- ￥2000
- 可以检测体内反式因子与DNA的动态作用，还可以用来研究组蛋白的各种共价修饰与基因表达的关系。
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- 2025年12月03日
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上海研谨生物
- 服务名称：
免疫共沉淀（CHIRP）实验代做服务
提供商: 上海研谨生物
服务名称: 免疫共沉淀（CHIRP）实验
规格: 实验服务
价格： 2000元
周期： 1-3个月
染色质免疫共沉淀
研究蛋白质与DNA在染色质环境下的相互作用是阐明真核生物基因表达机制的基本途径。染色质免疫沉淀技术（chromatin immunoprecipitation assay, CHIP）是目前唯—研究体内DNA与蛋白质相互作用的方法。它的基本原理是在活细胞状态下固定蛋白质－DNA复合物，并将其随机切断为一定长度范围内的染色质小片段，然后通过免疫学方法沉淀此复合体，特异性地富集目的蛋白结合的DNA*片段，通过对目的片断的纯化与检测，从而获得蛋白质与DNA相互作用的信息。CHIP不仅可以检测体内反式因子与DNA的动态作用，还可以用来研究组蛋白的各种共价修饰与基因表达的关系。
ChIP实验操作流程：
1、样品准备与交联
细胞收集后，用37%的formaldehyde处理细胞，交联核酸与DNA结合蛋白；
2.超声打断染色质
裂解细胞，用Bioruptor将染色质超声破碎成200－1000bp片断；将片段分为两份，一份用于免疫共沉淀，一份用于对照。
3、免疫共沉淀(IP)
取B步骤所得一份片断与ChIP特异抗体结合进行免疫共沉淀，利用免疫磁珠法富集抗体复合物。
4、解交联及纯化DNA
将富集的DNA/蛋白复合物解交联释放DNA片段，并进行纯化（IP DNA）； B步骤所得用于对照（Input DNA）的片断作不进行IP实验，但也要解交联并纯化。
5、DNA段PCR扩增
针对ChIP DNA, Input DNA及对照DNA的目的片段设计特异性引物并进行荧光定量PCR扩增。
6、结果分析
%Input=2(CtInput-CtChIP)×Fd×100%
Fold Enrichment = [%(ChIP/Input)] / [%( Negative control/Input)]
实验代做服务：
服务名称: 免疫共沉淀（CHIRP）实验
规格: 实验服务
价格： 2000元
周期： 1-3个月
染色质免疫共沉淀
研究蛋白质与DNA在染色质环境下的相互作用是阐明真核生物基因表达机制的基本途径。染色质免疫沉淀技术（chromatin immunoprecipitation assay, CHIP）是目前唯—研究体内DNA与蛋白质相互作用的方法。它的基本原理是在活细胞状态下固定蛋白质－DNA复合物，并将其随机切断为一定长度范围内的染色质小片段，然后通过免疫学方法沉淀此复合体，特异性地富集目的蛋白结合的DNA*片段，通过对目的片断的纯化与检测，从而获得蛋白质与DNA相互作用的信息。CHIP不仅可以检测体内反式因子与DNA的动态作用，还可以用来研究组蛋白的各种共价修饰与基因表达的关系。
ChIP实验操作流程：
1、样品准备与交联
细胞收集后，用37%的formaldehyde处理细胞，交联核酸与DNA结合蛋白；
2.超声打断染色质
裂解细胞，用Bioruptor将染色质超声破碎成200－1000bp片断；将片段分为两份，一份用于免疫共沉淀，一份用于对照。
3、免疫共沉淀(IP)
取B步骤所得一份片断与ChIP特异抗体结合进行免疫共沉淀，利用免疫磁珠法富集抗体复合物。
4、解交联及纯化DNA
将富集的DNA/蛋白复合物解交联释放DNA片段，并进行纯化（IP DNA）； B步骤所得用于对照（Input DNA）的片断作不进行IP实验，但也要解交联并纯化。
5、DNA段PCR扩增
针对ChIP DNA, Input DNA及对照DNA的目的片段设计特异性引物并进行荧光定量PCR扩增。
6、结果分析
%Input=2(CtInput-CtChIP)×Fd×100%
Fold Enrichment = [%(ChIP/Input)] / [%( Negative control/Input)]
实验代做服务：
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原理 免疫共沉淀（Co-Immunoprecipitation）是利用抗原和抗体的特异性结合以及 Protein A 或 G 特异性地结合到抗体的Fc 片段的现象探测两个蛋白分子间是否存在相互作用的一种方法。在细胞裂解液中加入针对蛋白M的抗体，孵育后再加入Protein A 或 G 预处理的 Sepharose 珠，若细胞中有与蛋白M结合的蛋白 N，就可以形成这样一种复合物：“蛋白 N-蛋白M—抗蛋白 M 抗体—Protein A 或 G—Sepharose 珠”，经 SDS
您对蛋白-蛋白互作检测的金标准——免疫共沉淀了解多少？Dr. 赛带您从原理出发揭开免疫共沉淀实验的神秘面纱，手把手教您设置对照，选择固相介质，逐一了解影响免疫共沉淀实验的关键因素。
—— co-IP 检测 Hsp90 与 Cdc37 结合情况1、实验材料SKBR3 细胞，PMSF（Amresco，cat:329-98-6），cocktail（上海晶莱生物），脱脂奶粉（cat:66196131T），β-actin（上海晶莱生物）。Anti-Hsp90(santa,cat:sc-69703)、Anti-Cdc37(santa,cat:sc-13129)、Protein A+G agrose(Beyotime)，细胞刮，4 度离心机（eppendorf，centrifuge
技术资料暂无技术资料 索取技术资料
免疫共沉淀（CHIRP）实验
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