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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
上海西格
- 库存:
47
- 样本:
体液、血清、血浆、细胞培养上清液、尿液、组织匀浆、心房水标本等等
- 标记物:
详见说明书
- 适应物种:
大鼠、小鼠、豚鼠、仓鼠、裸鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛、马铃薯、鹿、羊、鸡、鸭、鱼、人、等动植物
- 应用:
ELISA检测
- 检测方法:
详见说明书
- 检测范围:
用于检测血浆,血清及相关液体等样本
- 规格:
48T/96T
英文名称:Scavenger Receptor Class D Member 8
检测范围:0.3125ng/mL~10ng/mL
灵敏度:0.1
规格:96T/48T
保存;2-8℃。
检测目的:用于检测血浆,血清及相关液体等样本。例如灌洗液、脑脊液、血清、血浆、尿液、胸腹水、细胞培养上清、组织匀浆等标本.
检测种属:大鼠、小鼠、豚鼠、仓鼠、裸鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛、马铃薯、鹿、羊、鸡、鸭、鱼、人、等动植物。
实验流程:
1. 实验前标准品、试剂及样本的准备;
2. 加样(标准品及样本)100µL,37°C孵育1小时;
3. 吸弃,加检测溶液A100µL,37°C孵育1小时;
4. 洗板3次;
5. 加检测溶液B100µL,37°C孵育30分钟;
6. 洗板5次;
7. 加TMB底物90µL,37°C孵育10-20分钟;
8. 加终止液50µL,立即450nm读数。
备试剂与收集血样:
1. 收集标本:血清、血浆(EDTA 、柠檬酸盐、肝素抗凝)、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测, 2-8 ℃ 保存48 小时;更长时间须冷冻( -20 ℃或 -70 ℃ )保存,避免反复冻融。
2. 标准品液配制:使用前加入0.5ml 蒸馏水 混匀,配成 120 0ng/ml 的溶液 。 设标准 管 8 管,管加标本稀释液 900ul ,第二至第八管加入标本稀释液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的标准品溶液 100ul 混匀后用加样器吸出 500ul ,移至第二管 。如此反复作对倍稀释,从第七 管 中吸出 500ul 弃去。第八 管 为空白对照。
3. 10× 标本稀释液用蒸馏水作 1: 1 0 倍稀释( 示例: 1ml浓稀释液 +9ml 蒸馏水)。
4. 洗涤液:用重蒸水 1:20 稀释(示例:1ml 浓缩洗涤液加入 19ml 的重蒸水)
检测程序:
1. 加样:每孔各加入标准品或待测样品 100ul ,将反应板充分混匀后置 37 ℃ 120 分钟。
2. 洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤 4-6 次,向滤纸上印干。
3. 每孔中加入抗体工作液10 0ul 。将反应板充分混匀后置 37 ℃ 6 0 分钟。
4. 洗板:同前。
5. 每孔加酶标抗体工作液100ul 。将反应板置 37 ℃ 3 0 分钟。
6. 洗板:同前。
7. 每孔加入底物工作液100ul ,置 37 ℃ 暗处反应15 分钟。
8. 每孔加入100ul 终止液混匀。
9. 30分钟内用酶标仪在 45 0 nm 处测 吸光值。
性能:
1. 准确性:标准品线性回归与预期浓度相关系数R值,大于等于0.9900。
2. 灵敏度:检测浓度小于0.1 U/mL。
3. 特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
4. 重复性:板内、板间变异系数均小于15%。
5. 贮藏:2-8℃,避光防潮保存。
6. 有效期:6个月
使用方法:
测定法的灵敏度来自作为报告的酶。众所周知,酶是一种有机催化剂,很少量的酶即可诱导大量的催化反应,产生可供观察的显色反应现象。因此该体系常被称为酶放大体系。
1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。 24μg/ml 5号标准品 150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液
12μg/ml 4号标准品 150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液
6μg/ml 3号标准品 150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液
3μg/ml 2号标准品 150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液
1.5μg/ml 1号标准品 150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液
2. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。|
3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4. 配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7. 温育:操作同3。
8. 洗涤:操作同5。
9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
Mv 1 lu 貂肺上皮细胞烟酸腺嘌呤二核苷1酸钠盐质量规格:美国进口Nicotinic acid adenine dinucleotide phosphate salt
非洲绿猴肾细胞系/HCV-C;Vero-HCV-C烟酸腺嘌呤二核苷酸钠盐质量规格:美国进口Nicotinic acid adenine dinucleotide salt
UM-UC-3, 人膀胱移行细胞癌α-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸质量规格:美国进口α-Nicotinamide adenine dinucleotide
人急性母细胞性白血病细胞;MOLT-4 大鼠肺动脉成纤维细胞完全培养基 100mLNAD+, 锂盐质量规格:美国进口NAD+, Lithium Salt
