质谱检测：目标蛋白质分子量检测

蛋白质分子量测定

分子量是有机化合物基本的理化性质参数。分子量正确与否往往代表着所测定的有机化合物及生物大分子的结构正确与否。分子量也是多肽、蛋白质等鉴定中首要的参数，也是基因工程产品报批的重要数据之一。

基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)是近年来发展起来的一种新型的软电离生物质谱，具有样品消耗量少、灵敏度高、测定速度快、易于实现高通量、可对蛋白进行大规模的鉴定及生物大分子的分子量测定等特点，为蛋白质研究提供了一种强有力的分析测试手段。简便，直观，可直接对大分子混合物进行测定，并且基本不产生碎片峰是MALDI-TOF-MS的优势，因此这项技术在生物大分子分子量测定中得到广泛应用。
MALDI-TOF-MS仪器采用一种软电离技术，适用于混合物及生物大分子的测定。MALDI-TOF的准确度高达0.1%-0.01%，远远高于目前常规应用的SDS电泳与高效凝胶色谱技术，目前可测定生物大分子的分子量范围为700-600000Da。
 

样品要求

1. 样品的需要量约为10-50ug；
2. 样品纯度>90%；
3. 样品准备过程中尽量避免表面活性剂，例如SDS、Triton-X等的使用；盐浓度，例如Tris等也尽量降低；
4. 如果您在准备样品的过程中必须要用到表面活性剂以及较高的盐浓度，我们收到您的样品后会首先通过相关实验对上述化合物进行去除，然后进行后续的分子量测定。

样品运输

1. 我们推荐您将样品冻干后进行运输，冻干样品中蛋白非常稳定。
2. 液体样品推荐干冰运输，短途运输冰袋也可以。

注意

胶粒样品或者转移到PVDF膜上的样品不适合于分子量测定实验。

中/英文项目报告

在结题报告中，我们为您提供详细的中英文双语版技术报告，报告包括：

1. 实验步骤（中英文）
2. 相关的质谱参数（中英文）
3. 质谱谱图
4. 原始数据（RAW文件）
5. 蛋白质分子量和纯度分析

 
  利用LC-MS/MS蛋白鉴定技术对SDS-PAGE 胶条样本或者IP、co-IP以及pull-down等纯化溶液样本进行蛋白鉴定，得到目标蛋白或与目标蛋白相互作用的一系列蛋白质。
技术路线：


服务流程：

送样指南：


团队介绍：
       我们的团队成员来自于复旦大学蛋白质组学中心、中科院上海生命科学研究院等院校机构，从2005年起从事蛋白质组学及信息学研究。我们不仅可以为你提供先进的蛋白组学和代谢组学检测分析服务，更能够结合客户自身课题情况，为您提供严谨合理高性价比的组学研究解决方案。

服务特点：

1 质量有保障：客户收到结果前，不收取任何费用。
2 诚心的服务：提供终身售后服务。任何问题，24小时内给出满意解决方案。
3 快速的周期：拥有自建质谱平台，数十台先进质谱仪，最快10个工作日完成项目。
4 丰富的经验：15年经验团队，随时为您提供科学严谨，个性化高性价比的组学解决方案。

结果交付：

1 完整详细的中英文实验报告
2 定性、定量蛋白质结果统计表
3 样本质控报告
4 数据质控分析报告
5 结果统计学分析（PCA图，PLS-DA图，火山图，HCA图等）
6 生物信息学分析（GO功能注释、富集分析，KEGG通路注释、富集分析，KOG（COG）分析，STRING-DB蛋白相互作用网络）
7 后续实验建议
欧米克斯服务项目：
常规蛋白质组学

