Human PCT(Procalcitonin) ELISA Kit

Human PCT(Procalcitonin) ELISA

Kit
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  • 西格
  • 31.25—2000 pg/mL
  • 进口、国产
  • 2025年07月15日
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      上海西格

    • 库存

      34

    • 样本

      血清,血浆或其他生物体液

    • 标记物

      详见说明书

    • 适应物种

      详见说明书

    • 应用

      详见说明书

    • 检测方法

      Colormetric

    • 检测范围

      31.25—2000 pg/mL

    • 规格

      96T

    操作流程:
    产品仅供科研1待测样品孔中每孔加入待测样品100μl,每种样品设3个平行孔;设两个阴性对照孔,每孔加未处理组的细胞裂解液100μl;另设一个空白对照孔,加入纯细胞裂解液100μl。 
    2酶标板置4℃,包被过夜。
    3洗板:吸干孔内反应液,用洗涤液过洗一遍将洗涤液注满板孔后,即甩去,之后将洗涤液注满板孔,浸泡1-2分钟,间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
    4阴性对照孔每孔加入pbs 50μl,样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人aif抗体工作液50μl。 
    5酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。 
    6洗板,同4。 
    7每孔加1:5000稀释的hrp-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。 
    8酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。 
    9洗板,同4。 
    10每孔加tmb显色液 100μl,轻轻混匀10s,置37℃暗处反应15-20min。 
    11每孔加100μl 2mol/l h2so4终止反应。 
    12分别测450nm 吸光值w1和630nm吸光值w2,终测得的od值为两者之差w1-w2,以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
    13数据处理:在得出标本s和阴性对照n的 od值后,计算s/n值。s/n≥2.1为阳性判定标准。
    产品名称 人降钙素原(PCT)酶联免疫吸附测定试剂盒
    英文名称 Human PCT(Procalcitonin) ELISA Kit
    货号 XGH6807
    用途:
    该试剂盒用于体外定量检测Human 血清,血浆或其他生物体液中天然及部分重组PCT浓度

    检测原理
    本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗人PCT抗体包被于酶标板上,实验时样品或标准品中的人PCT会与包被抗体结合,游离的成分被洗去。依次加入生物素化的抗人PCT抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗人PCT抗体与结合在包被抗体上的人PCT结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB)TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,PCT浓度与OD450值之间呈正比,通过绘制标准曲线计算出样品中PCT的浓度。
    反应类型 夹心法
    规格 96T
    反应时间 3.5h
    反应性 Human
    检测方法 Colormetric
    检测范围 31.252000 pg/mL
    灵敏度 18.75 pg/mL
    样本体积 100μL
    样本类型 血清,血浆或其他生物体液
    特异性
    可检测样本中的人PCT,且与其它相关蛋白无明显交叉反应。
    重复性
    板内,板间变异系数均<10%。
    典型数据
    由于实验操作条件的不同(如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等),标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。

    Human PCT(Procalcitonin) ELISA
    试剂和样本的控制方法:
    一、试剂
    1.试剂的选择:国家明确要求要采用批批检定的形式对ELISA试剂严格把关,我司严格按照进行,已获得国家承认的“三证”,每一个产品都有对应的批号,只要客户提前下单,我们就能为您提供新批次的产品,不必担心会有过期的试剂。我司的试剂,值得您选择。
    2.试剂的准备:先将试剂盒先从冰箱中拿出来,在室温下放置20-30 min后,再进行测定,使试剂盒在使用前与室温平衡,这样做的目的能使反应微孔内的温度较快地达到所需的温度,以满足后面的测定需求。
    二、
    Human PCT(Procalcitonin) ELISA Kit样本
    1.内源性干扰因素:包括类风湿因子、补体、高浓度的非特异免疫球蛋白、异嗜性抗体、某些自身抗体等;
    类风湿因子的控制方法:
    ①用F(ab)2替代完整的IgG;
    ②标本用联有热变性IgG的固相吸附剂处理;
    ③检测抗原时,可用加入到标本稀释液中使RF降解。

    注意事项:
    1加样:
    ①实验样本过多时,可分批次操作,以减少实验时间延长造成的误差;
    ②加酶试剂后,用吸水纸吸干孔外试剂;
    ③作定量试验时,使用加样器加注试剂,并经常校正其准确性,此外,要做到一份样本一个移液头,防止交叉污染。
    2.温育:
    ①如有两种温度,尽量使用较低的温育温度、较长反应时间的条件;
    ②用1个小温度计放置在板孔反应液中测量观察;
    ③96孔板周围孔与中心孔在温育中的热力学梯度会造成“边缘效应”,因此尽量采用水浴;
    3.洗板:
    ①手工洗板时,拍板时要垂直,避免交叉污染,用力不能过猛,防止抗原抗体复合物脱离;
    ②洗板机洗板时应经常检查冲洗头是否通畅,若被杂物堵塞时可用注射器针头挑出;
    ③为了洗涤效果好,实验室可采用机器与人工洗涤相结合的方法,在机器洗涤后再进行人工洗板1-2次,或适当增加洗板的次数;
    4.显色:
    ELISA试剂盒中,如以四甲基胺(TMB)为底物,则提供的底物为A和B两瓶应用液;如以(OPD)为底物,则试剂盒提供剂或粉剂。显色反应条件为37℃或室温反应15-30 min。以OPD)为底物的试剂,要临用前30 min配制且必须避光。以四甲基胺(TMB)为底物的试剂则不需避光,但A、B液应尽量避免接触金属器械。
    5.判定:
    读取结果要在15-30 min内完成,定性测定用肉眼判读试验结果时,反应板应水平距离白色背景10-15 cm;定量测定时用酶标仪读取结果,酶标仪不应置于阳光或强光照射下,需先预热15-30 min再进行测试。

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    服务承诺:
    一、质量保证,有问题免费包换;
    二、提供免费代测服务为客户提供来样检测服务,zui大限度实验结果的有效性;
    三、提供全程技术指导。

     

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