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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
100
- 供应商:
上海莼试
- 检测范围:
10ng/mL~320ng/mL
- 检测方法:
ELISA
- 应用:
1
- 适应物种:
详见说明书
- 标记物:
详见说明书
- 样本:
ATP-binding cassette transporter G2
- 规格:
48T/96T
试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被检测试剂盒抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成*终的黄色。颜色的深浅和样品中的2检测试剂盒呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。
样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
试剂的准备
20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。
洗板方法
1. 手工洗板:甩尽孔内液体,每孔加满洗涤液,静置1min后甩尽孔内液体,在吸水纸上拍干,如此洗板5次。
2. 自动洗板机:每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。
操作步骤
1. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2. 设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;
3. 样本孔先加待测样本10μL,再加样本稀释液40μL;空白孔不加。
4. 除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5. 弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。
ZNHIT1 细胞周期蛋白1结合蛋白抗体
ZNF318 锌指蛋白318抗体
ZNF281 锌指蛋白281抗体
ZNF274 锌指蛋白274抗体
ZNF81 锌指蛋白81抗体
ZNF148 锌指蛋白148抗体
ZNF342 锌指蛋白342抗体
ZNF350 锌指蛋白350/乳腺癌易感基因1结合蛋白抗体
ZNF263 锌指蛋白263抗体
ZNF195 锌指蛋白195抗体
ZNF266 锌指蛋白266抗体
ZNF786 锌指蛋白786抗体
ZNF772 锌指蛋白772抗体
ZNF740 锌指蛋白740抗体
ZNF843 锌指蛋白843抗体
ZNF619 锌指蛋白619抗体
ZNF131 锌指蛋白131抗体
ZNF131 锌指蛋白131抗体
ZNF449 锌指蛋白449抗体
人腺苷三磷酸结合盒转运体G2检测试剂盒ZNF346 锌指蛋白346抗体
ZNF532 锌指蛋白532抗体
ZNF516 锌指蛋白516抗体
ZNF750 锌指蛋白750抗体
ANKZF1 锌指蛋白744抗体
ZNT8 锌转运体8蛋白抗体
ZNF852 锌指蛋白852抗体
ZNF503 锌指蛋白503抗体
ZNF672 锌指蛋白672抗体
ZMYM2 锌指蛋白198抗体
ZNF323 锌指蛋白323抗体
ZNF206 锌指蛋白206抗体
Zonula occludens protein 3 紧密粘连蛋白ZO-3抗体
ZBT10 锌指蛋白ZBT10抗体
ZBED2 锌指蛋白BED抗体
ZNF217 锌指蛋白217抗体
ZNF575 锌指蛋白575抗体
ZFX 锌指蛋白X染色体蛋白抗体
ZAK 宫颈癌抑制蛋白4抗体
ZAN 透明带黏附蛋白ZAN抗体
ZBTB2 锌指蛋白437抗体
ZNF415 锌指蛋白415抗体
ZBTB25 锌指蛋白46抗体
ZNF93 锌指蛋白93抗体
ZNF568 锌指蛋白568抗体
ZNF473 锌指蛋白473抗体
ZFAND5 AN1型锌指蛋白5抗体
ZNF146 锌指蛋白146抗体
ZNF23 锌指蛋白23抗体
ZDHHC17 NFκB激活蛋白205抗体
ZNF312B 锌指蛋白321B抗体
ZBTB22 锌指蛋白297抗体
ZBTB12 锌指蛋白ZBTB12抗体
ZEB1 负调控因子白细胞介素2抗体
ZnT-1 锌转运蛋白1抗体
phospho-ZCWCC1 磷酸化ZCWCC1抗体