• 蛋白胶条、蛋白条带：双向电泳和SDS-PAGE电泳分离蛋白质混合物，经胶内酶解后用于质谱分析以获得蛋白质信息。
• 蛋白质全谱检测：蛋白混合物酶解成肽段混合物，通过液相色谱分离，串联质谱检测，最后数据库检索匹配，可同时鉴定成百上千种蛋白质。
• 多肽组学：一种全新的多肽提取技术，能更加准确和全面的发现细胞内和细胞间间隙存在的内源性肽，寻找潜在的生物标志物。
• TMT/iTRAQ定量蛋白质组学检测分析：利用多种同位素试剂标记蛋白多肽N末端和赖氨酸侧链基团，经高精度质谱仪串联分析，可同时比较多种样品之间的蛋白表达量。
• DIA定量蛋白质组学检测分析：一种真正全景式的、高通量的质谱技术，同时也大大提高了定量的可重现性。
• Label Free  定量蛋白质组学检测分析：无需标记，操作简单，不受比较样品数限制，适合大样本量的定量比较。
• 相互作用蛋白质组学：通过LC-MS/MS技术对IP、Co-IP、Pull-down等技术得到样本中的蛋白混合物进行鉴定，从而构建蛋白质相互作用谱。
• PRM/MRM靶向定量蛋白质组学：一种高分辨、高精度质谱的靶向定量技术，能够对目标蛋白质/肽段进行选择性检测，从而实现对目标蛋白质/肽段的精准定量。
• 特殊样本蛋白质组学检测：不断优化鉴定技术流程，为您提供稳定性可靠性的膜蛋白、线粒体蛋白、叶绿体蛋白、石蜡包埋蛋白质组学解决方案。
• 石蜡切片定量蛋白质组学检测：可直接处理石蜡切片样本，蛋白提取得率高，充分利用临床积累的病例样本助力生命科学研究。
• 亚细胞器定量蛋白质组学：通过提取细胞内特定细胞器的总蛋白，实现亚细胞蛋白质组学全面分析，为您的科研提供更精准的指导。

修饰蛋白质组学

• 蛋白翻译后修饰位点鉴定：IP获得目的蛋白，SDS-PAGE分离纯化目的蛋白，在经过LC-MS/MS质谱，数据库检索得到蛋白上的修饰位点。
• 磷酸化蛋白质组学定量检测分析：采用主流的TiO₂ / IMAC富集方法，特异性高，富集效率好。
• 泛素化蛋白质组检测分析：通过高分辨率、高扫描速度的质谱，对富集的泛素化肽段进行大规模鉴定。
• N-糖基化蛋白质组修饰检测分析：采用主流凝集素亲和法富集N-糖基化肽段，旨在揭示蛋白质的调节功能。
• 乙酰化蛋白质组检测分析：可用于药物作用靶点、疾病标志物筛选、植物胁迫/抗逆、作用机制等方面的研究。

合作客户文章（部分）：

• In-depth proteomic profiling of left ventricular tissues in human end-stage dilated cardiomyopathy.
  Oncotarget 2017 IF=5 ITRAQ
• pGlyco 2.0 enables precision N-glycoproteomics with comprehensive quality control and one-step mass spectrometry for intact glycopeptide identification.
  Nature Comm 2017 IF=13 GLYCO
• Molecular basis for blue light-dependent phosphorylation of Arabidopsis cryptochrome 2.
  Nature Comm 2017 IF=13 PHOSPHO
• VHL deficiency augments anthracycline sensitivity of clear cell renal cell carcinomas by down-regulating ALDH2.
  Nature Comm 2017 IF=13 SILAC
• Plasma Membrane CRPK1-Mediated Phosphorylation of 14-3-3 Proteins Induces Their Nuclear Import to Fine-Tune CBF Signaling during Cold Response.
  Molecular Cell 2017 IF=14 LFQ
• Interleukin-6 Induced “Acute” Phenotypic Microenvironment Promotes Th1 Anti-Tumor Immunity in Cryo-Thermal Therapy Revealed By Shotgun and Parallel Reaction Monitoring Proteomics
  Theranostics 2016 IF=8 ITRAQ+PRM
•  
• 科研顾问： 未新龙                
  电话：13641842303(微信同号)                       QQ:1457334501
  邮箱：weixl@clinproteomics.com                     网址：www.clinproteomics.com
• 送样要求见“资料下载”

 

欧米克斯一站式服务完成：样品处理-上机分析-数据分析-项目报告​​​​​​​