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29
- 英文名：
SUPER Green I nucleic acid gel stain *10,000× concentrate in DMSO* (PCR Grade)
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海西格
- 保存条件：
低温保存
- 规格：
100 μL 1 mL
操作步骤 :
1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1（10pM） 2μl
引物2（10PM） 2μl
Taq酶（2U/μl） 1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl
加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，zui后在72℃ 保温7min。
3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
产品名称: SUPER Green I （效果同SYBR Green I）核酸染料（10,000× DMSO溶液）（PCR级）
英文名称 SUPER Green I nucleic acid gel stain *10,000× concentrate in DMSO* (PCR Grade)
规格: 100 μL 1 mL
分类 PCR荧光核酸试剂
下面就向大家介绍实验方法步骤：
方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保温7min。
3：结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl氯仿进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
PCR反应鉴定——PCR反应条件:
PCR实验步骤
典型的PCR由
（1）高温变性模板；
（2）引物与模板退火；
（3）引物沿模板延伸三步反应组成一个循环，通过多次循环反应，使目的DNA得以迅速扩增。其主要步骤是：
将待扩增的模板DNA置高温下（通常为93℃-94℃）使其变性解成单链；
人工合成的两个寡核苷酸引物在其合适的复性温度下分别与目的基因两侧的两条单链互补结合，两个引物在模板上结合的位置决定了扩增片段的长短；
耐热的DNA聚合酶（Taq酶）在72℃将单核苷酸从引物的3’端开始掺入，以目的基因为模板从5’→3’方向延伸，合成DNA的新互补链。
PCR检测方法包括以下步骤：
(1)将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线；
(2)待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。
其中步骤(1)为：将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线。
其中所述参照基因为本领域常规参照基因，较佳地管家基因，优选地为RPPH1的扩增区域，其中所述质粒载体为本领域常规质粒载体，较佳地为PCR克隆载体，优选地为TA cloning载体，所述TA cloning载体较佳地为pMD18-T载体。其中所述标准品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例较佳地为1：1。由于标准品中待测目的基因与参照基因的比例为1:1，解决了目前相对标准曲线法应用中目的基因与参照基因的浓度比例关系难以控制的问题，提高HER2基因扩增检测的可靠性。
步骤(2)为：待测样本与步(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。
其中所述待测目的基因为本领域常规待测目的基因，较佳地为肿瘤或者疾病的特异性基因，更佳地为HER2基因的扩增区域，所述荧光定量PCR扩增为本领域常规荧光定量PCR扩增方法，所述荧光定量PCR扩增方法较佳地为多通道荧光定量PCR扩增，更佳地为双通道荧光定量PCR扩增。
以下是SUPER Green I （效果同SYBR Green I）核酸染料（10,000× DMSO溶液）（PCR级）的相关产品：
Trimethoprim 中文名：甲氧苄啶 分子式：C14H18N4O3 鱼类皮质醇(Coisol)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
Trillin 中文名：延龄草苷 分子式：C33H52O8 鱼类甲状腺素(T4)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
Triethyl 中文名：柠檬酸三乙酯 分子式：C12H20O7 鱼类超敏C反应蛋白(hs-CRP)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
Tricetyl fingolimod 中文名： 分子式：C25H39NO5 鱼糖胺聚糖(GAG)ELISA检测试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
