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- 伊塔生物
- 中国/进口
- YT1316
- 2025年07月15日
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ITTABIO
- 保质期：
3年
- 英文名：
LIPOFECTAMINE2000(脂质体2000）
- 库存：
55
- 供应商：
北京伊塔生物科技有限公司
- CAS号：
13321
- 规格：
1.5ml
脂质体2000 脂质体2000 名称：脂质体2000 脂质体2000 货号：YT1316 英文名称：LIPOFECTAMINE2000(脂质体2000） 品牌：伊塔生物 CAS:133211规格：1.5ml，
11668019脂质体2000
11668019脂质体2000 描述 脂质体2000是专门用于将核酸转染进入真核细胞的一种形式，
我们提供下列的建议： 在多种细胞和培养板中都有很高的转染效率。
在网上列出的细胞类型中都获得了较高的转染效率。
核酸-脂质体2000的复合物可以直接加入到细胞培养液中，无论是有血清还是无血清的情况。
转染之后不用移除复合物或者更换培养液，但是复合物应在转染后4-6h移除。
转染的一些重要指导 DNA转染使用page3 我们建议使用Opti-MEM I reduced serum 培养基来稀释11668019脂质体2000和核酸。
转染时不要向培养基中加入抗生素。 在实验过程中要保持一样的条件
DNA转染 使用下列方法在24孔板内转染DNA进入哺乳动物细胞。对于其他的板子，
可以参考page4.所有的数量和体积都是基于一个孔的剂量。
准备复合物使DNA（ug）：脂质体（ul）的比例为1:2到1:3。
转染时细胞密度较高可以获得高的效率，高的表达水平，以及使毒性降低。
条件的选择很重要。 1. 贴壁细胞：在转染前一天，向24孔板内接种0.5-2*105个细胞，使得细胞在转染时融合 率达到90-95%。
切记使用不含抗生素的培养基。
2. 对于每一个转染样品，按照如下方法准备复合物：
A． 使用无血清的培养基将DNA稀释为50ul，温和混匀。
B． 使用前混匀11668019脂质体2000，然后用培养基将一定量的脂质体2000稀释为50ul。室温 孵育5min。 进行到c时间不超过25min
C．5min的孵育后，混合稀释的DNA和稀释的脂质体2000（总体积为100ul）。温和混匀，室温孵育20min（溶液呈现云雾状）。
混合物在室温可稳定存在6h。
3. 向含有细胞和培养液的板子中每孔加入100ul的复合物，通过敲打板子和来回晃动使其 混合均匀。
4. 细胞孵育18-48h后可检测转染情况。培养液可在转染4-6h后更换。
5. 对稳定的细胞系：传代细胞在转染后以1:10的比例加入新鲜的培养液。
第二天加入选择 培养基。 优化转染 为了获得高的转染效率和低毒性，通过调整细胞浓度和DNA11668019脂质体2000的比例来优化转染条件。
确保细胞90%的融合，以及DNA(ug)：脂质体（ul）比例在1:0.5到1:5。
转染条件的浮动 转染到不同类型的培养板中，
脂质体2000的，核酸的量，细胞数以及合适的培养基量，都在下表中显示。在96孔板中，建议总体积到50ul
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文献和实验«Inhibitory effects of aan aqueous extract from Cortex Phellodendri on the growth and replication of broad-spectrum of viruses in vitro and in vivo»作者Jae-Hoon Kim 影响因子PMID: 27484768PMCID: PMC4970287DOI: 10.1186/s12906-016-1206-x Faecalicatena absiaana sp. nov., an obligately anaerobic bacterium from a pig farm faeces dump.作者Shin Y, Paek J, Kim H, Kook JK, Chang YH.Int J Syst Evol Microbiol. 2022 Feb;72(2). 影响因子doi: 10.1099/ijsem.0.005238.PMID: 35159617
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1.应该是可以的，但是脂质体2000的细胞毒性的确比较大，如果细胞比较敏感的话不建议使用。罗氏的FugeneHD细胞毒性比较小，而且效率也高，特别是对原代细胞，肿瘤细胞和干细胞。悬浮细胞的话还是电转吧。2.可以，用脂质体2000转染Hela细胞，没感觉对Hela细胞毒性大，而且转染效果在70%以上。有过在转染过程中要注意边加入边摇晃液体，以免脂质体2000对局部细胞产生毒性作用。
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