转基因品系大豆G94-1染料法qPCR试剂盒

转基因品系大豆G94-1染料法qPCR试剂盒产品规格：50T
产品运输：低温运输
产品保存：-20℃保存
产品有效期：一年
产品特点：
本产品就是根据保守区设计引物而开发的高灵敏 PCR检测试剂盒 。

磷酸酶/磷酸二酯酶家族成员6抗体
核苷转运蛋白ENT1抗体
核苷转运蛋白ENT2抗体
鸟嘌呤核苷酸交换因子4
磷酸化红细胞膜条带4.1蛋白抗体
磷酸化酪氨酸蛋白激酶受体B1抗体
蛋白激酶受体B1+B2抗体
磷酸化神经细胞鸟苷酸置换因子Ephexin1抗体
磷酸化Ephrin B抗体
恶性肿瘤丢失蛋白EPLIN抗体
磷酸化HER2受体抗体
磷酸化HER3受体抗体
磷酸化HER4抗体
转录因子ERF抗体
磷酸化转录因子ERF抗体
真核肽链释放因子1抗体
真核肽链释放因子3a抗体
表皮生长因子受体底物15抗体
内吞作用辅助蛋白EPN1抗体
内吞作用辅助蛋白EPN2抗体
内质网定位蛋白ERGI3抗体
内质网氧化物蛋白Ero1-Lα抗体
内质网蛋白ERp19抗体
内质网蛋白ERp72抗体
结核分枝杆菌分泌性蛋白ESAT6抗体
上皮粘连调控蛋白ESRP2抗体
T细胞和嗜酸性粒细胞表达特应性皮炎蛋白ETEA抗体
电子转移黄素蛋白脱氢酶抗体
EGF毒素受体7跨膜结构域蛋白1抗体
激酶2抗体
磷酸化Ets转录因子家族ets1抗体
ETV3L蛋白抗体
磷酸化埃兹蛋白抗体
酪氨酸蛋白激酶受体A10抗体
嗜酸性粒细胞阳离子蛋白抗体
酪氨酸蛋白激酶受体B6抗体
转基因品系大豆G94-1染料法qPCR试剂盒溶血磷脂酸受体蛋白1抗体
溶血磷脂酸受体蛋白2抗体
溶血磷脂酸受体蛋白3抗体
内皮细胞的分化蛋白6抗体
内质网蛋白29抗体
核酸内切酶G抗体
真核翻译起始因子2C1抗体
E1A样分化抑制因子3抗体
骨骼肌烯醇化酶抗体
嗜酸性粒细胞过氧化物酶抗体
胞吐囊复合体蛋白2抗体
磷酸化eIF4E结合蛋白抗体
MYC启动子结合蛋白1抗体
转录接头蛋白EP300抗体
内皮脂肪酶抗体
磷酸化4E结合蛋白1抗体
磷酸化丝裂原活化蛋白激酶1/2抗体
磷酸化驱动蛋白样蛋白1抗体
EB病毒核抗原-3B抗体
内皮素B受体抗体
附睾蛋白酶抑制蛋白
外生性骨疣样蛋白2抗体
烯脂酰辅酶A水解酶抗体
三羟酰辅酶A脱氢酶抗体
泛素交联酶抗体
内皮细胞特异性分子1抗体
真核翻译起始因子3F抗体
真核翻译起始因子3H抗体
真核翻译起始因子4G抗体
β4整合素结合蛋白抗体
上皮细胞癌转化蛋白2抗体
真核翻译起始因子4B抗体
磷酸化转录接头蛋白EP300抗体
磷酸化转录因子E2F-1抗体
磷酸化表皮生长因子受体抗体
磷酸化雌激素受体α抗体
磷酸化真核翻译起始因子4B抗体
磷酸化真核翻译起始因子4G抗体
GLP1类似蛋白Exendin4抗体
限制过度增殖相关蛋白EML4抗体
产品特点：
1. 使用化学修饰的热启动聚合酶，反应特异性高，*程度地避免了非特异扩增；
2. 反应缓冲液经充分优化，反应灵敏快速，40个循环只需20多分钟；
3. 抗干扰能力强，反应重复性高，适合对土壤、粪便、肿瘤和血液来源的复杂样本中的靶基因进行检测分析。 在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，zui后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。
 特异性荧光标记：
 TaqMan法
 TaqMan探针的特性：
（1）5′端标记有报告基团（Reporter, R），如FAM、VIC等
（2）3′端标记有荧光淬灭基团 （Quencher, Q）
（3）探针完整，R所发射的荧光能量被Q基团吸收 ，无荧光， R与Q分开，发荧光
（4）Taq酶有 5′→3′外切核酸酶活性，可水解探针 相对定量通过内标定量：
内标（Endogenous Control）通常是β-actin、GAPDH基因等看家基因，在细胞中的表达量或在基因组中定，受环境因素影响小，内标定量结果代表了样本中所含细胞或基因组数量。
检测步骤：
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表： 试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量 荧光PCR反应液 14µL N×14µL 酶混合物 1 µL N×1 µL 总量 15 µL N×15µL
（1） 计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液，向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM。淬灭基团：NONE，请勿选择ROX参比荧光。

实验方法步骤：
方法

1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。      10×PCR buffer 
                  5 μl     dNTP mix （2mM）   
          4 μl     引物1（10pM） 
                2 μl     引物2（10pM） 
                2 μl     Taq酶 （2U/μl）
                1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）
   1 μl      加ddH2O至 50 μl 
  视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保温7min。
3：结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl氯仿进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
PCR实验步骤
典型的PCR由（1）高温变性模板；（2）引物与模板退火；（3）引物沿模板延伸三步反应组成一个循环，通过多次循环反应，使目的DNA得以迅速扩增。其主要步骤是：
将待扩增的模板DNA置高温下（通常为93℃-94℃）使其变性解成单链；
人工合成的两个寡核苷酸引物在其合适的复性温度下分别与目的基因两侧的两条单链互补结合，两个引物在模板上结合的位置决定了扩增片段的长短；
耐热的DNA聚合酶（Taq酶）在72℃将单核苷酸从引物的3’端开始掺入，以目的基因为模板从5’→3’方向延伸，合成DNA的新互补链。