表达HLA-G5的K562细胞；K562-HLA-G5

细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
 

 
订购信息：

产品名称	表达HLA-G5的K562细胞；K562-HLA-G5
生长特性	悬浮生长
货号	XG-X17034

细胞名称    表达HLA-G5的K562细胞；K562-HLA-G5
形态特性  淋巴母细胞样　
生长特性 悬浮生长
特征特性  该细胞属专利保藏，其特征特性尚未公开。
培养条件  MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle＇s Balanced Salts)  10%FBS　
传代方法  1:3传代，3-4天传1次
传代情况 C5
冻存条件  基础培养基+5%DMSO+20%FBS　
支原体检测 阴性　
STR
同工酶     
染色体      　
使用权限     A类
细胞的种类：
产品仅用于科研第一种：
是冻存产品，由液氮直接拿出，干冰运输给客户。一般不推荐这种，也较少使用这种方式，因为复苏手法对于细胞状态影响较大，一旦细胞状态不好，很难说是细胞自身不行，还是复苏没操作好；另外温度对细胞、基因功能状态影响很大，也不是细胞储存的zui好方式，快递时间也很难控制，多种因素影响产品的质量；干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种：
是我们复苏好细胞，QC通过后，T-25灌满培养基常温运输给客户，排除复苏造成影响，常温运输也对细胞影响也不大，只需加25元运费(顺丰)。
质量保证：我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作，不同的实验室采用的方法略有差异，但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。
细胞处理：
1）复苏细胞产品名称：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM，常温条件下离心5分钟，少量保存上清液（防止细胞吸走），加入部分新鲜培养基，吹打均匀后，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO摇匀后进行冻存。冻存培养基
冻存细胞时必须使用推荐的冻存培养基。冻存培养基中应含有 DMSO 或者甘油等冷冻保护剂。还可使用专门配制的完全冻存培养基。
1）细胞冻存培养基是一种用于哺乳动物细胞的即用型完全冻存培养基，其所含胎牛血清和牛血清比例经过优化，可改善细胞活力以及解冻后的细胞复苏效果。 
2）冻存培养基是一种化学成分确定的、无蛋白、无菌冻存培养基，含10% DMSO，适用于多种干细胞和原代细胞 (黑色素细胞除外) 的冻存。
美商陆酸 HPLC≥98% 20mg ELISAKitPS人血浆抗凝蛋白S规格：48T/96T
蒙花苷 HPLC≥97% 20mg ELISAKitPY兔交联物规格：48T/96T
迷迭香酸 HPLC≥98% 20mg ELISAKitP人生长激素结合蛋白规格：48T/96T
米力农 HPLC≥98% 20mg ELISAKitSAA人血清淀粉样蛋白A规格：48T/96T
米那普仑盐酸盐 HPLC≥98% 20mg ELISAKitSAP人血清淀粉样蛋白P规格：48T/96T
米托拉酮 HPLC≥98% 20mg ELISAKitSA人唾液酸规格：48T/96T
蜜二糖 HPLC≥98% 20mg ELISAKitschistosoma人血吸虫规格：48T/96T
绵马贯众素ABBA HPLC≥98% 10mg ELISAKitSLE人系统性红斑狼疮规格：48T/96T
绵马酸ABA HPLC≥98% 10mg ELISAKitSmad1人信号转导分子规格：48T/96T
棉酚 HPLC≥98% 20mg ELISAKitSmad7人信号转导分子7规格：48T/96T
豚鼠主要组织相容性复合体(MHC/GPLA)ELISA试剂盒     Amlodipine besylate  中文名：苯磺酸氨氯地平  分子式：C26H31ClN2O8S  度：99.0%
豚鼠主要组织相容性复合体(MHC/GPLA)ELISAKit     Amlodipine besylate  111470-99-6  中文名：苯磺酸氨氯地平  分子式：C26H31ClN2O8S  度：99.0%  关键词： 
豚鼠粘多糖   英文名称：   Mucopolysaccharide   规格：   48T/96T   英文缩写：   MLC  Allyl cinnamate  中文名：肉桂酸烯丙酯  分子式：C12H12O2 
豚鼠血清(NO)ELISA试剂盒     Amlodipine  88150-42-9  中文名：氨氯地平  分子式：C20H25ClN2O5  度：98.0%  关键词： 
豚鼠纤溶酶抗纤溶酶复合物elisa试剂盒   豚鼠纤溶酶抗纤溶酶复合物试剂盒   规格型号：96T/48T   豚鼠纤溶酶抗纤溶酶复合物试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：豚鼠纤溶酶抗纤溶酶复合物试剂盒、豚鼠纤溶酶抗纤溶酶复合物eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。     Amisulpride  中文名：阿米舒必利  分子式：C17H27N3O4S
