人肝脂肪酶ELISA检测试剂盒说明书

实验流程:
1. 实验前标准品、试剂及样本的准备；
2. 加样（标准品及样本）100µL，37°C孵育1小时；
3. 吸弃，加检测溶液A100µL，37°C孵育1小时；
4. 洗板3次；
5. 加检测溶液B100µL，37°C孵育30分钟；
6. 洗板5次；
7. 加TMB底物90µL，37°C孵育10-20分钟；
8. 加终止液50µL，立即450nm读数。
 

 
产品名称：人肝脂肪酶ELISA检测试剂盒说明书
英文名称：HEPATIC LIPASE
检测范围：62.5pg/ml~2000pg/ml
灵敏度：10
规格：96T/48T 
保存；2-8℃。
检测目的：用于检测血浆，血清及相关液体等样本。例如灌洗液、脑脊液、血清、血浆、尿液、胸腹水、细胞培养上清、组织匀浆等标本.
检测种属：大鼠、小鼠、豚鼠、仓鼠、裸鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛、马铃薯、鹿、羊、鸡、鸭、鱼、人、等动植物。
备试剂与收集血样：
1.  收集标本：血清、血浆（EDTA 、柠檬酸盐、肝素抗凝）、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测， 2-8 ℃ 保存48 小时；更长时间须冷冻（ -20   ℃或 -70   ℃ ）保存，避免反复冻融。
2.  标准品液配制：使用前加入0.5ml 蒸馏水 混匀，配成 120 0ng/ml 的溶液 。 设标准 管 8 管，管加标本稀释液 900ul ，第二至第八管加入标本稀释液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的标准品溶液 100ul 混匀后用加样器吸出 500ul ，移至第二管 。如此反复作对倍稀释，从第七 管 中吸出 500ul 弃去。第八 管 为空白对照。
3.  10× 标本稀释液用蒸馏水作 1: 1 0 倍稀释（ 示例： 1ml浓稀释液 +9ml 蒸馏水）。
4.  洗涤液：用重蒸水 1:20 稀释（示例：1ml 浓缩洗涤液加入 19ml 的重蒸水）
检测程序：
1.  加样：每孔各加入标准品或待测样品 100ul ，将反应板充分混匀后置 37 ℃ 120 分钟。
2.  洗板：用洗涤液将反应板充分洗涤 4-6 次，向滤纸上印干。
3.  每孔中加入抗体工作液10 0ul 。将反应板充分混匀后置 37 ℃ 6 0 分钟。
4.  洗板：同前。
5.  每孔加酶标抗体工作液100ul 。将反应板置 37 ℃ 3 0 分钟。
6.  洗板：同前。
7.  每孔加入底物工作液100ul ，置 37   ℃ 暗处反应15 分钟。
8.  每孔加入100ul 终止液混匀。
9.  30分钟内用酶标仪在 45 0 nm 处测 吸光值。
性能：
1. 准确性：标准品线性回归与预期浓度相关系数R值，大于等于0.9900。
2. 灵敏度：检测浓度小于0.1 U/mL。
3. 特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
4. 重复性：板内、板间变异系数均小于15%。
5. 贮藏：2-8℃，避光防潮保存。
6. 有效期：6个月
 

 
使用方法：
测定法的灵敏度来自作为报告的酶。众所周知，酶是一种有机催化剂，很少量的酶即可诱导大量的催化反应，产生可供观察的显色反应现象。因此该体系常被称为酶放大体系。
1. 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。   24μg/ml    5号标准品    150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液
 12μg/ml    4号标准品    150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液
 6μg/ml     3号标准品    150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液
 3μg/ml     2号标准品    150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液
 1.5μg/ml   1号标准品    150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液
2. 加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。|
3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。   
4. 配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
7. 温育：操作同3。
8. 洗涤：操作同5。
9. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.
