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- 详细信息
- 询价记录
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
常温(15-25℃)避光保存2年。
- 库存:
充足
- 供应商:
北京擎科生物科技股份有限公司
- 规格:
500 μL
【产品简介】
TS-GelRed核酸凝胶染料(以下简称TS-Gelred)是集高灵敏、安全和超稳定于一身的核酸凝胶电泳荧光染料。艾姆斯氏试验(Ames-test)结果表明TS-Gelred在凝胶染色浓度下完全无诱变性,它不易挥发升华,人体不易吸入,可替代溴化乙锭(EB)成为一种安全无毒的核酸染料。同时本产品和EB有相同的光谱特性,无需改变滤光片及观察装置(使用普通紫外凝胶透射仪即可)。
【产品特点】
安全无毒:独特油性大分子使其不能穿透细胞膜进入细胞内,Ames-test试验表明,该染料的诱变性远远小于EB。
染色均匀、定量准确:正负极染色亮度一致,避免了出现阴阳极染色不均现象,适用于核酸分子大小的确定和定量。
灵敏度高:适用于各种大小片段的电泳染色,核酸迁移率与EB相同,小于SYBR Green l。
稳定性高:适用于使用微波或其它加热方法制备琼脂糖凝胶;室温下在酸或碱缓冲液中极其稳定,耐光性强。
信噪比高:样品荧光信号强,背景信号低。
操作简单:与EB用法完全一致,在预制胶和电泳过程中染料不降解;电泳后染色只需30 min,无需脱色或冲洗即可直接使用紫外凝胶透射仪观察。
适用范围广:可选择电泳前染色(胶染法)或电泳后染色(泡染法);适用于琼脂糖凝胶或PAGE电泳;可用于 dsDNA、ssDNA 或 RNA染色。
完美兼容:与EB有相同的光谱特性,无需改变滤光片及观察装置;标准的EB滤光片或SYBR滤光片都适用,使用与观察EB相同的普通紫外凝胶透射仪观察即可,在300 nm紫外光附近可得到最佳激发。
【产品应用】
作为核酸荧光染料,适用于琼脂糖凝胶或PAGE中dsDNA、ssDNA和RNA的染色。
【产品组成及保存】
500 µL(10,000×),2~8℃避光保存2年。
【注意事项】
1.本产品具有良好的稳定性,室温下在酸或碱缓冲液中极其稳定,可室温保存。使用前可进行振荡或者颠倒操作以保证染料充分混匀;
2.胶染法不适用于制备PAM,对于PAM请使用泡染法;
3.使用泡染法染色时,3×染色液可以大量制备,在室温下避光保存直至用完;3×染色液可重复使用3次左右;
4.使用泡染法染色时,最佳染色时间根据凝胶厚度与胶浓度不同而略有不同,凝胶浓度越高,厚度越厚,所需染色时间越长;
5.GelRed不能被488 nm氩离子激光器或相似波长的可见光完全激发,因此不推荐使用此类激发装置的成像系统。
【问题讨论】
Q1:核酸染料使用GelRed,胶图条带弯曲成弧形,原因及解决方案?
A1:原因:GelRed是大分子结构,在琼脂糖凝胶电泳中会影响核酸的迁移,核酸分子量越大影响越大,因此,出现轻微弧形属正常现象。若弧形严重,影响观测,有如下解决方案:
1)减少DNA上样量,对于未知浓度的样品,尝试1/2或1/3的常用上样量;
2)降低电泳电压,建议电压5-10 V/cm,一般是90-120 V,最高不超过150 V;
3)胶染法降低GelRed使用浓度,即每100 mL琼脂糖溶液里加8~8.5 µL GelRed 10,000×水溶液;
4)将染料预先与Loading Buffer混合,然后混合样品后进行电泳。对于Marker,混匀后,取2 µL加入20 µL marker中混匀,取5 µL上样即可。对于样品,取1 µL GelRed加入20 µL 6×Loading Buffer中,混匀后,取1 µL加入10 µL样品中,取5 µL上样即可;
5)选择泡染法,降低染料对核酸迁移率的影响,条带更清晰。胶浓度越高,胶块越厚,所需泡染时间越长;
6)选择合适胶浓度,较高浓度琼脂糖凝胶对于短片段DNA的分离性能好,而较低浓度琼脂糖凝胶有利于长片段DNA的分离,请依据实际情况选择合适浓度的琼脂糖凝胶进行电泳。
Q2:GelRed的预制凝胶可以重复使用吗?
