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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
大量
- 英文名:
RP标记抗体稀释液
- 保质期:
一年
- 供应商:
上海信裕生物科技有限公司
- 保存条件:
2-8°C
- 规格:
10ml/100ml
中文名:HRP标记抗体稀释液
英文名:HRP标记抗体稀释液
CAS:N/A
级别:N/A
分子量:N/A
分子式:N/A
纯度:N/A
储存条件:2-8°C
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文献和实验用于免疫检测的特殊配方的抗体稀释液,可以促进抗原抗体特异性结合,产生比传统方法高几倍或十几倍的信号强度,从而解决免疫检测实验中(比如免疫印迹,ELISA等)经常遇到的低灵敏度和高背景强度等问题,得到准确清晰的实验结果。 试剂盒操作简单方便,含有溶液1和2两种即用型溶液,分别用做一抗和二抗的稀释液,替代其他的传统稀释缓冲液,包括TBS,TBST,PBS,PBST等。其余操作均按照标准的免疫检测操作流程进行。此外,试剂盒中各组分对标记抗体的酶活性(辣根过氧化物酶HRP,碱性磷酸酶AP等)均没有影响
本法是以 NaIO 4 先将 HRP 表面的糖分子氧化成醛基,然后再与 Ig 上的氨基相结合,所获酶标记抗体的产率高,将近 70 %的 HRP 和 Ig 结合, 99 %的 Ig 与酶结合,酶与 Ig 的活性无重大损失,是目前最常用的方法。 1. 原理:经典的过碘酸钠法中需采用二硝基氟苯封闭 HRP 上残留的α - 和ε氨基基以避免酶分子之间的交联。后来 Wilson 等改用在低 PH 下使 NaIO 4氧化 HRP ,从而省去了二硝基氟苯封闭 HRP 步骤
滴定:用特异性抗原(或抗体)同酶标记抗体(或抗免疫球蛋白抗体)作双向琼脂扩散试验或免疫电泳试验。然后用酶的底物使沉淀弧显色,可初步鉴定其活性。最后以直接ELISA法(或在正式实验系统里)对酶结合物进行滴定( 见本节 (三)工作浓度的选择)。(2)定量和克分子比值测定:可用分光光度计测定(光程1cm)。酶量(mg/ml)=OD403nm×0.4IgG量(mg/ml)=(OD280nm-OD403nm×0.42)×0.94×0.62 (3)本法标记步骤比较简单,重复性好。缺点是酶的利用率低
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