10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11. 测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
操作流程：
（1）待测样品孔中每孔加入待测样品100μl，每种样品设3个平行孔；设两个阴性对照孔，每孔加未处理组的细胞裂解液100μl；另设一个空白对照孔，加入纯细胞裂解液100μl。 
（2）酶标板置4℃，包被过夜。
（3）洗板：吸干孔内反应液，用洗涤液过洗一遍（将洗涤液注满板孔后，即甩去），之后将洗涤液注满板孔，浸泡1-2分钟，间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
（4）阴性对照孔每孔加入PBS 50μl，样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF抗体工作液50μl。 
（5）酶标板置37℃培养箱的湿盒内，孵育60min。 
（6）洗板，同（4）。 
（7）每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。 
（8）酶标板置37℃培养箱的湿盒内，孵育60min。 
（9）洗板，同（4）。 
（10）每孔加TMB显色液 100μl，轻轻混匀10s，置37℃暗处反应15-20min。 
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反应。 
（12）分别测450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，最终测得的OD值为两者之差（W1-W2），以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
（13）数据处理：在得出标本（S）和阴性对照（N）的 OD值后，计算S/N值。S/N≥2.1为阳性判定标准。产品仅用于科研
阿特拉津 HPLC≥97% 200mg 小鼠血清总补体(CH50)ELISA 试剂盒
表丁香脂素 HPLC≥95% 5mg Rat dopamine D2 receptor (D2R) ELISA Kit 大鼠多巴胺D2受体(D2R)ELISA试剂盒
皮树脂醇 HPLC≥97% 5mg Humanβmannosidase,βManaseELISAKit 人β甘露糖苷酶(βManase)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
异噁酰草胺 HPLC≥98% 10mg CLIAKitfor(CTX-I)ELISAKit大鼠Ⅰ型胶原C端肽规格：48T/96T
十七酸 GC≥98% 20mg 荧光或共聚焦显微镜制片封片处理液(荧光稳定、永久保存)5/20毫升
L硒代胱氨酸 HPLC≥98% 20mg MouseIerleukin18,IL-18ELISAKit小鼠白介素18(IL-18)ELISA试剂盒规格：96T/48T
香菇多糖 UV≥98%，鉴别 20mg 小鼠血清素/血清胺(ST)ELISA试剂盒 ，英文名： ST ELISA Kit
盐酸利多卡因? HPLC≥98% 100mg 小鼠嗜环蛋白/亲环素A(CyPA)ELISA检测试剂盒MousecyclophilinA,CyPAELISAKit 96T/48T
 GC≥98% 250mg 人基质金属蛋白酶2/明胶酶A(MMP-2/Gelatinase A)试剂盒 Human Maix metalloproteinase 2/Gelatinase A,MMP-2 ELISA kit
十九酸 GC≥98% 20mg RatCaveolin-1,Cav-1ELISAKit大鼠窖蛋白Caveolin1(Cav-1)ELISA试剂盒规格：96T/48T
HumanplateletmembraneglycoproteinⅣ,GP-ⅣELISAKit人血小板膜糖蛋白Ⅳ(GP-Ⅳ)ELISA试剂盒规格：96T/48T  (-)-Noe's Reagent  中文名：(-)-核欧沃豪斯效应试剂  分子式：C24H38O3 
HumanplateletmembraneglycoproteinⅡbⅢa,GP-ⅡbⅢaELISAKit人血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa(GP-ⅡbⅢa/CD41+CD61)ELISA试剂盒规格：96T/48T  2-(4-Chloro-3-hydroxy-1-butynyl)-5-(1,3-pentadiynyl)thiophene  26905-70-4  中文名：  分子式：C13H9ClOS 
HumanPlateletFactor4,PF-4ELISAKit人血小板因子4(PF-4/CXCL4)ELISA试剂盒规格：96T/48T  2-(2'-Hydroxytetracosanoylamino)-octadecane-1,3,4-triol tetraacetate  中文名：  分子式：C50H93NO9 
