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mTeSR™3D
基于mTeSR™1的配方设计,mTeSR™3D专门用于通过聚集体将hPSCs进行悬浮培养及扩增。它被优化为补料分批(fed-batch)培养系统,仅需每天添加营养成分,无需每天进行培养基的更换。
图1. 在mTeSR™3D中培养的hPSC聚集体的形态
悬浮培养的hPSC聚集体的特征形态包括:近似球形,边缘清晰但不非常光滑,外观有斑驳或斑点。每次传代结束时聚集体大小应为约350-400 μm。上图显示的是 (A)hES细胞系H9,(B)H7细胞和(C)hiPS细胞系TiPS-F016。比例尺表示大小。
产品概要
mTeSR™3D was developed for expansion and scale-up of undifferentiated human embryonic stem (ES) cells and human induced pluripotent stem (iPS) cells as aggregates in 3D suspension culture. The novel fed-batch workflow saves time and media. Daily feeds replenish nutrients and eliminate the need for medium exchanges on non-passaging days.mTeSR™3D is a specialised and serum-free formulation. This culture system is compatible with a range of suspension culture vessels.
Components:
- mTeSR™3D Seed Basal Medium, 400 mL
- mTeSR™3D Seed 5X Supplement, 100 mL
- mTeSR™3D Feed Supplement A, 100 mL
- mTeSR™3D Feed Supplement B, 12 mL
多能干细胞
Species:
人
Application:
扩增; 细胞培养
Formulation:
无血清
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文献和实验mM Y-27632 的 hPSC 培养基,之后用 hPSC 培养基换液。37℃,5% CO2 培养 48 小时。 5、用 DPBS 清洗两次后,进入后续的分化步骤。 二、诱导形成胰岛样类器官 6、每天按照对应的培养基换液,培养到第 15 天时细胞聚成悬浮的小球。 7、继续按照对应的培养基换液,37℃,5% CO2 继续培养至 30 天。 图 2. 流式和免疫荧光鉴定。hPSC 诱导形成的 DE、PF、PP 和 hILO 能够正常表达各自的标记物【4】。标尺,100 μm 可用于医学
的 6 孔板中,每孔加入 3ml mTeSR1,放置在 37℃,5%CO2 的培养箱中,培养至细胞融合度约为 75–85%、且大部分无分化的状态时,吸出培养基。 3、向 hPSCs 中加入 1 ml Dispase(1mg/ml),并将培养皿放置在 37℃ 条件下进行解离,直到所有的细胞都以小细胞块或单细胞的形式漂浮。向每个孔中加入 5ml的DMEM-F12,以充分稀释 Dispase。 4、将所有细胞转移至离心管中,室温下 300g 离心 3min,收集沉淀细胞。加入 DMEM-F12 培养基
TrueGel3D™ RGD整合素粘附肽,立即混匀。样品孵育20 min,使RGD肽连接到聚合物上。 3.在含有水、缓冲液、SLO巯基反应性聚合物和TrueGel3D™ RGD整合素粘附肽(如适用)的反应管中加入细胞悬液和蛋白质(如适用)。根据需要在混合液中加入交联剂:根据所选交联剂选择相应的操作方案: A- CD细胞可降解交联剂交联: 混合液会在在1分钟内开始形成凝胶,并且变得不可抽吸。转入合适的细胞培养皿*之前,通过温和抽吸重悬细胞,确保细胞会悬浮在凝胶中。25 min后(加入细胞培养基之前),可用吸头