Triamcinolone acetonide 中文名：曲安奈德 分子式：C24H31FO6 鱼尿苷二0酸葡萄糖酸转移酶（UDPGT）ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
小鼠生长激素释放多肽(GHRP)ELISAKit ELISA. 96T/48T Indometacin 中文名：吲哚美辛 分子式：C19H16ClNO4 度：98.0%
小鼠生长激素（GH）ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装 Irbesartan 中文名：厄贝沙坦 分子式：C25H28N6O
小鼠生长分化因子6 英文名称： Mouse Growth Differeiation Factor 6 规格： 48T/96T 英文缩写： GDF-6 Danshenxinkun A 中文名：丹参新醌甲 分子式：C18H16O4
小鼠生长分化因子3 英文名称： Mouse Growth Differeiation Factor 3 规格： 48T/96T 英文缩写： GDF3 Danshenxinkun A 中文名：丹参新醌甲 分子式：C18H16O4 度：98.0%
小鼠生长分化因子15 英文名称： Mouse Growth Differeiation Factor 15 规格： 48T/96T 英文缩写： GDF-15 Dantron
117-10-2
中文名：1,8-二羟基蒽醌 分子式：C14H8O4
豚鼠白介素1α(IL1α)ELISA试剂盒 ，英文名： IL1α ELISA Kit 2-Amino-4-chlorobenzothiazole 19952-47-7 中文名：2-氨基-4-氯苯并噻唑 分子式：C7H5ClN2S 度：98.0% 关键词：
豚鼠白介素18(IL-18)ELISA试剂盒 ，英文名： IL-18 ELISA Kit 2-Amino-3-hydroxyanthraquinone 中文名：2-氨基-3-羟基蒽醌 分子式：C14H9NO3 度：98.0%
豚鼠白介素17(IL-17)ELISA试剂盒 ，英文名： IL-17 ELISA Kit 2-Amino-3-Formylchromone 61424-76-8 中文名：2-氨基-3-甲酰基色原酮 分子式：C10H7NO3 度：98.0% 关键词：
豚鼠白介素15(IL15)ELISA试剂盒 ，英文名： IL15 ELISA Kit 2-Amino-3,5-dibromobenzaldehyde 中文名： 分子式：C7H5Br2NO 度：98.0%
豚鼠白介素13(IL-13)ELISA试剂盒 ，英文名： IL-13 ELISA Kit 2-Amino-2'-nitrodiphenyl sulfide 19284-81-2 中文名：2-氨基-2'-硝基二苯基硫醚 分子式：C12H10N2O2S 度：98.0%
SUPER Green I （效果同SYBR Green I）核酸染料（10,000× DMSO溶液）（PCR级）λ噬菌体基因组DNA快速提取试剂盒 Fast exaction kit for phage genomic DNA Panaxyne 122855-49-6 中文名： 分子式：C14H20O2 度：97.0% 关键词： 细胞毒活性; 聚乙炔; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库
γ-谷酰转肽酶活性elisa试剂盒 γ-谷酰转肽酶活性试剂盒 规格型号：96T/48T γ-谷酰转肽酶活性试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：γ-谷酰转肽酶活性试剂盒、γ-谷酰转肽酶活性elisa试剂盒 保存条件：2-8℃ 保质期：6个月。 Tryptophan 中文名： 分子式：C11H12N2O2
γ-谷酰半胱酸合成酶（γ-GCS）测定试剂盒（速率法） Withaperuvin C 中文名： 分子式：C28H38O7
γ干扰素 英文名称： Rabbit γ Ierferon 规格： 48T/96T 英文缩写： IFN-γ Albendazole 中文名：阿苯达唑 分子式：C12H15N3O2S
β-整合素 英文名称： β-Iegrin 规格： 48T/96T 英文缩写： β-Iegrin Wallicoside 88797-59-5 中文名：断节参苷 分子式：C61H98O26 度：98.0% 关键词：
1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1（10pM） 2μl
引物2（10PM） 2μl
Taq酶（2U/μl） 1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl
加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，zui后在72℃ 保温7min。
3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
产品名称: SUPER Green I （效果同SYBR Green I）核酸染料（10,000× DMSO溶液）（PCR级）
英文名称 SUPER Green I nucleic acid gel stain *10,000× concentrate in DMSO* (PCR Grade)
