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文献和实验Technologies) 100% ethanol 2X loading dye (95% formamide, 20 mM EDTA, 0.05% bromophenol blue, 0.05% xylene cyanol) 2. Methods (Under sterile, RNase free conditions) Note: The protocol was utilized to screen for tumor-specific alterations
of a 10% gel 4 ml H2O 3.3ml 30% acrylamide/bisacrylamide (29:1 mix) 2.5 ml1.5M Tris(PH 8.8) 10% SDS 100 µl 10% ammonium persulfate 100 µl TEMED 8 µl 2. Stacking gel: 4 ml 2.7ml water 1 ml 0.67ml 30% acrylamide/bisacrylamide (29:1 mix) 0.ml 1.0M
James Hardwick CNBr Cleavage Procedure
1. Immunoprecipitate the protein and run it on a preparative gel. CNBr cleavage must be done with protein transferred to a nitrocellulose filter. Neither Immobilon nor Nylon can substitute. IMPORTANT: Wash the NC 2X for 15 min
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