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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃&-80℃
- 保质期:
3个月~12个月
- 英文名:
pCR4-TOPO-AQP4-AS1(human)(有突变)
- 库存:
大量
- 供应商:
上海禾午生物科技有限公司
- 规格:
2ug冻干粉&300ul甘油菌
| 别名 | NR_026908.1(有突变);C18orf16; CHST9-AS1 |
| 复制子 | pUC |
| 克隆菌株 | DH5a |
| 培养条件 | 37度 |
| 备注 | 2392bp |
| 质粒宿主 | 大肠杆菌 |
| 质粒用途 | 基因模板 |
| 片段类型 | ncRNA |
| 片段物种 | 人 |
| 原核抗性 | Amp |
| pCR4-TOPO-MAGEE2(human)质粒 |
| pCR4-TOPO-GCGR(human)(1同义突变)质粒 |
| pCR4-TOPO-MED9(human)(1同义突变)质粒 |
| pCR4-TOPO-ACKR2(human)质粒 |
| pCR4-TOPO-PNMA3(human)质粒 |
| pCR4-TOPO-GABRA5(human)(1同义突变)质粒 |
| pCR4-TOPO-PTTG1(human)质粒 |
| pCR4-TOPO-HTR5A(human)质粒 |
| pCR4-TOPO-FKBP9(human)质粒 |
| pCR4-TOPO-ZNF615(human)质粒 |
| pCR4-TOPO-SNRNP35(human)质粒 |
| pCR4-TOPO-KLRC2(human)(2点突变)质粒 |
| pCR4-TOPO-TBC1D28(human)质粒 |
| pOTB7-TRAP1质粒 |
| pOTB7-TMED10质粒 |
| pOTB7-PAGR1质粒 |
| pOTB7-GPI质粒 |
| pOTB7-RPH3AL(1点突变)质粒 |
| pOTB7-TMEM175(1同义突变)质粒 |
| pOTB7-TWF2质粒 |
| pOTB7-FEM1A质粒 |
质粒相关图谱、序列及其他内容可查询公司官司网 收到质粒干粉后请先短暂离心,再加入20ul ddH2O 溶解质粒,然后转化进相应的感受态中,再挑取单菌落提取质粒(提供图谱 序列 测序报告 售后)暂时不使用可先放置于-20℃保存,TE缓冲液中-80℃的DNA更佳
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文献和实验自杀性质粒载体:一般用于基因突变。将突变的目的基因克隆到自杀性质粒载体上,通过接合等使其进入宿主,由于在宿主菌中不存在复制基因启始所需的复制蛋白(如Pi蛋白等),其无法复制,在外界选择性压力的作用下,自杀性质粒载体所携带的突变基因就与宿主染色体上的野生型发生基因发生二次同源重组,产生了带有突变的突变株;而质粒载体自身由于自杀性特性连同染色体上原有的野生型基因一起随着细菌的传代从菌体内消失。至于一次重组的突变株,可借助质粒上的某些选择基因(如sacB,sucrose敏感)筛除。整合载体:将目的
1. 临用之前制备羟胺溶液,置冰上待用。 2. 将用氯化铯纯化的 10 μ g 质粒 DNA 加到含 500 μ l 羟胺溶液的微型离心管。 3. 在 37 ℃下培养 20 小时。 4. 加入 10 μ l 的 5mol/L NaCl 、 50 μ g 1mg/ml 的牛血清蛋白( BSA )和 1ml 无水乙醇终止反应,置- 70 ℃沉淀 DNA10 分钟。 5. 离心 10 分钟,小心弃去所有上清液,收集 DNA 。
PCR 将模板扩增出来, 待突变的质粒通常来源于大肠杆菌等细菌,在细菌中会被甲基化修饰,而在体外通过 PCR 扩增得到的质粒不会被甲基化。这样用甲基化酶 DpnI 酶处理,可以消化掉待突变的质粒模板,而使通过 PCR 扩增出来的含有突变位点的质粒被选择性地保留下来。1.突变引物设计: 向质粒进行单点或者多点突变,只需要设计一对引物,进行 PCR 的扩增,替换掉野生型基因的突变位点碱基。(1) 通常突变引物长度为 25~45bp, 一般都是以要突变的碱基为中心, 各加上两边的一段序列, 两边长度至少











