手机验证
询价列表
暂时没有已询价产品
微信扫一扫分享
分享到新浪微博
分享到丁香园论坛
RTS OrigamiB(DE
企业认证
点击 QQ 联系
18
RTS OrigamiB(DE3)感受态细胞
1年
上海信裕生物科技有限公司
-20
10T
1. 从-20°C冰箱中取出Nano E.coli Transfection Reagent彻底融化,放置于冰上。 注意:该试剂含长链带电化合物,允许反复冻融20次,使用完毕后继续-20°C保存。 2. 取50 μl Nano E.coli Transfection Reagent置于0.2 ml EP管中,加入10~100 ng质粒DNA(不可使用连接产物),枪头吹打混合均匀,冰上放置2min。 注意:放置时间不要超过30min,过长时间会导致核酸聚合,从而影响转化效价。 3. 将上述混合物(50 μl Nano E.coli Transfection Reagent和质粒DNA)加入到一支RTS表达感受态细胞干粉中,枪头轻轻吹打,彻底溶解细胞干粉,置于冰上15min。 注意:使用RTS 表达感受态细胞干粉前,轻甩干粉至管底部,如果发现干粉已经溶解则不可使用。 4. 置于42°C热激1min后,迅速置于冰上急冷2min。 5. 将热激完毕的感受态细胞转移到含有450 μl不含抗生素的SOC(或LB)培养基,37°C振荡(225 rpm)培养60min。使质粒上抗性标记基因表达,菌体复苏。 6. 取200 μl复苏菌液涂布到含相应抗生素的LB琼脂平板表面。 7. 将平板置于37°C培养,12~18小时后可出现菌落。 8. 获得的表达菌,可使用IPTG进行诱导表达,从而获得重组蛋白。
风险提示:丁香通仅作为第三方平台,为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全,合理判断,谨慎选购商品,商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品,请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
马上登录 或注册,即可保存询价历史