梭状芽孢杆菌属通用LAMP试剂盒

梭状芽孢杆菌属通用LAMP试剂盒运输及保存：低温运输，-20℃保存，有效期一年。使用本试剂盒提供的阳性对照时，由于其浓度较高，一定要注意不要污染其他试剂和成分。最好在专门的区域操作。
需要自备的器材：
1．仪器：分析天平、离心机、荧光 PCR 扩增仪、组织研磨器、-20 ℃冰箱、可调移液器（2 µL、20 µL、200 µL、1000 µL）。
2．耗材：荧光 PCR 专用反应管、眼科剪、眼科镊、生理盐水、1.5 mL 经焦碳酸二乙酯（DEPC）水 处理的灭菌离心管、吸头（10 µL、200 µL、1000 µL）、灭菌双蒸水。

体
CLCN2    氯离子通道蛋白2抗体
Cytokeratin 5    细胞角蛋白5抗体
CK8    细胞角蛋白8抗体
MERTK    c-mer原癌基因酪氨酸激酶抗体
Collagen II    Ⅱ型胶原α1蛋白/软骨钙素抗体
Collagen III    Ⅲ型胶原蛋白/胶原蛋白3/3型胶原蛋白抗体
Collagen IV    IV型胶原蛋白/4型胶原蛋白/胶原蛋白4抗体
Cyclooxygenase 1    前列腺素氧化环化酶1抗体
Collagen I    Ⅰ型胶原抗体
Collagen V    Ⅴ型胶原抗体
Collagen X    Ⅹ型胶原抗体
Cyclin F    周期素F抗体
Cullin 7    泛素连接酶CUL7蛋白抗体
COPS2    甲状腺受体相互作用蛋白15抗体
COPS6    信号转导蛋白亚基6抗体
COPS4    信号转导蛋白亚基4抗体
cardiac Troponin I    心肌肌钙蛋白抗体
CAP1    CAP1抗体
CSF3    粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子3抗体
CCR7    细胞表面趋化因子受体7抗体
COX10    细胞色素c氧化酶10抗体
CRTAM    CRTAM抗体
MCP4    单核细胞趋化蛋白4抗体
KIR2DL3    NK细胞抑制性受体2DL3抗体
CRX1    CRX抗体
CD8    CD8抗体
phospho-CBL2 (Tyr731)    磷酸化原癌蛋白CBL2抗体
phospho-CBL2 (Tyr774)    磷酸化原癌蛋白CBL2抗体
Phospho-cdc2 (Thr14)    磷酸化周期素依赖激酶2抗体
Phospho-cdc2 (Tyr15)    磷酸化周期素依赖激酶2抗体
Cdc25A    细胞分裂周期蛋白25抗体
Phospho-cdc25A (Thr506)    磷酸化细胞分裂周期蛋白25抗体
Phospho-cdc25A (Ser76)    磷酸化细胞分裂周期蛋白25抗体
Phospho-cdc25A (Ser178)    磷酸化细胞分裂周期蛋白25抗体
caspase-8 subunit p18    半胱氨酸蛋白酶8抗体
caspase-9 p10    半胱胺酸蛋白酶蛋白9-p10抗体

特点：
1.即开即用，用户只需要提供样品 DNA 模板，操作简单，定量准确快速。
2. 引物经过优化，特异性强。预期的 PCR 产物长度为 560 bp。
3. PCR mix 中含上样染料，PCR 后可以直接上样电泳。
4. 提供阳性对照，便于分析试验结果。
梭状芽孢杆菌属通用LAMP试剂盒储存条件：
14℃或－20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液：3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

检测步骤：
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
（1） 计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液，向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM。淬灭基团：NONE，请勿选择ROX参比荧光。
注意事项：
①加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照鸡血红蛋白(HB)ELISA检测试剂盒说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。