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上海玉博生物科技有限公司
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文献和实验素/100mg/ml链霉素，临用前加入10%或20%FCS（v/v，胎牛血清），用1N NaHCO3调节pH值7.4，抽滤灭菌后4℃保存。 6、0.25%胰蛋白酶（DMEM配）胰蛋白酶250mgDMEM 100ml 抽滤分装小青瓶，-20℃冻存 7、0.25%胰蛋白酶（RPMI 1640配）胰酶250mg，加RPMI 1640 100ml，用0.1N NaHCO3调节pH至7.4，灭菌后4℃保存。 8、 Hank’s平衡盐溶液：5.4mM KCl, 0.3mM Na2HPO4, 0.4mM KH
PO4・H2O, 0.75g/L KCl, 0.246g/L MgSO4・7H2O,pH7.0。室温可以存放一年。 X-gal: X-gal(5-bromo-4-chloro-3-indoly-β-D-galactopyranoside) 溶于DMF (N,N-dimethylformamide)中，终浓度为20mg/ml。 2.4 诱饵基因筛库 2.4.1 转化法筛选组织库 1) 5-10 个2mm 克隆接种于1ml SD/-Trp 液体培养基中，混匀后转入150ml
。 9. 室温离心2000xg×5min，尽量弃上清。 10. 以6.0ml 100mm，每稀释度各×2)，30℃倒置培养3-5天，确定转化效率在2×106cfu以上有效。fl稀释不同倍数，涂布SD/-Ura，-His，-Trp固体培养板(m1×TE重悬沉淀细胞，取10 150mm×30)，30℃倒置培养3-5天。fl涂布SD/-Ura，-His，-Trp固体培养板(m11. 按每板200 SD/-Ura，-His，-Trp固体培养基，115℃，10lb
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