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1
Aminopropargyl ddTTP [5-Propargylamino-2',3'-dideoxyuridine-5'-triphosphate]
| 货号 | 17072 | 存储条件 | f/l |
| 规格 | 10 umoles | ||
| Ex (nm) | Em (nm) | ||
| 分子量 | 593.13 | 溶剂 | DMF |
| 产品详细介绍 | |||
简要概述
产品基本信息
货号:17072
产品名称:Aminopropargyl ddTTP [5-Propargylamino-2',3'-dideoxyuridine-5'-triphosphate]
规格:10 umoles
储存条件:-15℃避光防潮
保质期:24个月
产品物理化学光谱特性
分子量:593.13
外观:液体
溶剂:DMF
激发波长(nm):N/A
发射波长(nm):N/A
产品介绍
Sanger法是DNA测序中最早最靠谱的方法之一,DNA由四种脱氧核苷酸三磷酸(dNTP)合成。将每个新核苷酸添加到最后的dNTP的3'-OH基团中。可以将二脱氧胸苷三磷酸(ddTTPs)添加到正在生长的DNA链中,但是当它出现时,链延长会停止,因为下一个要连接的核苷酸没有3'-OH。待测序的DNA被制备成单链。该模板DNA带有大量dATP,dGTP,dCTP和dTTP的混合物。加入四种双脱氧核苷酸(ddATP,ddGTP,ddCTP和ddTTP)的混合物,每种混合物均以限量存在,并分别用发不同颜色的荧光的“标签”标记。因为所有四个正常核苷酸都存在,所以链延伸正常进行,直到偶然地DNA聚合酶插入ddNTP(而不是正常dNTP)。如果正常核苷酸与双脱氧形式的比率足够高,则在插入ddNTP之前,某些DNA链将成功添加数百个核苷酸,从而终止该过程。在孵育期结束时,片段的长度从最长到最短分离,一个核苷酸之间的差异足以使该链与下一较短和下一较长链分开。当被激光束照射时,四个DDNTP中的每一个都会发出不同的荧光,可以通过自动扫描仪打印输出序列。这些ddATP,ddGTP,ddCTP和ddTTP胺衍生物是开发Sanger测序试剂的重要组成部分。百萤生物是AAT Bioquest的中国代理商,为您提供优质的Aminopropargyl ddTTP [5-Propargylamino-2',3'-dideoxyuridine-5'-triphosphate]。
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文献和实验from bisulfite-treated DNA as a template. The oligo is extended by either ddCTP or ddTTP depending on whether the site is methylated or unmethylated, respectively. The reaction is quantitative and linear, and two to three sites can be studied simultaneously
序列自动测定仪问世。化学降解法是在DNA的片段的5`端标记核素,然后用专一性化学试剂将DNA特异地降解,在电泳和自显影后,可得到从标记端延伸的片段供测读序列和进行比较。一般能读出200-250个核苷酸序列。双脱氧法是采用核苷酸链终止剂,如:2`,3`-双脱氧核苷三磷酸ddNTP(如ddTTP、ddTTP、ddGTP和ddCTP中的一种)掺入到DNA链中以终止链的延长,与掺入4种正常的dNTP的混合物分成四组进行反应,这样可得到一组结尾长衙不一、不同专一性核苷酸链终止剂结尾的DNA片段,经凝胶
Singel Nucleotide Primer Extension (SNuPE)
your DNA with bisulphite and then anneal a primer which ends immediately before the site of analysis. Then you perform two primer extension reactions, one with radiolabelled dCTP (ddCTP) and another with dTTP (ddTTP). In this reactions only one nucleotide
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