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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 品系:
详见说明书
- ATCC Number:
小鼠杂交瘤细胞(抗CD3);OKT 3
- 细胞类型:
A类
- 肿瘤类型:
详见说明书
- 供应商:
上海西格
- 库存:
37
- 生长状态:
半贴壁生长
- 年限:
详见说明书
- 运输方式:
电询
- 器官来源:
详见说明书
- 是否是肿瘤细胞:
否
- 细胞形态:
详见说明书
- 免疫类型:
详见说明书
- 物种来源:
详见说明书
- 相关疾病:
详见说明书
- 组织来源:
ATCC
- 英文名:
小鼠杂交瘤细胞(抗CD3);OKT 3
- 规格:
详见说明书
1.接收到细胞,肉眼观察细胞培养基颜色
,显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收到时的培养瓶拍一张照片,显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张)。
2.用75%的酒精消毒(建议配置75%的酒精的水是灭菌过的)。
3.严格无菌操作,打开细胞培养瓶。
4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管完全吸出(严禁直接倾倒),放入另一无菌容器中(建议换新的培养基培养细胞)。
5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆,轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落,加入终止液终止。
6.1000rpm,5min离心,重悬细胞。
7.换新的细胞培养瓶,37℃,5%CO2培养。
订购信息:
| 产品名称 | 小鼠杂交瘤细胞(抗CD3);OKT 3 |
| 生长特性 | 半贴壁生长 |
| 货号 |
|
形态特性 淋巴母细胞样
生长特性 半贴壁生长
特征特性 可产生抗CD3的单克隆抗体
培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
传代方法 1:2传代。
传代情况
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR
同工酶
染色体
使用权限 A类
细胞的种类:
产品仅用于科研第一种:
是冻存产品,由液氮直接拿出,干冰运输给客户。一般不推荐这种,也较少使用这种方式,因为复苏手法对于细胞状态影响较大,一旦细胞状态不好,很难说是细胞自身不行,还是复苏没操作好;另外温度对细胞、基因功能状态影响很大,也不是细胞储存的zui好方式,快递时间也很难控制,多种因素影响产品的质量;干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种:
是我们复苏好细胞,QC通过后,T-25灌满培养基常温运输给客户,排除复苏造成影响,常温运输也对细胞影响也不大,只需加25元运费(顺丰)。
质量保证:我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,100%进口来源,100%保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作,不同的实验室采用的方法略有差异,但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。
细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
细胞处理:
1)复苏细胞产品名称:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM,常温条件下离心5分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,吹打均匀后,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO摇匀后进行冻存。冻存培养基
冻存细胞时必须使用推荐的冻存培养基。冻存培养基中应含有 DMSO 或者甘油等冷冻保护剂。还可使用专门配制的完全冻存培养基。
1)细胞冻存培养基是一种用于哺乳动物细胞的即用型完全冻存培养基,其所含胎牛血清和牛血清比例经过优化,可改善细胞活力以及解冻后的细胞复苏效果。
2)冻存培养基是一种化学成分确定的、无蛋白、无菌冻存培养基,含10% DMSO,适用于多种干细胞和原代细胞 (黑色素细胞除外) 的冻存。
二甲基亚砜(Standard for GC,≥99.95%(GC)) Dimethyl sulfoxide 质量规格:Standard for GC,≥99.95%(GC) 人60S核糖体蛋白L36a-样(RPL36AL)试剂盒 Human RPL36AL ELISA kit
