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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
上海西格
- 库存:
45
- 样本:
High-density Lipoprotein Cholesterol (HDL-C) Colorimetric Assay Kit (Double reagents)
- 标记物:
详见说明书
- 适应物种:
详见说明书
- 应用:
酶标仪
- 检测方法:
酶标仪
- 检测范围:
0.065-3.8 mmol/L
- 规格:
96T
中文名: 高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)比色法测试盒(双试剂直接法)
检测原理
CM、VLDL 、LDL 在多聚阴离子环境下发生凝聚生成聚合物并被多聚体掩蔽, 高密度脂蛋白(HDL)在表面活性剂的作用下形成可溶性复合物,从而使HDL-C 可直接与酶试剂[含胆固醇酯酶(CE )、胆固醇氧化酶 ( CO ) 等]发生反应,产生过氧化氢,过氧化氢在4-氨基安替吡啉(4-AA)和酚(TOOS)存在时,经过氧化物酶(peroxidase,POD)催化,反应生成亚胺非那腙的红色醌类化合物,其颜色深浅与HDL-C含量成正比。

关键信息
指标简称 HDL-C
样本类型 血清(浆)
灵敏度 0.065 mmol/L
检测范围 0.065-3.8 mmol/L
精密度 批间差:5%批内差:3%
检测仪器及波长 酶标仪(530 -570 nm,最佳波长546 nm)
保存条件 2-8℃
有效期 6个月
样本稀释倍数
在正式检测前,需选择2-3例预期差异大的样本稀释成不同浓度进行预实验

注意事项
1.该仪器应放在干燥的房间内,使用时放置在坚固平稳的工作台上,室内照明不宜太强。热天时不能用电扇直接向仪器吹风,防止灯泡灯丝发亮不稳定。
2.使用本仪器前,使用者应该首先了解本仪器的结构和工作原理,以及各个操纵旋钮之功能。在未按通电源之前,应该对仪器的安全性能进行检查,电源接线应牢固,通电也要良好,各个调节旋钮的起始位置应该正确,然后再按通电源开关。
3.在仪器尚未接通电源时,电表指针必须于“0”刻线上,若不是这种情况,则可以用电表上的校正螺丝进行调节。
测定步骤:
1.加样
1. 除包被外都需45度加样
2.加样体积要准确
3.管底加样,不能加在管壁上
4.加样时不能产生气泡
2.温浴
1.加标本后和加结合物后,应立即放入按规定的反应温 度的水浴箱。
2.各ELISA板不应叠在一起。
3.为避免蒸发,板上应加盖,或将板平放在底部垫有湿 纱布的金属湿盒中。
4.加入底物后,反应的时间和温度通常不做严格要求。 如室温高于20℃,ELISA板可避光放在实验台上,以便 不时观察,待对照管显色适当时,即可终止酶反应。
3.洗涤
1.洗涤在ELISA过程中不是反应步骤,但却 是决定实验成败的关键。
2.目的是洗去反应液中没有与固相抗原或 抗体结合的物质以及在反应过程中非特 异性吸附于固相载体的干扰物质。
4.读板
1.阴性对照颜色极浅,在定性测定中一般 可采用目视比色。
2.如用酶标仪测定结果,准确性决定于 ELISA板底的平整与透明度、酶标仪的质 量和软件的算法。
实验结果判断我有妙招:
1、定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
2、以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。
3、以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性,P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑,P/N小于1.5为阴性。
4、ELISA试剂盒目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照,与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。
与您分享常用不稳定试剂的分类及要求:
① 易挥发、低燃点的试剂要密封,放于阴凉、通风、远离火源处保存。
② 与水蒸气,水发生反应的物质要密封,并远离水源保存。
③ 易与氧气作用的试剂,应将其固体或晶体密封保存,不宜长期存放其水溶液,亚硫酸,氢硫酸溶液要密封存放,钾,钠,白磷更要采用液封形式。
④ 与二氧化碳反应的物质要密封保存,其相应的溶液较固体更易反应,所以更要注意密封保存。
⑤ 易挥发或自身分解的试剂要密封,放于阴凉通风处保存。
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文献和实验高密度脂蛋白胆固醇的临床意义 【参考范围】直接法:1.03~1.89mmol/L. 【影响因素】1.与测定TCH的标本抽取相同,血清4~25℃稳定6d,-20℃稳定4个月。 2.溶血标本在血红蛋白>5g/L时,对反应有干扰。 3.严重黄疸标本在胆红素>171μmol/L时,对反应有干扰。 4.低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)>6.0mmol/L时,对反应有干扰。 【临床意义】1.HDL-C是密度最大的脂蛋白,可分为三个亚型,在肝脏和小肠中
众多流行病学研究证实,高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平与动脉粥样硬化(AS)呈负相关。美国Framingham的研究显示,HDL-C每减少0.026 mmol/L(1 mg/dl),冠心病(CHD)发生的风险将增加2%~3%。目前临床上已广泛采用HDL-C下降作为CHD危险因素指标。低HDL-C[?.91 mmol/L (35 mg/dl)]是CHD的主要危险因素,而高HDL-C[≥1.55 mmol/L(60 mg/dl)]被认为是负危险因子,具有保护性[1,2]。作者
——重新认识高密度脂蛋白与AS的关系 中南大学湘雅二医院 赵水平 有关HDL抗AS作用的困惑 动脉粥样硬化(AS)是心脑血管系统中最常见的疾病,研究证实其发病与多种危险因素相关。大规模临床流行病学研究表明,血浆高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平降低与冠心病(CHD)发生危险呈负相关,这提示高密度脂蛋白(HDL)具有一定的抗AS作用,升高HDL-C水平是抗AS的靶点之一。 然而,在临床研究中有学者却发现了一些矛盾现象:升高HDL-C
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