- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
100
- 细胞类型:
贴壁生长
- 物种来源:
详见说明书
- 免疫类型:
详见说明书
- 细胞形态:
成纤维细胞
- 运输方式:
电询
- 年限:
详见说明书
- 生长状态:
详见说明书
- 规格:
5*10^5
2) 细胞鉴定:卵泡刺激素受体(FSHR)免疫荧光染色为阳性。
3) 经鉴定细胞纯度高于90%。
4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。
5) 细胞生长方式:不规则细胞,贴壁培养。
ELISA KIT 小鼠抗肌内膜抗体IgA 96T
ENK(Human enkephalin) ELISA Kit 人脑啡肽 96T
Kim-1 ELISA Kit 大鼠肾损伤分子1 96T
AMA ELISA Kit 大鼠抗单核细胞抗体 96T
FE(Mouse ferritin) ELISA KIT 小鼠铁蛋白 96T
P Gamma(Human Peptide Gamma) ELISA Kit 人γ肽 96T
CA-2(Mouse carbonic anhydrase 2) ELISA KIT 小鼠酶2 96T
CNP(Human C -type natriuretic peptide) ELISA Kit 人C型钠尿肽 96T
OLAb ELISA Kit 大鼠氧化低密度脂蛋白抗体 96T
Orexin A(Human Orexin A) ELISA Kit 人阿立新A 96T
ASMA ELISA Kit 大鼠抗平滑肌抗体 96T
PEDF(Mouse pigment epithelium-derived factor) ELISA KIT 小鼠色素上皮衍生因子 96T
ADAM8(Mouse A Disintegrin And Metalloprotease 8) ELISA KIT 小鼠解整合素样金属蛋白酶8 96T
NF-KapB p65 ELISA Kit 大鼠核因子κB亚基p65亲和肽 96T
NP-Y(Human neuropeptide Y) ELISA Kit 人神经肽Y 96T
AT(Mouse Anti-trypsin) ELISA KIT 小鼠抗胰蛋白酶 96T
BGP/Gehrelin(Human brain-gut peptides) Elisa kit 人脑肠肽 96T
TAFI ELISA Kit 大鼠纤溶抑制因子/凝血酶激活的纤溶抑制物 96T
ACH(Human acetylcholine) ELISA Kit 人乙酰胆碱 96T
GP- II b III a/CD41+CD61 ELISA Kit 大鼠血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa 96T
ICA(Mouse islet cell antibody) ELISA KIT 小鼠胰岛细胞抗体 96T
TSP-1 ELISA Kit 大鼠血小板反应蛋白/凝血酶敏感蛋白1 96T
Kim-1(Mouse Kidney injury molecule 1) ELISA KIT 小鼠肾损伤分子1 96T
肝窦内皮细胞BNP(Human brain natriuretic peptide) ELISA Kit 人脑钠素/脑钠尿肽 96T
CK20(Human cytokeratin 20) ELISA Kit 人细胞角蛋白20 96T
ON ELISA Kit 大鼠骨粘连蛋白 96T
AMA(Mouse anti-Monocyte antibody) ELISA KIT 小鼠抗单核细胞抗体 96T
Lp- Alpha(Mouse lipoprotein Alpha) ELISA Kit 小鼠脂蛋白α 96T
Beta-EP(human Beta-Endorphin) ELISA Kit 人β内啡肽 96T
FFA ELISA Kit 大鼠游离脂肪酸 96T
NT-proBNP(Human N-terminal pro-brain natriuretic peptide) ELISA KIT 人N端前脑钠素 96T
FA ELISA Kit 大鼠叶酸 96T
Big ET(Mouse Big Endothelin) ELISA Kit 小鼠大内皮素 96T
F VIII -Ag(Mouse coagulation factor VIII related antigen) ELISA Kit 小鼠凝血因子Ⅷ相关抗原 96T
Pro-ANP(Human Pro Atrial Natriuretic Peptide) ELISA Kit 人前心钠肽 96T
histon-H2b ELISA Kit 大鼠组蛋白H2b 96T
NT-proBNP ELISA KIT 大鼠N端前脑钠素 96T
F IX (Mouse Fcoagulation factor IX ) ELISA Kit 小鼠凝血因子Ⅸ 96T
细胞传代步骤:
如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
1.弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3.按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4.将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
细胞复苏步骤: 将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
细胞冻存步骤:
待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶,细胞变圆脱落后,加入2ml完全培养基终止消化,可使用血球计数板计数。
2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。
3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。运输和保存视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。
1) 1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。
2) T-25培养瓶充满完全培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。
注意事项:
1. 培养基于4℃条件下可保存3-6个月。
2. 在细胞培养过程中,请注意保持无菌操作。
3. 传代培养过程中,胰酶消化时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁及其生长状态。
4. 建议客户收到细胞后前3天每个倍数各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和技术部沟通;由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联系,详尽告知细胞的具体情况,以便我们的技术人员跟踪、回访直至问题得到解决。
5. 该细胞只可用于科研。
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文献和实验美丽小鸟 我现在用肝窦内皮细胞做冷缺血再灌注方面的实验,即模拟肝移植过程对肝窦内皮的损伤。 现在建模过程:把肝窦内皮细胞种于96孔板(10%DMEM高糖培养基),待36小时细胞完全贴壁后,把96孔板置于4摄氏度有机玻璃箱中通氮缺氧。 问题:此过程只模拟了缺氧、温度(4度),但培养基没有更换。真实肝移植过程是用UW液浸泡器官,而不是10%DMEM培养基。所以我的实验细胞低温缺氧24小时后仍未出现明显细胞死亡,而在肝移植器官冷保存时24小时
thx221 有没有哪位大侠做内皮细胞方面的信号转导的???帮忙给提供几个通路做参考!或者给我点相关的最新研究文献!我实在是找不到这方面的最新研究进展,大家帮个忙吧!先谢谢了!!! 编年张 加此QQ492207858 chuckdouble thx221 wrote: 有没有哪位大侠做内皮细胞方面的信号转导的???帮忙给提供几个通路做参考!或者给我点相关
hbsyliuyang rt 请不吝赐教 感谢! david_xmu 没什么太大的区别,另外内皮细胞在不同的培养基中培养可能会有形态上的区别 hbsyliuyang 谢谢这位达人! 拜 本文由丁香园论坛提供,想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你,都可以成为师兄的好伙伴 师兄微信号:shixiongcoming
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