规格: 100 μL 1 mL
分类 PCR荧光核酸试剂
下面就向大家介绍实验方法步骤：
方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保温7min。
3：结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl氯仿进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
PCR反应鉴定——PCR反应条件:
| 循环步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
| 预变性 | 94℃ | 5 min | 1 |
| 变性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
| 退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
| 延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
| 终延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
典型的PCR由
（1）高温变性模板；
（2）引物与模板退火；
（3）引物沿模板延伸三步反应组成一个循环，通过多次循环反应，使目的DNA得以迅速扩增。其主要步骤是：
将待扩增的模板DNA置高温下（通常为93℃-94℃）使其变性解成单链；
人工合成的两个寡核苷酸引物在其合适的复性温度下分别与目的基因两侧的两条单链互补结合，两个引物在模板上结合的位置决定了扩增片段的长短；
耐热的DNA聚合酶（Taq酶）在72℃将单核苷酸从引物的3’端开始掺入，以目的基因为模板从5’→3’方向延伸，合成DNA的新互补链。
PCR检测方法包括以下步骤：
(1)将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线；
(2)待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。
其中步骤(1)为：将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线。
其中所述参照基因为本领域常规参照基因，较佳地管家基因，优选地为RPPH1的扩增区域，其中所述质粒载体为本领域常规质粒载体，较佳地为PCR克隆载体，优选地为TA cloning载体，所述TA cloning载体较佳地为pMD18-T载体。其中所述标准品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例较佳地为1：1。由于标准品中待测目的基因与参照基因的比例为1:1，解决了目前相对标准曲线法应用中目的基因与参照基因的浓度比例关系难以控制的问题，提高HER2基因扩增检测的可靠性。
步骤(2)为：待测样本与步(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。
其中所述待测目的基因为本领域常规待测目的基因，较佳地为肿瘤或者疾病的特异性基因，更佳地为HER2基因的扩增区域，所述荧光定量PCR扩增为本领域常规荧光定量PCR扩增方法，所述荧光定量PCR扩增方法较佳地为多通道荧光定量PCR扩增，更佳地为双通道荧光定量PCR扩增。
以下是SUPER Green I （效果同SYBR Green I）核酸染料（10,000× DMSO溶液）（PCR级）的相关产品：
Trimethoprim 中文名：甲氧苄啶 分子式：C14H18N4O3 鱼类皮质醇(Coisol)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
Trillin 中文名：延龄草苷 分子式：C33H52O8 鱼类甲状腺素(T4)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
Triethyl 中文名：柠檬酸三乙酯 分子式：C12H20O7 鱼类超敏C反应蛋白(hs-CRP)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
Tricetyl fingolimod 中文名： 分子式：C25H39NO5 鱼糖胺聚糖(GAG)ELISA检测试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
Triamcinolone acetonide 中文名：曲安奈德 分子式：C24H31FO6 鱼尿苷二0酸葡萄糖酸转移酶（UDPGT）ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
小鼠生长激素释放多肽(GHRP)ELISAKit ELISA. 96T/48T Indometacin 中文名：吲哚美辛 分子式：C19H16ClNO4 度：98.0%
小鼠生长激素（GH）ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装 Irbesartan 中文名：厄贝沙坦 分子式：C25H28N6O
小鼠生长分化因子6 英文名称： Mouse Growth Differeiation Factor 6 规格： 48T/96T 英文缩写： GDF-6 Danshenxinkun A 中文名：丹参新醌甲 分子式：C18H16O4
