1.5和2.0ml无菌独立包装蓝色研磨杵

支原体污染的特点及检验（1）

水中。以0.22μm无菌过滤膜过滤灭菌。分装100 ml至瓶中，保存于 -70℃。　　· 液体培养基 (1 liter) ：称取21 g之Difco PPLO broth，0.02 g phenol red 于600ml蒸馏水中，加热搅拌溶解之。灭菌121℃，15分钟。待温度降低至室温后，于无菌操作台内加入200ml马血清，100ml之15% yeast extract solution，及100ml解涷之10x stock solution，混合均匀后，分装至已灭菌之有盖螺旋试管中，10ml/管。保存

支原体污染的特点及检验

1.0ul　　40umol/L pBR322 DNA 引物 每种 2.0ul　　pBR322 DNA 1pg/ml 2.0ul　　DNA聚合酶（5U/ml） 0.2ul　　三蒸水 35.4ul　　总量 45ul （2）  用无菌去离子水稀释样品为1:10，1:100。 （3）  于每个eppendorf管中加45ul PCR扩增混合物，每管中分别加入样品原液及1:10，1:100稀释液各5ul，操作均在冰浴中进行。 （4）  在每个eppendorf管中轻轻加入50ul无菌矿物油，覆盖在液

Ames 试验（沙门氏菌回复突变试验）方法及导则

，加入无菌试管中，将主平板或冷冻保存的菌株培养物接种于营养肉汤培养基内，37 ℃ 振荡（100 次/min）培养 10 h。该菌株培养物应每毫升不少于 1～2×109 活菌数。11.2 平板掺入法 实验时，将含 0.5 mmol/L 组氨酸 -0.5 mmol/L 生物素溶液的顶层琼脂培养基 2.0 mL 分装于试管中，45 ℃ 水浴中保温，然后每管依次加入试验菌株增菌液 0.1 mL，受试物溶液 0.1 mL 和 S9 混合液 0.5 mL（需代谢活化时），充分混匀，迅速倾入底层琼脂