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- 2026年08月10日
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0
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详细描述见链接：http://www.millipore.com/catalogue/item/TANK00350
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文献和实验SDS Gel Electrophoresis of Tubulin\MAPs
(1:3 dilution of stock) 0.375 M Tris-HCl (pH 8.8) 0.1 % SDS Stacking Gel (Final Concentrations) 3 % acrylamide (1:10 dilution of stock) 0.125 M Tris-HCl (pH 6.8) 0.1% SDS Electrode
8.8 (resolving gel) 1.0 M Tris, pH 6.8 (stacking gel) 5x SDS Running Buffer (1 L) Tris 15 g Glycine 72 g SDS 5 g Coomassie Blue Stain 10% (v/v) acetic acid 0.006% (w/v) Coomassie Blue dye 90% ddH2O Isopropanol Fixing Solution 10
操作篇：western blot 之 SDS－PAGE 电泳
20-50μl 蛋白（注意：根据自己的实验需要进行选择，没有固定的量）的溶液体积即为上样量。 取出上样样品至 200μl 的 EP 管中，加入 5×SDS 上样缓冲液至终浓度为 1×。（上样总体积一般不超过 15μl，加样孔的最大限度可加 20μ 样品，其实大一点的垂直电泳槽每孔最大上样量可以达到 40μl，胶做得很好的话 50μ 也是问题不大的）上样前要将样品于沸水中煮 5-10 min 使蛋白变性。 本人心得：可以使用 PCR 仪进行变性，加快速度，这样就不用将水煮
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