小鼠生长分化因子3 英文名称： Mouse Growth Differeiation Factor 3 规格： 48T/96T 英文缩写： GDF3 Danshenxinkun A 中文名：丹参新醌甲 分子式：C18H16O4 度：98.0%
小鼠生长分化因子15 英文名称： Mouse Growth Differeiation Factor 15 规格： 48T/96T 英文缩写： GDF-15 Dantron
豚鼠白介素1α(IL1α)ELISA试剂盒 ，英文名： IL1α ELISA Kit 2-Amino-4-chlorobenzothiazole 19952-47-7 中文名：2-氨基-4-氯苯并噻唑 分子式：C7H5ClN2S 度：98.0% 关键词：
豚鼠白介素18(IL-18)ELISA试剂盒 ，英文名： IL-18 ELISA Kit 2-Amino-3-hydroxyanthraquinone 中文名：2-氨基-3-羟基蒽醌 分子式：C14H9NO3 度：98.0%
豚鼠白介素17(IL-17)ELISA试剂盒 ，英文名： IL-17 ELISA Kit 2-Amino-3-Formylchromone 61424-76-8 中文名：2-氨基-3-甲酰基色原酮 分子式：C10H7NO3 度：98.0% 关键词：
豚鼠白介素15(IL15)ELISA试剂盒 ，英文名： IL15 ELISA Kit 2-Amino-3,5-dibromobenzaldehyde 中文名： 分子式：C7H5Br2NO 度：98.0%
豚鼠白介素13(IL-13)ELISA试剂盒 ，英文名： IL-13 ELISA Kit 2-Amino-2'-nitrodiphenyl sulfide 19284-81-2 中文名：2-氨基-2'-硝基二苯基硫醚 分子式：C12H10N2O2S 度：98.0%
SUPER Green I （效果同SYBR Green I）核酸染料（10,000× DMSO溶液）（PCR级）λ噬菌体基因组DNA快速提取试剂盒 Fast exaction kit for phage genomic DNA Panaxyne 122855-49-6 中文名： 分子式：C14H20O2 度：97.0% 关键词： 细胞毒活性; 聚乙炔; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库
γ-谷酰转肽酶活性elisa试剂盒 γ-谷酰转肽酶活性试剂盒 规格型号：96T/48T γ-谷酰转肽酶活性试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：γ-谷酰转肽酶活性试剂盒、γ-谷酰转肽酶活性elisa试剂盒 保存条件：2-8℃ 保质期：6个月。 Tryptophan 中文名： 分子式：C11H12N2O2
γ-谷酰半胱酸合成酶（γ-GCS）测定试剂盒（速率法） Withaperuvin C 中文名： 分子式：C28H38O7
γ干扰素 英文名称： Rabbit γ Ierferon 规格： 48T/96T 英文缩写： IFN-γ Albendazole 中文名：阿苯达唑 分子式：C12H15N3O2S
β-整合素 英文名称： β-Iegrin 规格： 48T/96T 英文缩写： β-Iegrin Wallicoside 88797-59-5 中文名：断节参苷 分子式：C61H98O26 度：98.0% 关键词：
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文献和实验相关实验
SUPER Green Ⅰ（10,000× DMSO溶液，电泳级） SUPER Green Ⅰ核酸染料特点 ● 无毒性：属花箐类染料，容易生物降解，无致癌毒性。 ● 灵敏度高：至少可检出20pg DNA，高于EB染色法25～100倍。 ● 信噪比高：样品荧光信号强，背景信号低。 ● 操作简单：无须脱色或冲洗，即可直接用紫外凝胶透射仪或可见光透射仪观察。 ● 适用范围广：可适用于多种凝胶
进行区分，并绝对计数。与传统的显微镜计数及平板菌落计数法等相比，具有速度快，操作简便，结果准确的优点。材料与方法▶ 试剂▶ 样品制备Sample Type噬藻体；大肠杆菌；异弯藻Species病毒；细菌；藻类Age of specimen新鲜样本Prep Method1. 准备以下四管样本：噬藻体、大肠杆菌、异弯藻、三者混合（用 TE-buffer 稀释）；2. SYBR green I（Invitrogen，母液液为 10000×，DMSO 稀释，-20 ℃ 冰箱保存）。使用 时需要将母液稀释
O、5×RT Buffer、RT-Enzyme mix、RT-Primer mix 、2×SYBR Green PCR Mix、引物、在室温（15-25℃）解冻，解冻后迅速置于冰上。使用前将每种溶液涡旋振荡混匀，简短离心以收集残留在管壁的液体。 注：RNase稀释需在抽风口或远离PCR操作室的实验室。 2. 按照表1的基因组DNA的去除体系配制混合液，彻底混匀。简短离心，并置于42℃，孵育30min，以保证RNase有充分时间去降解RNA。然后置于冰上放置。 表1 gDNA去除
技术资料暂无技术资料 索取技术资料
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