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文献和实验SYBR Green Quantitative PCR Protocol
the relative values for your gene of interest’s change in expression. SYBR qPCR Quick Protocol StandardsØ Dilute the cDNA ~4-fold (e.g. 21μl sample + 59μl H2 O = 80μl)Ø Pool an appropriate amount from each sample to create standard 1 (i.e. 30μl x
REAL TIME PCR WITH SYBR GREEN I 建议PROTOCOL
1、反应体系 25ulCocktail 20 ul: Primer FP 1 ul + Primer RP 1u + 2 * SYBR GREEN I MIX 12.5 + H2O 5.5 ul cDNA 5 ul2、Primer 浓度,需要摸索,从200nM到700nm等,设置不同浓度。3、每个引物浓度,从well 1到12设置4个样本,阳性cDNA 1和2,NTC以及H2O,做triplicate。4、若用ABI7000或7700,所有的PCR条件可设置成一致的,减少麻烦,当然,引物
据待测样品在标准曲线中的位置推算初始模板的浓度。它操作简便,通量高,结果准确可靠,为科研及临床检测工作提供了一种新的思路和方法。 本公司拥有多台Corbett公司最新的Rotor Gene 3000型荧光定量PCR仪,以该型PCR仪作为平台,成功地开发出了乙型肝炎病毒(HBV)和丙型肝炎病毒(HCV)荧光定量检测 试剂 盒。 Rotor Gene 3000采用独特的离心式设计,反应过程中样品
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