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膜蛋白纯化攻略分享

柱体积 30%。 分子筛 膜蛋白的纯化流程中，分子筛是理想化的最终步骤。不仅可以去除聚集体以及与目的蛋白大小不同的杂质，还可以进行缓冲液更换。这些因素往往能够决定后续的结构测定是否顺利。 推荐使用高分辨率分子筛大体积预装柱 Superdex 200 Increase 10/300 GL 和 Superose 6 Increase 10/300 GL。其最大上样量可达 500μL。   案例分析 外膜蛋白 A (Outer membrane protein A, OmpA） 是革兰氏阴性菌外膜蛋白质的主要

最难搞的膜蛋白纯化攻略来了！

5 ml 或 HiPrep 26/10 Desalting 53 ml 两种常用柱型。最终上样体积不要超过柱体积 30%。 分子筛 膜蛋白的纯化流程中，分子筛是理想化的最终步骤。不仅可以去除聚集体以及与目的蛋白大小不同的杂质，还可以进行缓冲液更换。这些因素往往能够决定后续的结构测定是否顺利。 推荐使用高分辨率分子筛大体积预装柱 Superdex 200 Increase 10/300 GL 和 Superose 6 Increase 10/300 GL。其最大上样量可达

v468 Chapter 2 Wnt活性蛋白分离及应用

Filtration 1. Sample: 5–10 mL pooled Wnt3A-containing fractions fromSection 2.3.2 . 2. HiLoad 26/60 Superdex 200 preparative grade. 3. Buffer: 1× PBS, 1% (w/v) CHAPS. 4. Syringe (30 mL) with 0.2-μm pore size filter. 2.3.4. Step 4: Heparin