正癸醇(Standard for GC,≥99.5%(GC)) n-Decyl alcohol 质量规格:Standard for GC,≥99.5%(GC) 人6-羟多巴胺(6-OHDA)ELISA检测试剂盒Human6-hydroxydopamine,6-OHDAELISAKit 96T/48T
琥珀酸二乙酯(standard for GC,≥99.6%(GC)) Diethyl succinate 质量规格:standard for GC,≥99.6%(GC) 人6-羟多巴胺(6-OHDA)试剂盒 Human 6-hydroxydopamine,6-OHDA ELISA Kit
癸二酸二乙酯(Standard for GC, ≥99.5% (GC)) Diethyl sebacate 质量规格:Standard for GC, ≥99.5% (GC) 人6酮前列腺素(6-K-PG)试剂盒 Human 6-keto-prostaglandin,6-K-PG ELISA Kit
二十二烷(standard for GC,≥99.0%(GC)) Docosane 质量规格:standard for GC,≥99.0%(GC) 人6酮前列腺素F1a(6-keto-PGF1a)试剂盒 Human 6-keto-prostaglandin F1a,6-K-PGF1a ELISA Kit
三十二烷(standard for GC,≥98.0%(GC)) Dotriacontane 质量规格:standard for GC,≥98.0%(GC) 人8-羟基鸟嘌呤DNA糖苷酶(OGG1)试剂盒 Human OGG1 ELISA kit
正庚醇(Standard for GC,>99.5%(GC)) 1-Heptanol 质量规格:Standard for GC,>99.5%(GC) 人8羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)试剂盒 Human 8-Hydroxydeoxyguanosine,8-OHdG ELISA kit
γ -丁内酯(GBL)(standard for GC,≥99.9%(GC)) 4-Hydroxybutanoic acid lactone 质量规格:standard for GC,≥99.9%(GC) 人8-异构前列腺素F2α(8-epi-PGF2α)试剂盒 Human 8-epi-prostaglandin F2alpha,8-epi-PGF2α ELISA Kit
丙位庚内酯(Standard for GC ,>98.5%(GC)) γ-Heptalactone 质量规格:Standard for GC ,>98.5%(GC) 人8异前列腺素(8-iso-PG)试剂盒 Human 8-iso prostaglandin,8-iso-PG ELISA Kit
(+)-葑酮(standard for GC, ≥99.5% (GC)) (+)-Fenchone 质量规格:standard for GC, ≥99.5% (GC) 人8异前列腺素F2α(8-iso-PGF2a)试剂盒 Human 8-iso prostaglandin F2α,8-iso-PGF2a ELISA Kit
小鼠羟脯酸elisa试剂盒 小鼠羟脯酸试剂盒 规格型号:96T/48T 小鼠羟脯酸试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:小鼠羟脯酸试剂盒、小鼠羟脯酸eisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。 Mannitol 69-65-8 中文名:甘露醇 分子式:C6H14O6 度:98.5% 关键词: 利尿剂; 脱水剂; 中药对照品; 中药标准品; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库
小鼠羟脯酸(mouse HYP) 作用: ELISA 规格: 48T/96T 进口分装 Neochlorogenic acid 906-33-2 中文名:新绿原酸 分子式:C16H18O9 度:98.0% 关键词: 抗艾滋病病毒; 抗病毒; 保肝; 莽草酸; 中药对照品; 中药标准品; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库
小鼠羟脯酸(Hyp)ELISA试剂盒 Gliclazide 中文名:格列齐特 分子式:C15H21N3O3S 度:98.0%
小鼠羟脯酸(Hyp)ELISAKit Benzoin oxime 中文名:安息香肟 分子式:C14H13NO2 度:98.0%
小鼠羟甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶 英文名称: Mouse 3-hydroxy-3-methylglaryl CoA reductase 规格: 48T/96T 英文缩写: HMG-CoA Daturataturin A 133360-51-7 中文名: 分子式:C34H48O10
