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mT/mG 报告鼠

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  • Cre 报告小鼠(Cre Reporter),GFP, tdTomato
  • 2026年02月02日
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      杰克森实验室

    系统命名:B6.129(Cg)-Gt(ROSA)26Sortm4(ACTB-tdTomato,-EGFP)Luo/J

    普通命名:mT/mG , mTmG

    品系货号:
    007676 

    品系描述:
    mT/mG 突变纯合的小鼠可存活且可繁育。该品系在膜定位的 tdTomato (mT) 盒两侧具有
    loxP 位点,并在检测的所有组织和细胞类型中表达强红色荧光。尾部或全身荧光足以区分 mT/mG 小鼠和野生型小鼠。在与表达 Cre 重组酶的小鼠杂交时,获得的后代在表达 cre 的组织中敲除了 mT 盒,允许表达位于下游的膜定位的 EGFP (mG) 盒。捐赠者报告,与单独的内源性 Gt(ROSA) 位点相比,ACTB 启动子允许更强和持续的荧光蛋白表达(特别是在成体细胞中)。该双荧光系统允许重组和非重组细胞以单细胞分辨率直接活体成像,为 Cre 诱导的嵌合突变体的表型分析提供内部对照,并为谱系追踪应用提供第二标记物。此外,荧光蛋白定位到膜结构反应了细胞形态的轮廓,并允许分辨精细的细胞过程。这些 mT/mG 小鼠可用作 Cre 报告基因品系,在广泛的细胞和组织类型中,Cre 介导的重组之前表达红色荧光,之后表达绿色荧光。

    品系建立:
    mT/mG(膜-Tomato/膜-GFP)靶向载体设计为包含 CMV 增强子/鸡 β 肌动蛋白核心启动子 (pCA) 驱动表达
    loxP 侧翼、N 端膜标记、tdTomato 蛋白序列后出现多聚腺苷酸化信号(tdTomato 是非寡聚化 DsRed 变体,具有 12 个残基接头,融合 2 个拷贝的蛋白(串联二聚体))。在第二个 loxP 下游是 N 端膜标记的增强绿色荧光蛋白 (EGFP) 序列本身,然后是多聚腺苷酸化信号。在表达载体的远端也有一个 frt 侧翼的 neo 盒。通过电穿孔 (129X1/SvJ x 129S1/Sv) F1 来源的 R1 胚胎干 (ES) 细胞,将整个 mT/mG 载体插入 Gt (ROSA) 26Sor 位点。将正确靶标的 ES 细胞显微注射到 C57BL/6J 囊胚中。将嵌合后代与远交系 CD-1 小鼠杂交。获得的突变小鼠进行相互杂交以产生纯合子,然后送到杰克森实验室(品系货号 007576 )。在到达后,将部分小鼠回交至 C57BL/6J 至少 5 代以产生该同源品系(品系货号 007676)。

    参考文献:  Muzumdar MD; Tasic B; Miyamichi K; Li L; Luo L. 2007. A global double-fluorescent Cre reporter mouse. Genesis 45(9):593-605 PubMed: 17868096 MGI: J:124702

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    • 他们都嘲笑我...的秃了

      作为一个兢兢业业的生命科学搬砖工,不像大户人家养猫养狗,我们养了一窝小鼠。在伺候这些小鼠主子的时候,经常遇到一些让人头秃的事情:小鼠不吃不喝——焦虑了,心理问题要关注?小鼠情绪低落——抑郁了,给你唱个曲吧?雄鼠们头破血流,伤亡惨重,唉,是不是又打架了?小鼠没毛发了,啊啊!我的小鼠咋又秃了?真的太让人头秃了!...这么多让人头秃的现象中,小鼠脱毛是极为常见的一种。那这到底要不要紧呢?会传染给我吗,身为实验搬砖工本来就不多的头发又要愁掉一批了?图片来自 https://theodora.com其实

    • 阅「」无数后,有些话必须告诉你

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    • 】你最美,我的科研维纳斯

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