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- Worthington
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- 2025年07月09日
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文献和实验大肠杆菌亮氨酰-tRNA合成酶E292对于氨基酰化活性的作用
得到：1 A280 =1.62 mg/ml。 4. 酶活力测定 1) 氨基酸活化反应的条件如下：35ul反应液中含有100 mM HEPES (pH 7.8)，10mM KF，10 mM MgCl2 ，4 mM ATP，2 mM [32 P] PPi和1 mM亮氨酸，在37o C保温，用约4 nmol/L LeuRS起始反应，于不同时间，取出15ul反应液，加入200ul淬灭液中(3.5%高氯酸，2%活性炭和0.05 M焦磷酸钠)停止反应，在淬灭液中再加入5毫升10 mM焦
Crystallization of Kinesin Family Motor Proteins
631APDB: 1F9WP43a=62.9 Åc=153.6 Å2.5 ÅMolecular replacement Ncd 293 - 700PDB: 1N6MC2a= 162.6Åb= 66.6Å c= 94.8Å2.5 ÅMolecular replacementRotation of stalk by 75°KIF1AAMPPNP:PDB: 1VFVPDB: 1VFWADP-AlFx:PDB: 1VFXADP-Vi:PDB: 1VFZAMPPNP1:P212121AMPPNP2:P
In vitro transcription reaction
1 ml linearized DNA template pBS-SK- ERD (X-E) (0.1-0.5 mg) 7.8 ml DDW 5 ml 5X transcription buffer ( stratagene ) 1 ml 750 mM DTT 1 ml Rnasin (RNase inhibitor; 15U/ml) 1 ml 10 mM ATP (pH 7) 1 ml 10 mM CTP (pH 7) 1 ml 10 mM GTP (pH 7) 1 ml
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