心房肌细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)硫代水杨酸(>98%,BR)质量规格:>98%,BRThiosalicylic acid
正常大鼠肾细胞;NRK-52ED-泛醇5克2~8℃
CD70 Others Human 人 CD70 / CD27L / TNFSF7 人细胞裂解液 (阳性对照) 乙酸盐酸盐 3-Pyridylacetic acid hydrochloride,98% 6419-36-9 1G 通用试剂
人肝永生化细胞;THLE-3L-精安醋言醋盐;L-言醋蛋柏安基醋;L-言醋胍基务安醋;言醋L-精安醋 L-crgininq xy7nochloridq;L-GucnidinqcMinovclqric ccid xy7nochloridq 1119-34-
大鼠脑膜细胞(RMC)(5×105)邻本二酚紫50毫克保存:-20℃
CM-H048人胃粘膜上皮细胞完全培养基100mL1 ;录酸钠wo7ium hypochlorite
DLL4 Others Human 人 DLL4 人细胞裂解液 (阳性对照) 氧化铈25克
EB病毒转化的人B细胞;KMY0908三录叔丁醇 Chlorobutcnol
CD47 Others Rat 大鼠 CD47 人细胞裂解液 (阳性对照) 四乙酸二钠 (... EDTA di (SigmaGrade, for cell cu... 6381-92-6 100G 通用试剂
人卵巢成纤维细胞完全培养基 100mLPROTEINASSAYBRADFORDmetxODBRADFORD法蛋白检测试剂盒生物技术级1 KitCOLD
P3-X63-Ag8.653细胞,小鼠骨髓瘤细胞 Ana-1(巨噬细胞) 人正常上皮细胞;MCF 10A7524-52-9L-色酸盐酸盐metxyl L-tryptophanate xy7nochloride
人D类清道夫受体8ELISA检测试剂盒直销大鼠肺动脉成纤维细胞完全培养基 100mL羟基积雪草酸(标准品)Madecassic acid质量规格:HPLC≥98%,标准品
ROS1728 大鼠成骨细胞 Osteoblasts of ROS1728 rats EMEM +10 FBS羟基积雪草酸Madecassic acid质量规格:HPLC≥80%,BR
BTC Protein Human 重组人 BTC / Betacellulin 蛋白 (Fc 标签)海柯皂苷元Hecogenin质量规格:HPLC≥95%,标准品
MV3(人色素瘤细胞) 5×106cells/瓶×2 成纤维细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)灵芝酸 BGanoderic acid B质量规格:HPLC≥98%,标准品
上皮细胞培养基EpiCM-prf异夏佛塔苷Isoschaftoside质量规格:HPLC≥98%,标准品
操作流程:
(1)待测样品孔中每孔加入待测样品100μl,每种样品设3个平行孔;设两个阴性对照孔,每孔加未处理组的细胞裂解液100μl;另设一个空白对照孔,加入纯细胞裂解液100μl。
(2)酶标板置4℃,包被过夜。
(3)洗板:吸干孔内反应液,用洗涤液过洗一遍(将洗涤液注满板孔后,即甩去),之后将洗涤液注满板孔,浸泡1-2分钟,间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
(4)阴性对照孔每孔加入PBS 50μl,样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF抗体工作液50μl。
(5)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。
(8)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB显色液 100μl,轻轻混匀10s,置37℃暗处反应15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反应。
(12)分别测450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最终测得的OD值为两者之差(W1-W2),以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
(13)数据处理:在得出标本(S)和阴性对照(N)的 OD值后,计算S/N值。S/N≥2.1为阳性判定标准。产品仅用于科研
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文献和实验:分别是竞争性蛋白质结合分析法[3]、放射性免疫分析法[4]和薄层色谱法[5]。在80年代,放射性免疫分析法得到了广泛的应用和改进,由于这种方法采用放射性核素标记,应用范围受到一定限制,为了进一步提高检测的灵敏度和操作的安全性,进入90年代又陆续发明了各种酶标记法和化学发光法的竞争性ELISA检测试剂盒,这一类检测方法的根本原理都是基于抗体抗原的免疫反应,所有这些试剂盒中采用的抗体全部是兔抗血清或者是经过特异亲和提纯之后的抗cAMP或cGMP的兔多抗,毫无疑问,兔多抗在约四十年的cAMP,cGMP定量
了最重要的神经元抗原,实现高灵敏度及特异性的抗体检测,并且判读简便。 神经系统马赛克8检测试剂盒: 欧蒙公司间接免疫荧光系统采用猴小脑、猴神经、猴肠道组织、猴胰腺4种基质进行抗神经元抗体检测。 临床诊断PNS时,建议采用联合检测方案,即间接免疫荧光法与免疫印迹法同时检测血清抗神经元抗体。不同方法学之间相互验证,提高疾病确诊率。 NMDAR型脑炎 抗N-甲基-D-天冬氨酸受体(NMDAR)脑炎是一组关于记忆缺失、精神
性核素标记,应用范围受到一定限制,为了进一步提高检测的灵敏度和操作的安全性,进入90年代又陆续发明了各种酶标记法和化学发光法的竞争性ELISA检测试剂盒,这一类检测方法的根本原理都是基于抗体抗原的免疫反应,所有这些试剂盒中采用的抗体全部是兔抗血清或者是经过特异亲和提纯之后的抗cAMP或cGMP的兔多抗,毫无疑问,兔多抗在约四十年的cAMP,cGMP定量检测中做出了巨大贡献,但同时它也有着明显的缺陷: 1,兔多抗对cAMP,cGMP的特异性不高,会与其他核苷类似分子发生交叉
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