A2:不可以,我们不建议GelRed凝胶电泳后重复使用,因为连续电泳会减少染料的量,降低染色强度。
Q3:核酸染料使用GelRed,胶图条带模糊如何改善?
A3:若条带分离效果不佳,建议先用泡染法确认是否为核酸染料影响核酸迁移率,导致条带模糊。若泡染后问题依旧存在,则非染料所致,需改善以下其他步骤。
1)电泳条件:使用合适的电压5-10 V/cm,一般是90-120 V,最高不超过150 V;
2)电泳缓冲液:电泳缓冲液使用时间过长,缓冲能力下降,建议现配现用或及时更换;
3)琼脂糖质量:溶解琼脂糖时,必须保证琼脂糖充分完全溶解,否则,会造成电泳图像模糊不清,并延长凝胶时间以保证边缘清晰。
4)凝胶浓度:选择合适的凝胶浓度,较高浓度琼脂糖凝胶对于短片段DNA的分离性能好,而较低浓度琼脂糖凝胶有利于长片段DNA的分离,请依据实际情况选择合适浓度的琼脂糖。
本试剂产品仅供科学研究或进一步生产使用,不可用于临床诊断或治疗。
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文献和实验,是Standford大学和国家健康研究所研制的器械的衍生产品,使灵敏度和动态范围最大化。我们也试图将运转的适应程度结合到设计中,因此在将来能够进行改进,允许更有效的荧光染料的测定(最近引进了DNA自动测序仪)。两个有染料标记的目标杂交后,玻片被扫描后产生16位TIF图象。每点的象素强度是与染料分子的数量以及与PCR产物斑点杂交探针数量成比例。 设计特点 激光扫描仪有一些关键的组成。软件是与HPVEE绘图程序语言同步的程序。规划图形的运动,控制A/D转换数据的捕获,处理两个频道的信号,显示每一次扫描的真实的时间
(Ethidium bromide,溴化乙锭)溴化乙锭是一种高度灵敏的荧光染色剂,用于观察琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶中的DNA。溴化乙锭用标准302nm 紫外光透射仪激发并放射出橙红色信号,观察琼脂糖凝胶中DNA最常用的方法是利用荧光染料溴化乙锭进行染色,溴化乙锭含有一个可以嵌入DNA堆积碱基之间的一个三环平面基团。它与DNA的结合几乎没有碱基序列特异性。在高离子强度的饱和溶液中,大约每2.5个碱基插入一个溴化乙锭分子。当染料分子插入后,其平面基团与螺旋的轴线垂直并通过范德华力与上下碱基相互作用。这个基团的固定
肌肤。 吸收:吸收危险性很低。 2. EB(Ethidium bromide,溴化乙锭) 溴化乙锭是一种高度灵敏的荧光染色剂,用于观察琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶中的DNA。溴化乙锭用标准302 nm 紫外光透射仪激发并放射出橙红色信号,观察琼脂糖凝胶中DNA最常用的方法是利用荧光染料溴化乙锭进行染色,溴化乙锭含有一个可以嵌入DNA堆积碱基之间的一个三环平面基团。它与DNA的结合几乎没有碱基序列特异性。 在高离子强度的饱和溶液中,大约每2.5个碱基插入一个溴化乙锭分子。当染料
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