FOR Sphingosine kinase 2 ELISA

FOR Sphingosine kinase 2 ELISA Kit试剂盒组成:

(phospho Thr18) /FITC  荧光素标记抗磷酸化乙酰化组
蛋白H1b抗体IgG        
Multi-class antibodies    Anti-HisX6/FITC  荧光素标
记聚组氨酸抗体/抗His tag标签抗体IgG        
Multi-class antibodies    Anti-HIV gp41/FITC  荧光
素标记艾滋病病毒抗体IgG        
Multi-class antibodies    Anti-HIV gp120/FITC  荧光
素标记艾滋病病毒抗体IgG        
Multi-class antibodies    Anti-HIV-1 ENV (gp160)
antigen/FITC  荧光素标记艾滋病病毒-1包膜糖蛋白抗
体IgG        
Multi-class antibodies    Anti-HIV-1 ENV (gp160)
antigen/FITC  荧光素标记艾滋病病毒-1包膜糖蛋白抗
体IgG        
Multi-class antibodies    Anti-HisX6/6His/His tag
(CT) /FITC  荧光素标记聚组氨酸抗体/抗His tag（C端
）标签抗体IgG        
Multi-class antibodies    Anti-HisX6/6His/His tag
(CT)/HRP  辣根过氧化物酶标记聚组氨酸抗体/抗His
tag标签抗体（C端）IgG        
Multi-class antibodies    Anti-HLA-DR/FITC  荧光素
标记HLA-DR抗原抗体IgG        
Multi-class antibodies    Anti-HLA-E/FITC  荧光素标
记人类白细胞抗原EIgG        
Multi-class antibodies    Anti-HLA-G/FITC  荧光素标
记人类白细胞抗原G/组织相容性白细胞抗原G抗体IgG        
Multi-class antibodies    Anti-HMGA1/FITC  荧光素标
记高迁移率族蛋白A1抗体IgG        
Multi-class antibodies    Anti-HMGA2/FITC  荧光素标
记高迁移率族蛋白A2抗体IgG        
Multi-class antibodies    Anti-HMGB1/FITC  荧光素标
记高迁移率族蛋白B1抗体IgG        
Multi-class antibodies    Anti-HMGB4/FITC  荧光素标
记高迁移率族蛋白B4抗体IgG        
Multi-class antibodies    Anti-HNF-1 Alpha/FITC  荧
光素标记肝细胞核因子1α抗体IgG        
Multi-class antibodies    Anti-HO-1/HSP32/FITC  荧
光素标记血红素氧合酶-1/热休克蛋白-32抗体IgG        
Multi-class antibodies    Anti-HO-1/HSP32/FITC  荧
光素标记血红素氧合酶-1/热休克蛋白-32抗体IgG        
Multi-class antibodies    Anti-HO-2/FITC  荧光素标
记血红素氧合酶-2抗体IgG        
Multi-class antibodies    Anti-HOXA10 /FITC  荧光素
标记HOXA10抗体IgG        
Multi-class antibodies    Anti-HOXB4/FITC  荧光素标
记HOXB4抗体IgG        
Multi-class antibodies    Anti-PSGD/HOXB13/FITC  荧
光素标记同源盒蛋白HOXB13抗体IgG        
Multi-class antibodies    Anti-HOXc8/FITC  荧光素标
记同源盒基因的一种抗体IgG        
FOR Sphingosine kinase 2 ELISA KitMulti-class antibodies    Anti-Hpt/HP /FITC  荧光素
标记结合珠蛋白/触珠蛋白抗体IgG        
Multi-class antibodies    Anti-HPV/FITC  荧光素标记
人类乳头状瘤病毒抗体IgG        
Multi-class antibodies    Anti-HPV16-E6/E6
protein/FITC  荧光素标记人类乳头状瘤病毒16抗体IgG    
    
Multi-class antibodies    Anti-HPV16/18
protein/FITC  荧光素标记人类乳头状瘤病毒16/18抗体
IgG        
Multi-class antibodies    Anti-HPV18-E6/E6 protein
/FITC  荧光素标记人类乳头状瘤病毒18抗体IgG        
标本要求
1.标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融
2.不能检测含 NaN3 的样品，因 NaN3 抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样 50µl，待测样品孔中先加样品稀释液 40µl，然后再加待测样品 10µl（样品最终稀释度为 5 倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3.温育：用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。
4.配液：将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用 5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置 30 秒后弃去，如此重复 5 次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶标试剂 50µl，空白孔除外。
7.温育：操作同 3。
8.洗涤：操作同 5。
9.显色：每孔先加入显色剂 A50µl，再加入显色剂 B50µl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色10 分钟.
10.终止：每孔加终止液 50µl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11.测定：以空白空调零，450nm 波长依序测量各孔的吸光度（OD 值）。 测定应在加终止液后 15 分钟以内进行。
计算
以标准物的浓度为横坐标，OD 值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD 值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与 OD 值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的 OD 值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。
操作程序总结：

注意事项
1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡 15-30 分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。
2.浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
3.各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间最好控制在 5 分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。
4.请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本 OD 值大于标准品孔第一孔的 OD 值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n 倍）后再测定，计算时请最后乘以总稀释倍数（×n×5）。
5.封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6.底物请避光保存。
7.严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8.所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9.本试剂不同批号组分不得混用。
保存条件及有效期
1.试剂盒保存：；-8℃。
2.有效期：6 个月