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- 上海一研
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- EY-R97758
- 2025年07月12日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
100
- 供应商：
上海一研
- 检测范围：
250pg/ml8000pg/ml
- 检测方法：
ELISA Kit
- 应用：
10
- 适应物种：
详见说明书
- 标记物：
详见说明书
- 样本：
Zeta Chain Associated Protein Kinase 70kDa
- 规格：
48T/96T
本试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织匀浆及相关液体样本中的含量。
有效期：6个月
保存条件：2-8℃
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实验所需自备试验器材：
1. 酶标仪（450nm）
2. 高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3. 37℃恒温箱
4. 蒸馏水或去离子水 实验结果计算： 绘制标准曲线：在Excel工作表中，以标准品浓度作横坐标，对应OD值作纵坐标，绘制出标准品线性回归曲线，按曲线方程计算各样本浓度值。
操作流程如下：
（1） 仅用于科研待测样品孔中每孔加入待测样品100μl，每种样品设3个平行孔；设两个阴性对照孔，每孔加未处理组的细胞裂解液100μl；另设一个空白对照孔，加入纯细胞裂解液100μl。
（2）酶标板置4℃，包被过夜。
（3）洗板：吸干孔内反应液，用洗涤液过洗一遍（将洗涤液注满板孔后，即甩去），之后将洗涤液注满板孔，浸泡1-2分钟，间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
（4）阴性对照孔每孔加入PBS 50μl，样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF抗体工作液50μl。
（5）酶标板置37℃培养箱的湿盒内，孵育60min。
（6）洗板，同（4）。
（7）每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液100μl。
（8）酶标板置37℃培养箱的湿盒内，孵育60min。
（9）洗板，同（4）。
（10）每孔加TMB显色液100μl，轻轻混匀10s，置37℃暗处反应15-20min。
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反应。
（12）分别测450nm吸光值W1和630nm吸光值W2，最终测得的OD值为两者之差（W1-W2），以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
（13）数据处理：在得出标本（S）和阴性对照（N）的OD值后，计算S/N值。S/N≥2.1为阳性判定标准。
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文献和实验细胞信号转导起始阶段发挥作用的成分主要有四种：lfck／Fyn(属SroPTK)、CD3(链、ZAP―70(属Syk PTK)和衔接蛋白LAT。ZAP―70不同于SrcPTK，系游离于胞质中的PTK而不属于受体关联性蛋白激酶，因而多聚作用无助于它的活化。它的激活首先是因为带有两个SH2结构域，可被ζ链上已发生磷酸化的ITAM优先招募到受体分子附近，有机会接近SrcPTK并被磷酸化，然后作为另一个家族的PTK发挥作用。
，ARAM是TCR信号转导的结构基础，单独分离的ARAM能够转TCR介导的信号。TCR与抗原结合后可激活一些PTKs，包括TCR相连的p59fyn 、ZAP-70（ζassociated protein-70)、CD4/CD8相连的p56lck 以及其它src相关的PTKs（图8-2），随后引起多种底物的酪氨酸磷酸化。 图8-2 TCR与抗原结合后导致一些激酶的活化 目前证实TCR激活的PTKs底物有原癌基因产物Vav、42kDa的微管相关蛋白激酶（Mi
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