Trypsin-1 ELISA Kit

Trypsin-1 ELISA Kit需要而未提供的试剂和器材
1. 酶标仪（450nm）
2. 高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3. 37℃恒温箱
4. 蒸馏水或去离子水

样本处理及要求
1. 血清：将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4℃过夜，然后1000×g离心20 分钟，取上清即可，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
2. 血浆：用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本，并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃ 1000×g离心15分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
3. 组织匀浆：用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织，去除残留血液（匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果），称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS（一般按1:9的重量体积比，比如1g的组织样品对应9mL的PBS，具体体积可根据实验需要适当调整，并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂）加入玻璃匀浆器中，于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞，可以对匀浆液进行超声破碎，或反复冻融。最后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟，取上清检测。
4. 细胞培养物上清或其它生物标本：请1000×g离心20分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

实验材料与试剂配制：
1. 仪器与材料：酶标仪（使用前预热30分钟），微量加液器、吸头、蒸馏水或去离子水，滤纸。
2. 缓冲液使用：加5ul 的缓冲液于50ul 的样品中，如果样品量不够或者不确定，缓冲液和样品的混合比例不要小于1:10即可。
混匀，静置1小时备用（如果标本是血清或者血浆，此步骤忽略）。
3. 洗液的配制：按1:100的比例配制洗液备用。
BDNF(Mouse Brain derived neurotrophic facor) ELISA Kit  小鼠脑源性神经营养因子     96T
RBP ELISA Kit  大鼠视黄醇结合蛋白     96T
CXCR3(Human CXC-chemokine receptor 3) ELISA Kit  人CXC趋化因子受体3     96T
IFI16/p16(Human interferon-inducible protein 16) ELISA Kit  人γ干扰素诱导蛋白16/p16     96T
GNRHR-Ab ELISA Kit  大鼠促性腺激素释放激素受体抗体     96T
AIF(Mouse apoptosis inducing factor) ELISA Kit  小鼠凋亡诱导因子     96T
ALP(Mouse alkaline phosphatase) ELISA Kit  小鼠碱性磷酸酶     96T
MBP ELISA Kit   大鼠主要碱性蛋白     96T
SDF-1a/CXCL12(Human Stromal cell derived factor 1a) ELISA Kit  人基质细胞衍生因子1a     96T
ECP ELISA Kit  大鼠嗜酸性粒细胞阳离子蛋白     96T
Lptn/LTN/XCL1(Human lymphotactin) ELISA Kit  人淋巴细胞趋化因子     96T
ANG-4(Mouse Angiopoietin 4) ELISA Kit  小鼠血管生成素4     96T
CaN ELISA Kit   大鼠钙调磷酸酶     96T
BMPR- II (Mouse Bone morphogenetic protein receptor II ) ELISA Kit  小鼠骨成型蛋白受体Ⅱ     96T
IFN- Alpha(Human Interferon Alpha) ELISA Kit  人α干扰素     96T
INHBP ELISA Kit  大鼠抑制素结合蛋白     96T
MHC- III /H-2 III (Mouse major histocompatibility complex- III ) ELISA Kit  小鼠主要组织相容性复合体Ⅲ类     96T
B7-2/sCD86(Human soluble Cluster of differentiation 86) ELISA Kit  人可溶性CD86     96T
Trypsin-1 ELISA KitE-Cad(Mouse E-Cadherin) ELISA Kit  小鼠E钙粘着蛋白/上皮性钙黏附蛋白     96T
IL-27(human Interleukin 27) ELISA Kit  人白介素27     96T
TPO-Ab ELISA Kit  大鼠抗甲状腺过氧化物酶抗体     96T
IL-28(human Interleukin 28) ELISA Kit  人白介素28     96T
IL-29(human Interleukin 29) ELISA Kit  人白介素29     96T
CD30(Mouse Cluster of differentiation 30) ELISA Kit  小鼠CD30分子     96T
IL-23(Human Interleukin 23) ELISA Kit  人白介素23     96T
AIF ELISA Kit  大鼠凋亡诱导因子     96T
dsDNA ELISA Kit   大鼠抗双链DNA抗体/天然DNA抗体     96T
MHC- II /H-2 II (Mouse major histocompatibility complex- II ) ELISA Kit  小鼠主要组织相容性复合体Ⅱ类     96T
MIF(Human Macrophage Migration Inhibitory Factor) ELISA Kit  人巨噬细胞移动抑制因子     96T
TFPIHuman Tissue factor pathway inhibitor ELISA Kit  人组织因子途径抑制物     96T
sEPCR(Mouse soluble endothelial protein C receptor) ELISA Kit  小鼠可溶性血管内皮细胞蛋白C受体     96T
ALP ELISA Kit  大鼠碱性磷酸酶     96T
ADAMTS13/vWF-cp ELISA Kit  大鼠血管性血友病因子裂解蛋白酶     96T
MECF(ouse eosinophil chemotactic factor) ELISA Kit  小鼠嗜酸粒细胞趋化因子     96T
IP-10/CXCL10(Human interferon-inducible protein 10) ELISA Kit  人干扰素诱导蛋白10     96T
IL-1(Human Interleukin 1) ELISA Kit  人白介素1     96T
ANG-4 ELISA Kit  大鼠血管生成素4     96T
Eotaxin 1/CCL11(Mouse Eotaxin 1) ELISA Kit  小鼠嗜酸粒细胞趋化蛋白     96T操作步骤：
1. 取出试剂盒，室温（20-25℃）放置 30 分钟。 2. 分组：取出 96 孔板，根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数，把剩余的板条继续冷藏处理。分别设标准品组（6 个浓度）、空白孔、待测样品组。
注：为减少实验误差，保证准确性，建议设置复孔。
3. 加样：依照标准品的顺序分别加入 50ul 的标准品溶液于空白微孔中；空白对照孔加入 50ul 的蒸馏水；其余微孔中加入 50ul的待测样本。
4. 加酶标溶液：标准品组、待测样本组各孔中加入 100ul 的酶标溶液（空白对照孔除外）。
5. 温育：酶标板用封板纸密封后，放入湿盒内于 37℃恒温孵育 1 小时。
6. 洗板：用稀释后的洗涤液注满每孔，静置 15-30s，充分清洗酶标板 5 次，用吸水纸彻底拍干。 7. 显色：各孔加入显色剂 A 液 50ul 后，再加入显色剂 B 液 50ul。
8. 终止：25-37℃下避光反应 10-15 分钟，加入 50ul 终止液。
9. 读板：在 450nm 波长读取各孔的 OD 值。