GE特约代理商|17097303 苯基琼脂糖6FF|Phen

A High‐Throughput Screening Method for Identification of Inhibitors of the Deubiquitinating Enzyme USP14

) Lysozyme (various commercial sources): prepare 10 mg/ml in water or add directly to lysis buffer at 1 mg/ml as powder Glutathione‐Sepharose 4 Fast Flow resin (GE

【资源】蛋白纯化经验指南（）

-sepharose CL-4B使疏水层析,我现在就这种柱子,我想问的是装填料的时候用的玻璃柱株高和直径的比值大的还是小的,洗脱蛋白时会使洗脱的蛋白峰值高一些,谢谢 这个酶纯化应该可以用亲和的方法做吧,其实只要把青霉素G偶联到琼脂糖凝胶上就可以特异用于这个酶的纯化.苯基琼脂糖凝胶浓缩可以,但是除盐不好,你想浓缩效果好,你可以把硫酸铵的浓度提高到2.5M再挂在柱子上,直接用ph7.5,0.05mol/L的磷酸缓冲液洗就应该可以.你想浓缩的效果好,那尽量用短粗柱子,也就是径高比大的柱子.这样扩散少些.此外要用高载量

蛋白纯化经验指南

下来就可以了。 最好还是用乙醇，浓度很难说，因为和你的蛋白浓度有关，别的醇用得很少。此外你可以考虑用硫酸铵沉淀，这样对活性更好些。纯化也可以用疏水，因为它在苯基琼脂糖凝胶柱子上能被吸附，配合硫酸铵沉淀也是不错的选择。 33）楼主，我想问一下phenyl-sepharose CL-4B有没有浓缩作用，以前有人做过，克也在纯化时，浓缩5-10倍，可是，我却没有使纯化的蛋白浓缩，我想得到浓度较高的蛋白，又想省去浓缩这步，楼主能不能指点我一下，缓冲液的流速以及柱子的选择上有什么要求，使洗脱下来的蛋白浓度会较高， 亲和