7-Acetoxy-4-methylcoumarin  中文名：7-乙酰氧基-4-甲基香豆素  分子式：C12H10O4  度：95.0%  小鼠α羟基脱氢酶(αHBDH)ELISA试剂盒  
Adrenosterone  中文名：肾上腺甾酮  分子式：C19H24O3  度：99.0%  小鼠α葡萄糖苷酶(α-glucosidase)ELISA试剂盒  
(1S,2R)-2-Amino-1,2-diphenylethanol  中文名：(1S,2R)-2-氨基-1,2-二苯基乙醇  分子式：C14H15NO  度：98.0%  小鼠α谷胱甘肽S转移酶(α-GST)ELISA试剂盒  
2-Acetylbutyrolactone  中文名：2-乙酰基丁内酯  分子式：C6H8O3  度：98.0%  小鼠α甘露糖苷酶(αManase)ELISA试剂盒           
2-Amino-9H-fluoren-9-one  中文名：2-氨基-9H-芴-9-酮  分子式：C13H9NO  度：99.0%  小鼠α半乳糖基抗原elisa试剂盒   小鼠α半乳糖基抗原试剂盒   规格型号：96T/48T   小鼠α半乳糖基抗原试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠α半乳糖基抗原试剂盒、小鼠α半乳糖基抗原eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。
表达HLA-G5的K562细胞；K562-HLA-G5二乙基锡(标准品)  Diethyltin-dichloride  质量规格：分析标准品,10ng/μl溶于环己烷 MousePlatelet-DerivedGrowthFactorSolubleReceptorα,PDGFsR-αELISA试剂盒小鼠血小板衍生生长因子可溶性受体α(PDGFsR-α)ELISA试剂盒规格：96T/48T
草萘胺(标准品)  Napropamid  质量规格：分析标准品 小鼠卵清蛋白特异性IgE(OVA sIgE)ELISA试剂盒 ，英文名： OVA sIgE ELISA Kit
除虫脲标准溶液(10μg/ml,u=3%)  Diflubenzuron solution  质量规格：10μg/ml,u=3% 大鼠雌二醇(E2)ELISA检测试剂盒RatEsadiol,E2ELISAKit 96T/48T
二噻农(标准品)  Dithianon  质量规格：分析标准品 人毒蕈碱型乙酰胆碱受体M2(mAChRM2)自身抗体试剂盒 Human muscarinic acetylcholine receptor M2(mAChRM2)aoaibody ELISA kit
棉隆(标准品)  Dazomet  质量规格：分析标准品,97% RatMotilin,MTLELISAKit大鼠胃动素(MTL)ELISA试剂盒规格：96T/48T
双(标准品)  Dichlorophene  质量规格：分析标准品 DNA探针聚合酶整合标记试剂盒10
异丙净(标准品)  Dipropetryn  质量规格：分析标准品 MouseProAialNaiureticPeptide,Pro-ANPELISA试剂盒小鼠前心肽(Pro-ANP)ELISA试剂盒规格：96T/48T
异菌脲标准溶液(100μg/ml,u=4%)  [3-(3,5-Dichlorophenyl)-2,4-dioxoimidazolidinyl]-N-(methylethyl)carboxamide standard solution  质量规格：100μg/ml,u=4% 小鼠卵泡抑素样蛋白3(FSTL3)ELISA试剂盒 ，英文名： FSTL3 ELISA Kit
异氯磷(标准品)  Dicapthon  质量规格：分析标准品 人凝聚素(CLU)ELISA检测试剂盒Humanclusterin,CLUELISAKit 96T/48T
4,4'-滴滴滴(标准品)   p, p’-DDD  质量规格：分析标准品 大鼠胰岛素(INS)试剂盒 Rat Insulin,INS ELISA Kit
注意事项：
1.接收到细胞，肉眼观察细胞培养基颜色
，显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收到时的培养瓶拍一张照片，显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张）。
2.用75%的酒精消毒（建议配置75%的酒精的水是灭菌过的）。
3.严格无菌操作，打开细胞培养瓶。
4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管完全吸出（严禁直接倾倒），放入另一无菌容器中（建议换新的培养基培养细胞）。
5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆，轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落，加入终止液终止。
6.1000rpm，5min离心，重悬细胞。
7.换新的细胞培养瓶，37℃，5%CO2培养。