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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
55
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海西格
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
500ml
细胞生物学的研究内容十分广泛,主要包括:
①细胞核、染色体以及基因表达的研究;
②生物膜与细胞器的研究;
③细胞骨架体系的研究;
④细胞增殖及其调控;
⑤细胞分化及其调控;本产品仅供科研
⑥细胞的衰老与编程性死亡(凋亡);
⑦细胞的起源与进化;⑧细胞工程.
细胞生物学研究的常用技术有哪些:
1.显微技术:包括显微观察,显微操作.
2细胞组分分析技术:离心分离技术,生物大分子定位技术,定量细胞化学分析技术.
3.细胞工程:细胞培养。
产品名称:Western转移缓冲液(NC,PVDF)
英文名称:
产品规格:500ml
发货周期:1~3天
用途:
蛋白印迹转移缓冲液或转膜缓冲液,适用于蛋白质转移到PVDF膜或硝酸纤维素膜(NC膜),但更适用于NC膜,不适用于尼龙膜
注意事项:
主要由Tris、甘氨酸、甲醇等组成。
储存条件:室温,12个月
具有显著特点:
灵敏度高,数据可靠,重现性好
操作简便,省时省力
水溶性,不需要换液,尤其适合于悬浮细胞
无需放射性同位素和有机溶剂,对细胞毒性低
为1瓶溶液,毋需预制,即开即用
适合于高通量药物筛选
细胞培养的优点:
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。本产品仅供科研
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
Western转移缓冲液(NC,PVDF)操作步骤:
1、用Hanks液配制0.1%台盼蓝溶液;
2、用0.5%胰蛋白酶:0.2%EDTA=1:1混合液来消化培养的贴壁细胞;
3、再加入适量Hanks液制成细胞悬液;
4、将待染色细胞稀释至所需浓度(方法及浓度范围与细胞计数相同);
5、每0.1ml细胞悬液约加新鲜配制的染液一小滴,室温下染3—5min;
6、染色过的细胞材料,取一滴细胞悬液置玻片上,加盖玻片后放高倍镜下观察;
7、死亡的细胞着浅蓝色并膨大,无光泽。活细胞不着色并保持正常形态,有光泽;
8、计数1000个细胞中的活细胞和死细胞数目;
9、统计未染色细胞。可按公式计算出细胞活率
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文献和实验,特别适合于蛋白印迹 。 就韧性而言:尼龙膜较强;硝酸纤维素膜较脆,易破碎;PVDF膜较强。 就重复性而言:尼龙膜可反复用于分子 杂交,杂交后,探针分子可经碱变性被洗脱下来;硝酸纤维素膜(NC膜)不能重复使用;PVDF膜可以重复使用。 Western Blot时该选择NC膜还是PVDF膜? 硝酸纤维素膜:硝酸纤维素膜(NC膜)是蛋白印迹实验的标准固相支持物。在低离子转移缓冲 液的环境下,大多数带负电荷的蛋白质会与硝酸纤维素膜发生疏水作用而高亲和
glacierna6 如果是做western blot,有个电转的过程,蛋白可以和NC膜比较牢固的结合。 但是如果我前面步骤都不做,直接点二抗到NC膜上呢,放置10分钟,能否牢固结合? 如果加封闭液,用摇床晃或者不晃,会不会把二抗从膜上晃下来(假设是没有饱和结合的)? 谢谢高人指点! shb-sangon 直接点二抗到NC膜上(膜下放置滤纸),放置10分钟,自然风干,能牢固结合。 用无蛋白封闭液
与PVDF膜相比,Protran*纤维素膜在使用中不需要甲醇预湿步骤,这使它可以用于那些需要亲水性环境的蛋白质的转移,在转移之前,膜仅需要在水中简单润湿,然后置于转移缓冲液中,而不再需要其它预湿步骤。 高结合力,低背景 除了具有高结合能力以外,Protran*纤维素膜本身产生的背景非常低,膜特有的表面性质保证了优异的信噪比,而同时却不需要严格的清洗条件。 小分子蛋白的高保留率 Protran*纤维素膜有多种孔径大小可供选择,使不同
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