亚基/hCG α 抗体
大鼠促胰液素/胰泌素(Sct)免疫试剂盒 Heparanase 1 乙酰肝素酶抗体
大鼠促性腺激素抑制激素(GnIH)免疫试剂盒 Centromeric histone H3-like protein-2 组蛋白H3样蛋白抗体
储存条件:
14℃或-20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
组成及试剂配制:
1、酶标板:一块(96孔)
2、 标准品(冻干品): 2瓶,请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为200 U/L,然后做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释),分别配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液:1×20ml。
4、 检测稀释液A:1×10ml。
5、 检测稀释液B:1×10ml。
反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是最末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以最低引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。
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文献和实验源序列,这些序列通常不存在于野生型植物中。其中,这两个外源的DNA序列与花椰菜花叶病毒的35S启动子和根癌农杆菌的NOS终止子整合在一起。假如这两个序列的任一个被扩增出来,则表明外源基因已经转化入植物基因组中。原则上所有已批准的转基因农作物都是用含有这两个元件或其中任一个的构建载体转化的。对于一些在转基因构建载体中新使用的启动子和终止子序列的检测,逐渐成为科学家们关注的焦点。目前,已经设计了一些针对不同大小产物的引物对。表1为合成的引物序列,选择退火位点生成单一DNA片段,以便于结果的分析。PCR反应
子、根癌农杆菌胭脂碱合成酶基因(NOS)终止子、大肠杆菌K12菌株新霉素磷酸转移酶II(NPTII)基因。普通PCR检测结果表明,3种花卉6个样品中仅矮牵牛的1个样品含有这3种转基因成分,酶切鉴定结果验证了PCR产物为非假阳性。尝试以多重PCR同时检测转基因矮牵牛与对照阳性质粒中的2个或3个转基因成分,得到预期结果。 关键词: 多重PCR;35S启动子;NOS终止子;NPTII基因 中图分类号: S727-31;Q78 文献标识
年我国要求对转基因农作物实行标签管理。抗草甘膦(glyphosate)大豆(商品名,roundup ready soybean)是在传统大豆株Variety A5403中转入外源基因CAMV-35S启动子、抗草甘膦基因CP4-EPSPS和NOS终止子而得到。它是目前使用最广的转基因作物之一,每年至少有800万吨转基因大豆进入我国市场。因此,研究抗草甘膦大豆的快速检测方法具有重要意义。目前采用PCR检测转基因大豆的方法大多是采用琼脂 糖凝胶电泳法,首先检测CAMV-35S启动子和NOS终止子进行筛选
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