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上海研谨生物
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蛋白双向(2-D)电泳实验代做服务
服务名称: 蛋白双向(2-D)电泳实验服务
规格: 实验服务
价格: 500元
收费标准/服务周期/提供结果:
欢迎咨询详谈,我们会根据您的方案及需求制定详细的服务协议。
更多实验技术服务请浏览网站其他内容,或来电详询!
蛋白双向(2-D)电泳实验服务
实验技术简介:
双向电泳(two-dimensional electrophoresis)是等电聚焦电泳和SDS -PAGE的组合,即先进行等电聚焦电泳(按照pI分离),然后再进行SDS-PAGE (按照分子大小), 经染色得到的电泳图是个二维分布的蛋白质图。
实验原理:
双向电泳是目前为止zui有效、使用最多的蛋白分离方法。差异蛋白质组学是在双向电泳后用考麻斯亮蓝、银离子或荧光染料等将蛋白斑点染色,然后比较差异。本公司在各类微生物、培养细胞、动植物组织(如动物软硬组织、体液、植物种子、叶子等)、亚细胞组分的双向电泳分离及后续质谱鉴定中均有丰富的经验。
蛋白质组学双向电泳技术服务项目:
1.根据客户需求定制蛋白质组学实验方案
2.各种规格胶条长度的双向电泳
3.考麻斯亮蓝染色、银离子染色; .
4.DIGE系统双向电泳。
5.图像分析
6.切胶质谱分析
服务说明:
1.我们的实验只对我们制作的样本负责,如您提供的是直接做等点聚焦的样本,我们不敢保证蛋白的有效分离。
2.蛋白质组学实验的总体实验流程;
实验流程:
1、样本制备
2、固相预制胶条水化
3、第--向等电聚焦(IEF)
4、胶条平衡→第二向SDS-PAGE电泳
5、凝胶染色检测
6、图片扫描
双向电泳服务结果提交:
1、实验的试剂耗材、仪器设备、操作过程--份;
2、实验结果凝胶扫描图片;
3、电泳凝胶(可收费干胶) ;
4、剩余样本。
说明:
1.样品制备指可用通常程序处理的原样,如样品较特殊(需要去除核酸、盐等杂质或需要浓缩),价格将视进一步处理的难度和耗材用量另行商定;
2.建议客户提供的原样(组织、细胞、菌体等)湿重不少于100mg如直接提供蛋白提取物,则浓度不少于4ug/ul,总量不少于5mg;
3.样品的还原和烷基化过程一般在制备时进行;
4.图象处理与切胶主要是手I操作成本。
客户方需提供:
细胞,组织或蛋白。
实验周期:
5-10天
可提供技术支持: .
1、从现有的生物有机体基因组中,经过酶切消化或PCR扩增等方法,获得带有目的基因的DNA片段。
2、在体外,将带有目的基因的外源DNA片段连接到具有选择标记的载体分子上,形成能够自主复制的重组DNA分子。
3、将重组DNA分子转移到适宜的受体细胞,并使其一起增殖。
4、从大量的细胞繁殖群体中,筛选出获得了重组DNA分子的受体细胞克隆。
5、由筛选出来的受体细胞克隆,提取出已经得到扩增的目的基因,供进一步分析研究使用。
6、将分离到的目的基因克隆到表达载体上,导入受体细胞,使之在新的遗传背景下实现功能表达,产生出人类所需要的物质。
实验代做服务:
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文献和实验第一向(等电点聚焦, IEF ) 1 )凝胶条的准备 1. 以帽凝胶端( 2 个校准环: 4mm 和 10mm )朝下,将 4 根玻璃管插入两个凝胶灌注装置的每个托架中,这样玻璃管恰好站在两个分隔室之一的“充填船”上。从玻璃管顶端到玻璃管底端拉入 PP 线(小心,线不易移动),否则以后将不能用它们将胶溶液拉上来。 2. 溶解分离胶溶液和过硫酸铵溶液。必须监控凝胶溶液的温度,因为高温下(大于
【转帖】2-D Clean-Up Kit 双向凝胶电泳--蛋白纯化
2D proteomics has become a method of choice for comparing the complete protein profile of any two cells (be it from the same or different organisms). Isoelectric point (pI) and molecular weight are used to separate these biomolecules
蛋白质的双向电泳实验方法第一向(等电点聚焦,IEF)1)凝胶条的准备1.以帽凝胶端(2个校准环:4mm和10mm)朝下,将4根玻璃管插入两个凝胶灌注装置的每个托架中,这样玻璃管恰好站在两个分隔室之一的“充填船”上。从玻璃管顶端到玻璃管底端拉入PP线(小心,线不易移动),否则以后将不能用它们将胶溶液拉上来。2.溶解分离胶溶液和过硫酸铵溶液。必须监控凝胶溶液的温度,因为高温下(大于25℃)聚合作用太快。3.分离胶溶液除气4分钟,在桌子边缘轻弹玻璃管壁,避免产生气泡。4.融化帽凝胶溶液,除气,步骤
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