- ￥495
- 翌圣生物（Yeasen）
- 11214ES60
- 上海翌圣
- 2025年12月03日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
大量
- 英文名：
Hieff Unicon® V Universal Multiplex One Step RT-qPCR Probe Kit (UDG plus)
- 保质期：
有效期1年
- 供应商：
翌圣生物科技(上海)股份有限公司
- 保存条件：
-20℃保存
- 规格：
100T
产品简介
Hieff Unicon® V Universal Multiplex One Step RT-qPCR Probe Kit (UDG plus)是以 RNA 为模板进行多重定量 PCR 反应的试剂盒。在实验的过程中，逆转录和定量 PCR 在同一反应管中进行，简化了实验操作，本产品含有 UDG 酶，可有效防止气溶胶污染的风险。
本试剂盒利用耐热 Hifair® V Reverse Transcriptase 高效合成第一链 cDNA，并利用 UNICON® HotStart Taq DNA Polymerase 进行定量扩增。本试剂盒主要包含优化的 MP Buffer，Enzymes Mix 等，缓冲液中已含有 Mg2+和 dNTP 等，并添加了有效抑制非特异性 PCR 扩增的因子和提升多重 qPCR 反应扩增效率的因子，能够保证引物扩增效率的同时，进行多达四重的反应。
产品信息
| 货号 | 11214ES60 / 11214ES80 / 11214ES92 |
| 规格 | 100 T / 1000 T / 10000 T |
组分信息
| 组分编号 | 组分名称 | 11214ES60(100 T) | 11214ES80(1000 T) | 11214ES92(10000 T) |
| 11214-A | 2×Hifair® VN MP Buffer | 1.25 mL | 12.5 mL | 125 mL |
| 11214-B | Hifair® VN Enzyme Mix (UDG plus) | 150 μL | 750 μL×2 | 15 mL |
| 11214-C | RNase Free H2O | 1.2 mL | 12 mL | 120 mL |
- Hifair® VN Enzyme Mix 主要包含有耐热 Hifair® V Reverse Transcriptase、RNase inhibitor、UNICON® Hot Start Taq DNA Polymerase 和 UDG 酶。
储存条件
-25~-15℃保存，有效期18个月。
使用说明
- 反应体系（以25 μL为例）
| 组分 | 体积（μL） | 终浓度 |
| 2×Hifair® VN MP Buffer | 12.5 | 1× |
| Hifair® VN Enzyme Mix (UDG plus) | 1.5 | - |
| Primer/Probe Mix (10 μM) | 1-4 | 0.4 μM |
| 模板RNA | 1-5 | - |
| RNase Free H2O | to 25 | - |
1. 引物浓度：Primer Mix 中包含多对引物，也可以根据情况在 0.1-1.0 μM 间进行调整。
2. 探针浓度：Probe Mix中包含多条不同荧光信号的探针，每条探针的浓度可根据具体情况在50-300 nM间调整。
3. 模板稀释：qPCR灵敏度极高，建议将模板进行稀释使用，控制Ct值在20-35之间适宜。
4. 反应体系：推荐使用 25-50 μL，以保证目的基因扩增的有效性和重复性。
5. 体系配制：请于超净工作台内配制，并使用无核酸酶残留的枪头、反应管；推荐使用带滤芯的枪头；避免交叉污染和气溶胶污染。
- 参考扩增程序
| 循环步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
| 逆转录 | 50℃a | 10 min | 1 |
| 预变性 | 95℃ | 5 min | 1 |
| 扩增反应 | 95℃ | 15 sec | 45 |
| 60℃b | 30 secc |
b. 扩增反应：扩增反应温度根据设计的引物Tm值进行调整。
c. 荧光信号采集：不同的qPCR检测仪器所需的荧光信号采集时间不同，请根据最短时间限制进行设置。
- 适用机型
Stratagene MX3000P™, MX3005P™, MX4000P™；
Bio-Rad CFX96™, CFX384™, iCycler iQ™, iQ™5, MyiQ™, MiniOpticon™, Opticon®, Opticon® 2, Chromo4™；
Eppendorf Mastercycler® ep realplex, realplex 2 s;
Qiagen Corbett Rotor-Gene® Q, Rotor-Gene® 3000, Rotor-Gene® 6000；
Roche Applied Science LightCycler® 480, LightCycler® 2.0; Lightcycler® 96；
Thermo Scientific PikoReal Cycler; Cepheid SmartCycler®; Illumina Eco qPCR
注意事项
1. 实验过程中请使用RNase free耗材。
2. 为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
Ver.CN20230731
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基因扩增的 PCR 反应。这一方法最早报道于 1988 年 （ 6 ） ，已被成功的用于缺失分析 （ 2,8 ） ，突变 （ 14 ） 与多态性 （ 11 ） ，以及定量分析 （ 10 ） 与反转录 PCR （ 7 ） 等多个 DNA 检测领域。 PCR 反应中各种试剂的作用已被讨论过 （ 3,9,12,13 ） ，也已有许多研究团体对多重 PCR 的方法进行了描述。但是很少有人对影响多重 PCR 结果的因素（如引物浓度、循环条件等）进行过深入的讨论 （ 5,15 ） 。本实验使用常规含 KCl
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