N-Boc-O-Benzyl-D-serine 47173-80-8 中文名:N-Boc-O-苄基-D-丝氨酸 分子式:C15H21NO5 度:98.0% 小鼠纤溶酶/纤维蛋白溶酶(PL/Fbn)ELISA试剂盒
N-Benzylmaleimide 1631-26-1 中文名:N-苄基马来 分子式:C11H9NO2 度:98.0% 小鼠纤连蛋白(FN)ELISA试剂盒
N-Benzoyl-L-tyrosine ethyl ester 3483-82-7 中文名:N-苯甲酰基-L-酪氨酸乙酯 分子式:C18H19NO4 度:98.0% 小鼠纤溶酶原激活剂抑制物-1(mouse PAI-1) 作用: ELISA 规格: 48T/96T 进口分装
N-Benzoyl-L-glutamic acid 6094-36-6 中文名:N-苯甲酰-L-谷氨酸 分子式:C12H13NO5 度:98.0% 小鼠血小板生长因子(mouse PDGF) 作用: ELISA 规格: 48T/96T 进口分装
N-Benzoyl-leucine 17966-67-5 中文名:N-苯甲酰基-亮氨酸 分子式:3 度:98.0% 小鼠血小板源生长因子-BB(mouse PDGF-BB) 作用: ELISA 规格: 48T/96T 进口分装
小鼠杂交瘤细胞(抗CD3);OKT 3马尾柴酸 HPLC≥98% 20mg 小鼠微粒体谷胱甘肽S转移酶1(MGST1)ELISA试剂盒 ,英文名: MGST1 ELISA Kit
喇叭茶醇 HPLC≥98% 20mg 兔合成酶(NOS)ELISA检测试剂盒Rabbitniicoxidesyhase,NOSELISAKit 96T/48T
愈创木素 HPLC≥98% 20mg 牛羧化不全骨钙素(ucOC)试剂盒 Bovine undercarboxylated osteocalcin,ucOC ELISA kit
黄独素D HPLC≥95% 20mg 英文名称HumanGlialCell-linederivedNeuroophicFactorELISAKit人胶质细胞系来源的神经营养因子(GDNF)规格:96T/48T
重楼皂苷VII HPLC≥95% 20mg 调料比色法定量检测试剂盒20
竹叶椒碱 HPLC≥95% 20mg RatPhosphotylinosital3kinase,PI3KELISA试剂盒大鼠0酸肌醇3激酶(PI3K)ELISA试剂盒规格:96T/48T
槐定碱 HPLC≥98% 20mg 小鼠微粒体甘油三酸酯转运蛋白(MTTP)ELISA试剂盒 ,英文名: MTTP ELISA Kit
齿孔醇 HPLC≥95% 20mg 兔转化生长因子β2(TGFβ2)ELISA检测试剂盒Rabbitansforminggrowthfactorβ2,TGFβ2ELISAKit 96T/48T
桑辛素 C HPLC≥95% 20mg 牛双氢睾酮(DHT)试剂盒 Bovine Dihydrotestosterone,DHT ELISA Kit
桑辛素 D HPLC≥95% 20mg 英文名称HumancalcitoningenerelatedpeptideELISAKit人降钙素基因相关肽(CGRP)规格:96T/48T
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文献和实验,无菌复溶 9. 淋巴细胞M密度梯度分离液(Accurate Chemical and Scientific),室温 10. RPMI-10完全培养基 11. FITC标记的抗CD3抗体和PE标记的PK136抗体(PharMingen) 12. 15ml和50ml带盖聚丙烯锥底离心管 13. Beckman CS-6R离心机(或同类离心机) 14. 血清学吸管 实验方法: 1. 处死小鼠,无菌取脾脏。 2. 制备脾脏
―杂交瘤技术、DNA重组技术等。 单抗的制备首先将抗原注射人小鼠体内,然后从小鼠脾脏中获得能够产生抗体的B细胞,与小鼠骨髓瘤细胞在灭活的仙台病毒或聚乙二醇的诱导下融合,再在特定的选择性培养基中筛选出杂交瘤细胞。由于杂交瘤细胞继承了双亲细胞的遗传物质,因此,它不仅具有B细胞分泌特异性抗体的能力,还有骨髓瘤细胞在体外培养条件下大量增殖的本领。由此可以获得足够数量的细胞。 单抗的制备过程 1,抗细胞表面分子的单抗 这类抗体能识别和结合表达特定膜表面分子的细胞
一、材料与试剂 1. 小鼠2. 抗CD3与抗CD28抗体(Biolegend,100302,102102)3. 白细胞介素-2(IL-2)(R&Dsystems402-ML-020)4. 聚凝胺(Polybrene)(hexadimethrinebromide,SIGMAH9268)5. RPMI-1640培养基(GIBCO,11875-093)6. FBS(GEMBIO900-108)7. 青霉素/链霉素溶液(GIBCO15140-122)8. 2-巯基
技术资料暂无技术资料 索取技术资料










