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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
18
- 英文名:
RTS DH5a感受态细胞
- 保质期:
1年
- 供应商:
上海信裕生物科技有限公司
- 保存条件:
-20
- 规格:
20T
RTS DH5a感受态细胞
| RTS(Room Temperature Stable)系列感受态细胞为信裕生物独有的化学感受态专利技术制备,其室温可保存7天、-20°C可保存2年(推荐保存温度)、-80°C可长期保存性能无下降。运输过程中无需干冰,可常规冰袋运输(推荐运输温度)。RTS克隆感受态细胞均为热激感受态细胞,专用于TA/平端/酶切连接的载体构建(不可用于无缝克隆载体构建),经42°C热激1min可获得106~108cfu/μg效价, 该系列感受态细胞使用简单、运输、储存方便。 | ||||||||
组分 |
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应用 |
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| 质粒转化、DNA克隆、DNA测序 | ||||||||
储存 |
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| RTS系列感受态为干粉形式,均可室温保存3天,长期保存-20°C(2年)。经Nano E.coli Transfection Reagent溶解后的感受态必须分装后,并于-60°C以下保存。溶解后的感受态细胞避免反复冻融,在-60°C以下可保存6个月。 | ||||||||
操作方法 |
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| 1.从-20°C冰箱中取出Nano E.coli Transfection Reagent彻底融化,放置于冰上。取300 μl Nano E.coli Transfection Reagent加入到一支冻干感受态细胞中,并分装到10支1.5 ml EP管中(每支30 μl),于-60°C以下保存(或立即使用)。 2. 将5 μl连接产物加入到分装的感受态细胞中,轻弹EP管(或枪头轻轻吹打),置于冰上15min。 3. 置于42°C热激1min后,迅速置于冰上急冷2min。 4. 热激完毕后,向上述感受态细胞中加入450 μl不含抗生素的SOC(或LB)培养基,37°C振荡(225 rpm)培养60min。使质粒上抗性标记基因表达,菌体复苏。 5. 取200 μl复苏菌液涂布到含相应抗生素的LB琼脂平板表面。 6. 将平板置于37°C培养,12~18小时后可出现菌落。 |
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文献和实验1.挑取-20℃保存的DH5а单菌落接种于3ml的LB液体培养基中,37℃160r/min培养过夜(此为一级培养) 2.将一级培养菌液接2%的量接种于5ml新鲜LB液体培养基中,37℃,200r/min,培养2.5~3.0h,使细菌进入对数生长期。(OD600=0.6左右) 3.将二级培养产物
cloning, including XL1-Blue, DH1, JM103, JM108/9, DH5a, and HB101. MATERIALS Products for this protocol Buffers, Solutions, and Reagents DMSO
DH5α F- endA1 glnV44 thi-1 recA1 relA1 gyrA96 deoR nupG Φ80dlacZΔM15 Δ(lacZYA-argF)U169, hsdR17(rk- mk), λ– 1. An Hoffman-Berling 1100 strain derivative
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