油菜内标准BnACCg8基因PCR试剂盒

油菜内标准BnACCg8基因PCR试剂盒实验步骤
典型的PCR由
（1）高温变性模板；
（2）引物与模板退火；
（3）引物沿模板延伸三步反应组成一个循环，通过多次循环反应，使目的DNA得以迅速扩增。
其主要步骤是：
将待扩增的模板DNA置高温下（通常为93℃-94℃）使其变性解成单链；
人工合成的两个寡核苷酸引物在其合适的复性温度下分别与目的基因两侧的两条单链互补结合，两个引物在模板上结合的位置决定了扩增片段的长短；
耐热的DNA聚合酶（Taq酶）在72℃将单核苷酸从引物的3’端开始掺入，以目的基因为模板从5’→3’方向延伸，合成DNA的新互补链。

操作步骤 :
1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
      10×PCR buffer             5μl
      dNTP mixl                 4μl
       引物1（10pM）               2μl
       引物2（10PM）              2μl
       Taq酶（2U/μl）            1μl
      DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
      加ddH2O至               50 μl
    视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，zui后在72℃ 保温7min。
3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

ZNF93    锌指蛋白93抗体
ZNF568    锌指蛋白568抗体
ZNF473    锌指蛋白473抗体
ZFAND5    AN1型锌指蛋白5抗体
ZNF146    锌指蛋白146抗体
ZNF23    锌指蛋白23抗体
ZDHHC17    NFκB激活蛋白205抗体
ZNF312B    锌指蛋白321B抗体
ZBTB22    锌指蛋白297抗体
ZBTB12    锌指蛋白ZBTB12抗体
ZEB1    负调控因子白细胞介素2抗体
ZnT-1    锌转运蛋白1抗体
phospho-ZCWCC1     磷酸化ZCWCC1抗体
ZNF598    锌指蛋白598抗体
ZNF537    锌指蛋白537抗体
ZSWIM3    ZSWIM3蛋白抗体
ZSWIM2    E3泛素蛋白连接酶ZSWIM2抗体
ZNRF4    锌指/环指蛋白4抗体
ZNF828    锌指蛋白828抗体
ZO-1    胞质紧密粘连蛋白1抗体
油菜内标准BnACCg8基因PCR试剂盒ZIP Kinase    凋亡相关蛋白激酶3抗体
ZNF211    锌指蛋白211抗体
ZNF749    锌指蛋白749抗体
phospho-ZAP70     磷酸化zeta相关蛋白70抗体
Z DNA binding protein    Z DNA结合蛋白抗体
ZADH1    锌结合乙醇脱氢酶结构域蛋白1抗体
ZBTB26    锌指蛋白481抗体
ZBTB34    锌指蛋白ZBTB34抗体
ZBTB43    锌指蛋白297B抗体
ZBTB46    锌指蛋白340抗体
ZBTB48    锌指蛋白855抗体
ZBTB5    锌指蛋白ZBTB5抗体
ZBTB6    锌指蛋白ZBTB6抗体
ZBTB7C    锌指蛋白ZBTB7C抗体
ZBTB8A    锌指蛋白ZBTB8A抗体
ZBTB8B    锌指蛋白916B抗体
ZBTB4    锌指蛋白903抗体
ZBTB40    锌指蛋白923抗体
ZNF288    锌指蛋白288抗体
ZNF185    锌指蛋白185抗体
ZNF431    锌指蛋白431抗体
ZNF379    锌指蛋白379抗体
ZNF804A    锌指蛋白804A抗体
ZNF693    锌指蛋白693抗体
ZBTB3    锌指蛋白ZBTB3抗体
ZWILCH    着丝粒ZWILCH蛋白抗体
ZFP57    锌指蛋白57抗体
ZNF717    锌指蛋白717抗体
实验过程：
一、试剂准备
1. DNA模板
2．对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5．Taq酶
二、操作步骤
1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，zui后在72℃ 保温7min。 3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。