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使用Clontech公司的In-Fusion PCR Cloning Kit快两年了,在此谈谈心得。早期的In-Fusion PCR Cloning Kit是干粉,现在已经发展成为试剂盒,两种我都用过。此方法最大的优点就是不用考虑插入片段的正反性,只要链接成功就是阳性克隆。但是有时候链接效率低,比较不容易得到阳性克隆,因为我没有使用同类的其他链接方法,所以也不知道两者比较起来如何,但是据我的老师说这个方法效率高。在整个过程中,我觉得应该注意的有以下几点:1 载体的酶切效率。此法需要使用两种
突变的研究? 是否有人用过 In-Fusion PCR Cloning Kits ? 定量PCR重复性差,目的条带扩不出? 分析RT-PCR结果用什么软件好? real time rt-pcr的引物是否可以直接套用做反转录PCR? 根据目的基因设计的引物blast时看不到目的基因? 如何从外周血中检测WT1\MRP基因? ABI7000定量PCR仪为何不用用四温法做Q-PCR? 求助human VEGF-A和VEGF-C的引物
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