DNA replication licensing fact

DNA replication licensing factor MCM2 ELISA Kit自备实验器材（不提供，可代购）
1． 酶标仪（主波长 450nm，参考波长 630nm）
2． 高精度移液器及一次性吸头：0.5-10,2-20,20-200,200-1000μl
3． 洗板机或洗瓶
4． 37℃孵育箱
5． 双蒸水，去离子水，量筒等
6． 稀释用聚丙烯试管

试剂准备：
1. 试剂回温：首先在实验前 30 min 将试剂盒，待测样本放置于室温下，浓缩洗涤液如出现结晶，请放入37℃温浴直到结晶全部溶解。
2. 配制洗涤液：预先计算好稀释后的洗涤液使用体积，然后用双蒸水或去离子水将 20 倍浓缩洗涤液稀释成 1 倍应用液，未用完的浓缩洗涤液放入 4℃冰箱保存。
3. 标准品梯度稀释：加入标准品/样本稀释液（SR1）0.5ml至冻干标准品中，静置15分钟待其完全溶解后轻轻混匀(浓度为8000pg/ml)，然后在其余七管中各加入500L标准品/样本稀释液（SR1），按照以下浓度进行2倍稀释：8000、4000、2000、1000、500、250、125、0 pg/ml进行稀释。8000pg/ml标准曲线高点浓度，标准品/样本稀释液（SR1）作为标准曲线的零点（0pg/ml）。复溶过的标准品原液（8000pg/ml）未用完的应废弃或根据需要按照一次用量分装，并将其贮存在-20～-80℃冰箱。
5. 酶结合物工作液：按每次试验所需用量配制，用酶结合物稀释液（SR3）将100倍浓缩酶结合物稀释成1倍应用工作液（稀释前离心），请在30分钟内使用。
6. 洗涤方法：
自动洗板：甩尽酶标板孔中液体，在厚迭吸水纸上拍干，注入洗涤液为 300ul/孔,注与吸出间隔为 30 秒，洗板 5 次。
手工洗板：甩尽酶标板孔中液体，在厚迭吸水纸上拍干，用洗瓶加入洗涤液 300ul/孔，静止30 秒后甩净酶标板孔中液体，在厚迭的吸水纸上拍干，洗板 5 次。

白激酶抗体     0.1ml
SYVN1  滑膜细胞凋亡抑制物1抗体     0.1ml
alpha-Synuclein(NT)  核突触蛋白-α抗体（N端）     0.1ml
Alpha-Synuclein/Syn/SNCA  核突触蛋白α抗体     0.1ml
phospho-Alpha synuclein(Tyr133)  磷酸化核突触蛋白α抗体     0.1ml
phospho-Alpha synuclein (Tyr136)  磷酸化核突触蛋白α抗体     0.1ml
phospho-Alpha synuclein (Tyr125)  磷酸化核突触蛋白α抗体     0.1ml
phospho-Alpha synuclein(Ser129)  磷酸化核突触蛋白α抗体     0.1ml
α-Synuclein  核突触蛋白抗体     0.1ml
gamma Synuclein  核突触蛋白-γ抗体     0.1ml
Syntaxin 1A(brain)  突触融合蛋白1抗体     0.1ml
phospho-Syntaxin 1a(Ser14)  磷酸化突触融合蛋白1抗体     0.1ml
SYT3  突触结合蛋白3抗体     0.1ml
T3  三碘甲狀腺素T3抗体     0.1ml
SYN1  神经突触素1抗体     0.1ml
phospho-SYN1(Ser9)  磷酸化神经突触素1抗体     0.1ml
phospho-SYN1(Ser553)  磷酸化神经突触素1抗体     0.1ml
Synapsin II  神经突触素2抗体     0.2ml
T3  三碘甲狀腺素T3抗体     0.2ml
TACR3  速激肽受体3抗体     0.2ml
TAF12  TATA框结合蛋白关联因子12抗体     0.1ml
SYTL5/slp5  突触样蛋白5亚型2抗体     0.1ml
TAK1/MAP3K7  转化生长因子β活化激酶1     0.1ml
Phospho-TAK1(Ser412)  磷酸化转化生长因子β活化激酶1     0.1ml
Phospho-TAK1(Thr184)  磷酸化转化生长因子β活化激酶1     0.1ml
DNA replication licensing factor MCM2 ELISA KitPhospho-TAK1(Thr187)  磷酸化转化生长因子β活化激酶1     0.1ml
Phospho-TAK1(Thr184/187)  磷酸化转化生长因子β活化激酶1     0.1ml
Phospho-TAK1(Ser192)  磷酸化转化生长因子β活化激酶1     0.1ml
MAP3K7IP1/TAB1  转化生长因子β活化激酶结合蛋白1抗体     0.1ml
phospho-MAP3K7IP1(Ser423)  磷酸化转化生长因子β活化激酶结合蛋白1抗体     0.1ml
phospho-MAP3K7IP1(Thr431)  磷酸化转化生长因子β活化激酶结合蛋白1抗体     0.1ml
Tap1/ABCB2  ATP结合转运因子1抗体     0.2ml
TAP2/ABCB3  ATP结合转运因子2抗体     0.2ml
SELS  炎症负调控因子蛋白抗体     0.1ml
TANK  TANK抗体     0.1ml
结果判断：
1.用酶标仪 450 nm 波长测定 OD 值。选择双波长检测，参考波长为 630 nm。如不能进行双波长检测，请用 450 nm 的 OD 测定值减去 630 nm 的 OD 测定值。
2.计算标准品、样品的平均 OD 值：每个标准品和标本的 OD 值应减去零孔的 OD 值
3.以标准品浓度为横坐标，吸光度OD值为纵坐标，用软件绘制标准曲线，样品中CCL28含量可通过对应OD值由标准曲线换算出相应的浓度。
4.若标本 OD 值高于标准曲线上限，应做适当稀释后重新检测，计算浓度时再乘以稀释倍数。