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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
仕诺达生物
- 库存:
999
- 样本:
血清,血浆,组织匀浆
- 标记物:
猪促卵泡素
- 适应物种:
猪
- 应用:
高校,中科院,研发单位
- 检测方法:
酶联免疫分析
- 检测范围:
0.3 ng/ml -12 ng/ml
- 规格:
48T/96T
| 猪促卵泡素(FSH)酶联免疫分析 | |
| 试剂盒使用说明书 | |
| 本试剂盒仅供研究使用。 | |
检测范围:![]() |
96T |
| 0.3 ng/ml -12 ng/ml |
使用目的:
本试剂盒用于测定猪血清、血浆及相关液体样本中促卵泡素(FSH)含量。实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中猪促卵泡素(FSH)水平。用纯化的猪促卵泡素(FSH)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入促卵泡素(FSH),再与 HRP 标记的促卵泡素(FSH)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物 TMB 显色。TMB 在 HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的促卵泡素(FSH)呈正相关。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度(OD 值),通过标准曲线计算样品中猪促卵泡素(FSH)浓度。
试剂盒组成
| 1 | 30 倍浓缩洗涤液 | 20ml×1 瓶 | 7 | 终止液 | 6ml×1 瓶 |
| 2 | 酶标试剂 | 6ml×1 瓶 | 8 | 标准品(24 ng/ml) | 0.5ml×1 瓶 |
| 3 | 酶标包被板 | 12 孔×8 条 | 9 | 标准品稀释液 | 1.5ml×1 瓶 |
| 4 | 样品稀释液 | 6ml×1 瓶 | 10 | 说明书 | 1 份 |
| 5 | 显色剂 A 液 | 6ml×1 瓶 | 11 | 封板膜 | 2 张 |
| 6 | 显色剂 B 液 | 6ml×1/瓶 | 12 | 密封袋 | 1 个 |
标本要求

1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能
马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融
2.不能检测含 NaN3 的样品,因 NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤
- 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
| 12 ng/ml | 5 号标准品 | 150μl 的原倍标准品加入 150μl 标准品稀释液 |
| 6 ng/ml | 4 号标准品 | 150μl 的 5 号标准品加入 150μl 标准品稀释液 |
| 3 ng/ml | 3 号标准品 | 150μl 的 4 号标准品加入 150μl 标准品稀释液 |
| 1.5 ng/ml | 2 号标准品 | 150μl 的 3 号标准品加入 150μl 标准品稀释液 |
| 0.75 ng/ml | 1 号标准品 | 150μl 的 2 号标准品加入 150μl 标准品稀释液 |
- 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样 50μl,待测样品孔中先加样品稀释液 40μl,
然后再加待测样品 10μl(样品最终稀释度为 5 倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
- 温育:用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。
- 配液:将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用
- 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置 30 秒后弃去,如此重复 5 次,拍干。
- 加酶:每孔加入酶标试剂 50μl,空白孔除外。
- 温育:操作同 3。
- 洗涤:操作同 5。
- 显色:每孔先加入显色剂 A50μl,再加入显色剂 B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色 10 分钟.
- 终止:每孔加终止液 50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
- 测定:以空白孔调零,450nm 波长依序测量各孔的吸光度(OD 值)。 测定应在加终止液后 15 分钟以内进行。
计算
以标准物的浓度为横坐标,OD 值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的 OD 值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与 OD 值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的 OD 值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,
即为样品的实际浓度。
注意事项
1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡 15-30 分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未
用完,板条应装入密封袋中保存。
2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好
控制在 5 分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4. 请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本 OD 值大于标准品孔第一孔的 OD 值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n 倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物请避光保存。
7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9.本试剂不同批号组分不得混用。
保存条件及有效期
1.试剂盒保存:;2-8℃。
2.有效期:6 个月
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牛促卵泡素(FSH) 酶联免疫 分析( ELISA ) 试剂 盒使用说明书 本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于测定牛血清,血浆及相关液体样本中 促卵泡素(FSH) 的 含量。 实验原理 : 本试剂盒应用双抗体夹心法测定 标本 中 牛 促卵泡素(FSH ) 水平。用纯化的 牛 促卵泡素(FSH ) 抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入 促卵泡素(FSH ), 再与HRP 标记的 FSH 抗体
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