- ￥298
- 李记生物Life-iLab
- AN51L758
- 上海
- 2026年04月04日
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- 英文名：
TRIzol
- CAS号：
/
- 保质期：
12个月
- 供应商：
李记生物
- 保存条件：
4℃
- 规格：
100 mL
总RNA提取试剂（trizol）
产品描述
总RNA提取试剂（trizol）（下文简称“trizol”）的主要成分是异硫氰酸胍，它可以破坏细胞，使细胞RNA释放出来，同时保护RNA的完整性，因此，常用于动植物细胞RNA的提取。
订购信息
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产品名称 |
货号 |
规格 |
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总RNA提取试剂（trizol） |
AN51L758 |
100mL |
运输与保存
常温运输。4℃避光保存，有效期12个月。
使用方法
1. 准备样品
l 组织样品：液氮研磨组织法，组织块直接放入研钵中，加入少量液氮，迅速研磨，待组织变软，再加少量液氮，再研磨，如此三次后，按组织样品质量与trizol体积按照50~100 mg/mL加入，匀浆。【注】：组织体积不能超过trizol体积的10%， 否则匀浆效果不好，用电动匀浆器匀浆约需1~2 min 。
l 细胞：培养贴壁细胞不须消化，可直接用trizol进行消化及裂解，trizol体积按10 cm²/mL比例加入；悬浮细胞可直接收集，消化裂解，每1 mL trizol可裂解 5×106动物、植物或酵母细胞，或1×107细菌细胞。
2. 细胞或组织加trizol后，室温放置5 min,使其充分裂解。【注】：此时可放入﹣70℃ 长期保持。
3. 12,000g离心5 min,弃沉淀。
4. 按200 μL氯仿/mL trizol加入氯仿，振荡混匀后室温放置15 min。【注】：禁用漩涡振荡器，以免基因组DNA断裂。
5. 4℃ 12,000g离心15 min 。
6. 吸取上层水相，至另一离心管中。【注】：千万不要吸取中间界面:若同时提取DNA和蛋白质，则保留下层酚相存于4℃ 冰箱，若只提RNA,则弃下层酚相。
7. 0.5mL异丙醇/mL trizol加入异丙醇混匀，室温放置5~10 min 。
8. 4℃ 12,000g离心10 min, 弃上清，RNA沉于管底。
9. 按1 mL 75%乙醇/mL trizol加入75% 乙醇，温和振荡离心管，悬浮沉淀。
10. 4℃ 8,000g 离心5 min, 尽量弃上清液。
11. 室温晾干或真空干燥5~10 min。【注】：RNA样品不要过于干燥，否则很难溶解。
12. 可用50 μL H2O、TE buffer或0.5% SDS溶解RNA样品，55~60℃ ,5~10 min。【注】：H2O、TE buffer或0.5% SDS均须用DEPC处理并高压。
注意事项
1. 本产品仅限于科学实验研究使用，不得用于临床诊断、治疗等领域。
2. 操作人员应经过专门培训，严格遵守操作规程。
3. 操作处置应在具备局部通风或全面通风换气设施的场所进行。
4. 避免眼和皮肤的接触，避免吸入蒸汽。
5. 远离火种、热源，工作场所严禁吸烟。
6. 整个提RNA过程需要无RNase的实验用具。
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文献和实验在收集到生物材料之后，最好能即刻进行RNA 制备工作。若需暂时储存，则应以液氮将生物材料急速冷冻后，储存于-80℃冷冻柜。在制备RNA 时，将储存于冷冻柜的材料取出，立即以加入液氮研磨的方式打破细胞，不可以先行解冻，以避免RNase 的作用。 1. 提取组织RNA 时，每50～100mg 组织用1ml Trizol 试剂对组织进行裂解；提取细胞RNA 时，先离心沉淀细胞，每5-10 �106 个细胞加1ml Trizol 后，反复用枪吹打或剧烈振荡以裂解细胞； 2. 将上述组织或细胞
量和 Trizol 的加入量一定要按步骤（ 1 ）的比例，不能随意增加样品量或减少 Trizol 量，否则会使内源性 RNase 的抑制不完全，导致 RNA 降解 2 ．实验过程必须严格防止 RNsae 的污染。 （四）总 RNA 定量 RNA 定量方法与 DNA 定量相似。 RNA 在 260nm 波长处有最大的吸收峰。因此，可以用 260nm 波长分光测定 RNA 浓度， OD 值为 1 相当于大约 40 μ g/ml 的单链 RNA 。如用 1cm 光径，用 ddH 2 O
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