sigma特约代理商|P5147-1G 蛋白酶 来源于灰色链

根分生细胞核蛋白质提取

磷酰胺（DEPC)   (Sigma) 、30% 甘油及蛋白酶抑制剂 [ 含有 1 μg/ml 抑肽酶（aprotinin) 、1 μg/ml 胃蛋白酶抑制剂（pepstatin) 、1 μg/ml 亮抑酶肽（leupeptin) 、0.1 mmol/L PMSF ] ，所有药品都来自于 Sigma  ( 见注释 1 和注释 2) 。注意：媒介中的两种成分—— DEPC 和 β-巯基乙醇是有毒的，需要在通风橱中进行准备，并需要戴化学防护手套。 2.2 细胞核的提纯 ( 1 )  样品

植物蛋白质组学和糖基化

乙酸钠缓冲液，pH 5.7。 ( 3 ) 内切糖苷酶 H : 来源于灰色链霉菌的内切糖苷酶 H，经大肠杆菌重组（Roche Applied  Science) ( 保存在 2~8°C，冰冻会使酶失活) 。 ( 4 ) 0.1 mol/L Tris-HCl 缓冲液，pH 7.5，含 0.1% SDS。 ( 5 ) 0.1 mol/L Tris-HCl 缓冲液，pH 7.5，含 0. 5% Nonidet  P40。 ( 6 ) Nonidet P40 ( 现称为 IGEPAL

不同的胞外蛋白酶活性造成肿瘤特异的血清多肽组表达模式

选定的肽段位于交叠序列簇，包括最初的68个单同位素m/z值中的46个（图2及补充表2）。另外23个肽经推测后采用靶MS/MS分析，与已知的序列簇匹配。总体上，61个肽段对于至少一种癌症具有明显的标记物可能性（校正P m/z = 2021.05) 和纤维蛋白素原a簇的1个成员 (m/z = 2553.01) 离子信号接近(见图3： 2021和图 6) ，因此可作为有效的内标（黄色）。6个肽段（粉色）为随机出现。括号中的残基在本实验中未观察到，但或为全长的建立者多肽，或为胰蛋白酶样切割位点处(Arg