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- 文献和实验
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- 库存:
大量
- 英文名:
Stripping Buffer
- 保质期:
一年
- 供应商:
上海信裕生物科技有限公司
- 保存条件:
RT
- 规格:
100ml/500ml
中文名:膜再生液(不含β-ME)(一抗二抗清除剂)酸性
英文名:Stripping Buffer
CAS:N/A
级别:N/A
分子量:N/A
分子式:N/A
纯度:N/A
储存条件:RT
产品简介膜再生液亦即 Western 一抗、二抗去除液(Stripping buffer),用于 Western 中转移了蛋白的膜的重复利用。在 Western 中完成了一抗、二抗结合和后续的化学发光检测后,有时还需要检测 tubulin、actin 等表达量相对稳定的蛋白作为参照,或检测其它蛋白进行比较。通过使用膜再生液,充分去除一抗、二抗,可以非常方便地重新利用使用过的膜检测其它蛋白。和重新跑一个 SDS-PAGE 胶相比,不仅省时省力,而且可以消除重新上样所形成的误差,使可比性更强。
使用膜再生液多次重复使用同一张膜,会导致蛋白信号的减弱。但是,本品经过多个抗体的检测试验,通常可以重复利用膜 3-5 次。使用本试剂只需大约 30-40 分钟即可实现蛋白膜的重复使用,然后可以进行封闭等后续的 Western 操作。
本产品不含有毒的β-巯基乙醇。不同的膜再生液主要在去除结合的一抗、二抗的原理方面略有不同。分别依靠去垢剂、酸性、碱性、还原剂、螯合剂、盐浓度以及一些特殊试剂等的不同组合来解除一抗、二抗的结合,同时又不会导致转移到膜上的蛋白的损失。
使用说明:
1. 在完成 Western 化学发光检测后,用 PBST 或 TBST 漂洗 2 次,每次 10 分钟。
2. 弃 PBST 或 TBST 漂洗液,加入适量的膜再生液,至少需把膜完全覆盖。在室温摇床上孵育 10 分钟,弃膜再生液。再加入适量的膜再生液继续孵育 10 分钟。
3. 弃膜再生液,加入 PBST 或 TBST 漂洗 2-3 次,每次 5 分钟。然后再重新加入封闭液。
4.进行封闭(blocking)等 Western 的后续操作。
注意事项:
使用辣根过氧化物酶(HRP),任何一次封闭(blocking)都应当使用 5%脱脂牛奶,如果使用碱性磷酸酯酶,任何一次封闭 都应当使用酪蛋白(casein)。
为取得最佳效果,推荐使用 PVDF 膜。但硝酸纤维素膜也可以使用本产品。使用 ECL、BeyoECL 等类似的化学发光试剂进行的 Western 检测适用本试剂。使用非化学发光试剂进行的 Western 检测,例如 DAB, NBT/BCIP,不适用于本试剂。本产品有轻微腐蚀性,使用时请注意防护。为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!风险提示:丁香通仅作为第三方平台,为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全,合理判断,谨慎选购商品,商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品,请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
文献和实验保存: 大多肽在-20℃很稳定,特别是冷冻干燥并保存在干燥器中,在将它们暴露于空气之前, 冷冻干燥多肽可以放于室温。这将是湿度影响减少,当无法冷冻干燥时,最好的方法是以小的工作样量存放。 对于含Cys, Met orTrP的多肽,脱氧缓冲剂对其溶解必不可少,因为这种多肽可易空气氧化, 在封瓶前,慢慢流过多肽的氮气或氩气也会降低氧化作用。含Gln或Asn的多肽也容易降解,所有这些肽与不含这些有问题解苷的那些肽相比,生命期有限。 溶解性: 大多肽的道选溶剂是超纯
一、保存 大多肽在-20℃很稳定,特别是冷冻干燥并保存在干燥器中,在将它们暴露于空气之前,冷冻干燥多肽可以放于室温。这将是湿度影响减少,当无法冷冻干燥时,最好的方法是以小的工作样量存放。 对于含Cys, Met orTrP的多肽,脱氧缓冲剂对其溶解必不可少,因为这种多肽可易空气氧化,在封瓶前,慢慢流过多肽的氮气或氩气也会降低氧化作用。含Gln或Asn的多肽也容易降解,所有这些肽与不含这些有问题解苷的那些肽相比,生命期有限。 二、溶解性 大多肽的道选溶剂
降解,所有这些肽与不含这些有问题解苷的那些肽相比,生命期有限。 溶解性: 大多肽的道选溶剂是超纯抽气水。稀乙酸或氨水分别对于碱性或酸性多肽的溶解很重要。这些方法不溶的多肽, 需要DMF、脲、guanidiniam chloride或acetonitnle来溶解,这些溶剂可能某些实验有副作用。所以我们建议设计多肽时要加注意。 残基Ala, Cys , Ile, Leu, Met, Phe和Val将全增加多肽的溶解难度。 您需要特殊的多肽或任何技术帮助,请随时与我们联系。 我们包你完全满意
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