ZNF598 锌指蛋白598抗体
ZNF537 锌指蛋白537抗体
ZSWIM3 ZSWIM3蛋白抗体
ZSWIM2 E3泛素蛋白连接酶ZSWIM2抗体
ZNRF4 锌指/环指蛋白4抗体
ZNF828 锌指蛋白828抗体
ZO-1 胞质紧密粘连蛋白1抗体
ZIP Kinase 凋亡相关蛋白激酶3抗体
ZNF211 锌指蛋白211抗体
ZNF749 锌指蛋白749抗体
phospho-ZAP70 磷酸化zeta相关蛋白70抗体
Z DNA binding protein Z DNA结合蛋白抗体
ZADH1 锌结合乙醇脱氢酶结构域蛋白1抗体
ZBTB26 锌指蛋白481抗体
ZBTB34 锌指蛋白ZBTB34抗体
ZBTB43 锌指蛋白297B抗体
ZBTB46 锌指蛋白340抗体
ZBTB48 锌指蛋白855抗体
ZBTB5 锌指蛋白ZBTB5抗体
ZBTB6 锌指蛋白ZBTB6抗体
ZBTB7C 锌指蛋白ZBTB7C抗体
ZBTB8A 锌指蛋白ZBTB8A抗体
ZBTB8B 锌指蛋白916B抗体
ZBTB4 锌指蛋白903抗体
ZBTB40 锌指蛋白923抗体
ZNF288 锌指蛋白288抗体
ZNF185 锌指蛋白185抗体
ZNF431 锌指蛋白431抗体
ZNF379 锌指蛋白379抗体结果判断
绘制标准曲线:在Excel工作表中,以标准品浓度作横坐标,对应OD值作纵坐标,绘制出标准品线性回归曲线,按曲线方程计算各样本浓度值。
试剂盒性能
1. 准确性:标准品线性回归与预期浓度相关系数R值,大于等于0.9900。
2. 灵敏度:检测范围1-50ng/mL,检测浓度小于1.0 ng/mL。
3. 特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
4. 重复性:板内、板间变异系数均小于15%。
5. 贮藏:2-8℃,避光防潮保存。
6. 有效期:6个月
操作注意事项
1. 试剂盒保存在2-8℃,使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解后再使用。
2. 实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。
3. 标准品稀释液即可视为阴性对照或者空白;预处理后的样本无需稀释,直接取10μL加样即可。
4. 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
5. 所有液体组分使用前充分摇匀。
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文献和实验膜的外侧。Annexin-V是一种35-36KD的钙粒子依赖的磷脂结合蛋白,它对PS具有较高的亲和力。细胞凋亡时,可以和外翻的PS结合,从而可以检测凋亡的细胞。发生死亡的细胞其细胞膜上的PS也外翻,因而也会阳性。因此,常用的凋亡试剂盒除了采用Annexin-V标记之外,还会加一种DNA染料,常用的有PI和7-AAD,由于死亡的细胞膜通透性增高,染料可以进入细胞内和DNA结合,从而可以发荧光,区分出死细胞。下图给出的是在使用FAS单抗诱导前后的检测结果,横坐标是Annexin-V FITC,纵坐标是PI
肝脏凋亡的检测,觉得首先跑电泳检测比较方便 zhaohu552211 感谢大家!我现在做的是大鼠的肝脏组织,不是细胞,在这种情况下我可以做AnnexV嘛?我知道AnnexV可以做细胞的,如果可以做组织的话,我定那家的试剂盒,具体要注意什么? 听说这个电泳很难掌握条件!再次感谢大家! zhaohu552211 各位大侠:请问凋亡试剂盒做组织,那家的产品比较好啊 ?现在急求?多谢! Fasta921 ApoAlertTM LM-PCR Ladder Assay (CLONTECH)优点
Q:Annexin V 凋亡检测试剂盒的原理是什么? A:Annexin V 是一种钙离子依赖性磷脂结合蛋白,与磷脂酰丝氨酸 PS 有高度亲和力,可通过细胞外侧暴露的 PS 与凋亡早期细胞胞膜结合,将 Annexin V 标记荧光染料如 FITC 利用流式细胞仪或荧光显微镜可检测细胞凋亡。 碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)或 7-AAD 可与双链 DNA 特异性结合,并产生强烈的荧光,正常情况下无法透过细胞膜。由于凋亡晚期或坏死细胞膜丧失完整性,核染料 PI 或 7-AAD
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