Humanplateletfactor3，PF3ELISAKit人血小板因子3(PF-3)ELISA试剂盒规格：96T/48T  2-(2'-Hydroxytetracosanoylamino)-octadecane-1,3,4-triol  154801-30-6  中文名：  分子式：C42H85NO5 
HumanPlatelet-DerivedGrowthFactorSolubleReceptorα，PDGFsR-αELISAKit人血血小板衍生生长因子可溶性受体α(PDGFsR-α)ELISA试剂盒规格：96T/48T  2-(Morpholinodithio)benzothiazole  中文名：2-(4-吗啉基二硫代)苯并噻唑  分子式：C11H12N2OS3
细孔柱层析硅胶(20-60目,FCP Grade)  Silica gel for column chromatography  质量规格：20-60目,层析用 小鼠血管紧张素原(aGT)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
细孔柱层析硅胶(100-200目,FCP Grade)  Silica gel for column chromatography  质量规格：100-200目,层析用 小鼠血管紧张素原(aGT)ELISA检测试剂盒Mouseangiotensinogen,aGTELISAKit 96T/48T
细孔柱层析硅胶(300-400目,FCP Grade)  Silica gel for column chromatography  质量规格：300-400目,层析用 小鼠血管紧张素原(aGT)ELISA试剂盒 ，英文名： aGT ELISA Kit
大孔柱层析硅胶(20-60目,FCP Grade)  Silica gel for column chromatography  质量规格：20-60目,层析用 小鼠血管紧张素转化酶(ACE)ELISA检测试剂盒MouseAngiotensinconveingenzyme,ACEELISAKit 96T/48T
大孔柱层析硅胶(100-200目,FCP Grade)  Silica gel for column chromatography  质量规格：100-200目,层析用 小鼠血管紧张素转化酶(ACE)ELISA试剂盒 ，英文名： ACE ELISA Kit
大孔柱层析硅胶(300-400目,FCP Grade)  Silica gel for column chromatography  质量规格：300-400目,层析用 小鼠血管紧张素转化酶2(ACE2)ELISA试剂盒 ，英文名： ACE2 ELISA Kit
硅酸(>98%,BC)  Silicic acid hydrate  质量规格：>98%,BC 小鼠血管紧张素转换酶(ACE)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
一氧化硅(>99%,BR)  Silicon monoxide  质量规格：>99%,BR 小鼠血管内皮钙黏蛋白(CDH5)ELISA试剂盒 ，英文名： CDH5 ELISA Kit
钨硅酸(>98%,BR)  Silicotungstic acid hydrate  质量规格：>98%,BR 小鼠血管内皮生长因子A(VEGFA)ELISA试剂盒 ，英文名： VEGFA ELISA Kit
乙酸银(>99%,BR)  Silver acetate  质量规格：>99%,BR 小鼠血管内皮生长因子B(VEGFB)ELISA试剂盒 ，英文名： VEGFB ELISA Kit
人肝脂肪酶ELISA检测试剂盒说明书内皮生长因子受体2   英文名称：   Rat Vascular Endothelial Growth Factor Receptor 2   规格：   48T/96T   英文缩写：   VEGF-R2  Otophylloside O  中文名：  分子式：C56H84O20  度：96.5%
内皮生长因子受体2   英文名称：   Human Kinaseinse Domain Receptor/VEGFR2   规格：   48T/96T   英文缩写：   KDR  4,4'-Dimethoxytrityl chloride  40615-36-9  中文名：4,4'-二甲氧基三苯基氯甲烷  分子式：C21H19ClO2 
内皮生长因子受体 2(VEGF-R2)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装     Otophylloside B 4'''-O-β-D-cymaropyranoside  171422-85-8  中文名：  分子式：C56H90O19 
内皮生长因子受体 1(VEGF-R3)   作用：   ELISA   规格：   96T   美国 R&D  Otophylloside F  中文名：青阳参苷F  分子式：C48H76O16  度：95.0%
内皮生长因子受体 1(VEGF-R1)   作用：   ELISA   规格：   96T   奥地利 Bender     Otophylloside B 4'''-O-α-L-cymaropyranoside  171422-82-5  中文名：  分子式：C56H90O19