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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
在零下15度以下保存, 避免光照
- 保质期:
1年
- 英文名:
CytoFix™ BCECF, AM *Optimized for long term cellular pH tracking*
- 库存:
3
- 供应商:
AAT Bioquest
CytoFix BCECF, AM pH荧光探针
| 货号 | 21200 | 存储条件 | f/l |
| 规格 | 1 mg | ||
| Ex (nm) | 504 | Em (nm) | 527 |
| 分子量 | 638.63 | 溶剂 | DMSO |
产品优势
在活细胞中的滞留时间比BCECF长
产品介绍
细胞内pH值作为重要的调控因子,参与多种细胞生理过程,包括细胞生长、钙离子调节、酶活性调控、受体介导的信号转导、离子转运、内吞作用、趋化运动以及细胞黏附等。近年来,pH敏感性荧光染料已被广泛应用于监测细胞内pH的动态变化。
相较于微电极等传统技术,基于荧光pH指示剂的成像技术能够提供更高的空间分辨率和采样密度。其中,2',7'-双(2-羧乙基)-5(6)-羧基荧光素(BCECF)因其pKa值约为7.0,可采用比率法检测细胞pH值,成为最常用的pH探针。BCECF AM是其可穿透细胞膜的乙酰甲酯化衍生物。
然而,由于药物外排转运体的作用,通过AM酯形式导入活细胞的BCECF会快速从细胞中泄漏。CytoFix™ BCECF是一种经过修饰的BCECF衍生物,含有细胞滞留基团。这种新型修饰的BCECF衍生物在活细胞中的滞留时间显著长于原始BCECF染料,同时保持了与BCECF相同的pH响应特性,并具有更好的细胞滞留性。
注:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
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文献和实验(一)BCECF测定pH值 1. 储存液配制 BCECF-AM溶于DMSO配成1mmol/L溶液,等份分装后,-20℃避光保存。 2. 染色步骤 将培养细胞用PBS(含Ca2+、Mg2+)洗2遍。加入BCECF-AM(终浓度1~5μmol/L),37℃孵育30~60min。PBS(含Ca2+、Mg2+)洗2遍。激光扫描共聚焦显微镜观察。 (二)SNARF-1定量比率测定pH值 1. 储存液配制 SNARF溶于DMSO配成1mmol/L溶液,等份分装后,-20℃避光
体的pH则在4.5~6.0之间。根据检测对象pH的不同将荧光探针分为用于偏中性和酸性两类。常用于偏中性pH即细胞胞浆pH检测的荧光探针有SNARF类(SNARF-1、SNARF-calcein)、SNAFL类(SNAFL-1、SNAFL-calcein)、BCECF等,这些探针均为疏水性探针,须使用其AM形式。FITC-dextran则适用于pH范围4~6之间,如溶酶体pH的检测,该探针也不能透过质膜,但可通过细胞胞饮作用进入溶酶体,因此应选择分子量稍小的Dextran(葡聚糖)。 5. 细胞
将各光学切片的数据组合成一个真实的三维图像,并可从任意角度观察,也可以借助改变照明角度来突出其特征,产生更生动逼真的三维效果。 4. 动态荧光测定 Ca2+、pH 及其它细胞内离子测定,利用ACAS能迅速对样品的点,线或二维图像扫描,测量单次、多次单色、双发射和三发射光比率,使用诸如Indo-1、BCECF 、Fluo-3等多种荧光探针对各种离子作定量分析。可以直接得到大分子的扩散速率,能定量测定细胞溶液中Ca2+对肿瘤启动因子、生长因子及各种激素等刺激的反应,以及使用双荧光探针Fluo
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