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45
- 英文名：
Double chromogenic Immunofluorescence kit for Goat IgG(DyLight488&POD)
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海西格
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
1ml|2ml|5ml
双显色免疫组化试剂盒(山羊源一抗)(DyLight488和POD)细胞生物学研究有以下几个方面：
细胞生物学的研究内容十分广泛,主要包括：
①细胞核、染色体以及基因表达的研究；
②生物膜与细胞器的研究；
③细胞骨架体系的研究；
④细胞增殖及其调控；
⑤细胞分化及其调控；本产品仅供科研
⑥细胞的衰老与编程性死亡(凋亡)；
⑦细胞的起源与进化；⑧细胞工程.
细胞生物学研究的常用技术有哪些：
1.显微技术：包括显微观察,显微操作.
2细胞组分分析技术：离心分离技术,生物大分子定位技术,定量细胞化学分析技术.
3.细胞工程：细胞培养。
产品名称：双显色免疫组化试剂盒(山羊源一抗)(DyLight488和POD)
英文名称：Double chromogenic Immunofluorescence kit for Goat IgG(DyLight488&POD)
产品规格：1ml|2ml|5ml
发货周期：1～3天
本试剂盒适于一抗来源为山羊的抗体，是专为免疫组化和其他免疫检测而设计的。链霉亲和素同亲和素一样，对生物素分子有极高的亲和力，是一般抗原抗体亲和力的一百万倍，兼具高敏感性，低背景和操作简便的优点。此免疫组化双显色试剂盒采用荧光素 DyLight 488 与过氧化物酶(POD)标记的链酶亲和素（SABC-DyLight 488+POD）。DyLight 是一种近年来被广泛应用的新型荧光染料，具有很好的光谱宽度、更强的荧光强度，更高的抗淬灭性和特异性，对 pH 不敏感、分子较小渗透性好等优势。DyLight 488 大吸收峰 493nm；大发射峰 518nm。呈黄绿色。加入显色剂 DAB 显色后，染色呈棕黄色。用户根据实验需要，可在同一张切片上用两套显示系统观察。
保存条件：4℃可保存一年，应避免冷冻。
石蜡片染色步骤：
1. 石蜡切片，常规脱蜡至水。
2. 3%H2O2去离子水室温孵育5-10分钟,以消除内源性过氧化物酶活性.PBS冲洗，5分钟×3次。
3. 根据需要选择抗原修复方式及强度。可热修复、酶修复或不修复。
4. 封闭。滴加用稀释后的正常兔血清封闭液(稀释比 1:10)，37℃孵育30分钟，甩干，勿洗。
5. 滴加一抗(山羊IgG)，37℃孵育1-2小时或4℃过夜。PBS冲洗，5分钟×3次。
6. 滴加生物素化兔抗山羊IgG，37℃孵育30 分钟。PBS冲洗，5分钟×3次。
7. 滴加SABC-DyLight 488(参考效价1:200-800)或SABC-POD(参考效价1:100)，37℃孵育30分钟。PBS冲洗，5分钟×3次。
8. 显色液显色，镜下控制反应时间。显色剂可选DAB(ZN1968)。自来水充分冲洗。
9. 根据需要进行苏木素(ZN1971)复染，染色时间为0.5-2分钟。选用中性树胶，水溶性封片剂(ZN2946)或抗荧光衰减封片剂(ZN1974)封片。
10. 结果观察。荧光显微镜下有黄绿色颗粒者为阳性染色。普通光学显微镜下有棕黄色颗粒者为阳性染色。
具有显著特点：
灵敏度高，数据可靠，重现性好
操作简便，省时省力
水溶性，不需要换液，尤其适合于悬浮细胞
无需放射性同位素和有机溶剂，对细胞毒性低
为1瓶溶液，毋需预制，即开即用
适合于高通量药物筛选
细胞培养的优点：
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。本产品仅供科研
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
双显色免疫组化试剂盒(山羊源一抗)(DyLight488和POD)操作步骤：
1、用Hanks液配制0.1%台盼蓝溶液；
2、用0.5%胰蛋白酶：0.2%EDTA=1：1混合液来消化培养的贴壁细胞；
3、再加入适量Hanks液制成细胞悬液；
4、将待染色细胞稀释至所需浓度（方法及浓度范围与细胞计数相同）；
5、每0.1ml细胞悬液约加新鲜配制的染液一小滴，室温下染3—5min；
6、染色过的细胞材料，取一滴细胞悬液置玻片上，加盖玻片后放高倍镜下观察；
7、死亡的细胞着浅蓝色并膨大，无光泽。活细胞不着色并保持正常形态，有光泽；
8、计数1000个细胞中的活细胞和死细胞数目；
9、统计未染色细胞。可按公式计算出细胞活率
以下是相关产品：
AGS(人胃腺癌细胞) 5×106cells/瓶×2阿司咪唑(标准品)质量规格：含量测定Astemizole
HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/VietNam/1203/2004) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人细胞裂解液 (阳性对照) 伊屈泼帕;艾曲波帕质量规格：>99%,血小板生成素受体激动剂Eltrombopag (SB-497115)
小鼠子细胞;U14辣椒平质量规格：>98%,美国进口Capsazepine
METAP2 Others Mouse 小鼠 METAP2 / MAP2 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 盐酸阿米洛利质量规格：>98.5%,水合物Amiloride hydrochloride
CM-M001小鼠肺微血管内皮细胞完全培养基100mL1脂酶A2激活肽质量规格：>95%,BRPhospholipase A2 ActivatingPeptide
ACVR2A Others Mouse 小鼠 ACVR2A / AcIIa 人细胞裂解液 (阳性对照) TAK875TAK-875质量规格：>98%,GPR40激动剂
气管上皮细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)GDPNa2;5’-二1酸鸟苷二钠GDP Di Salt质量规格：>90%,BR
MAP4K5 Others Human 人 MAP4K5 / MEKKK5 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) SU11274SU-11274质量规格：>98%,选择性的Met抑制剂
小鼠畸胎瘤细胞;F9尿苷；尿嘧啶核苷Uridine质量规格：>99%,BR，可用于细胞培养
L6细胞，大鼠成肌细胞 人低转移肝癌细胞,MHCC97-L细胞 CL-0120HuH-7(人肝癌细胞)5×106cells/瓶×2尿嘧啶核苷,尿苷(标准品)Uridine质量规格：HPLC>98%,标准品
人肝星形细胞HHSteCCITRICACID,TRIwo7iumSALT,DIHYDRATE柠檬酸三钠,二水试剂级白色粉末RTsigma
CCL17 Others Human 人 CCL17 / TARC / SCYA17 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 十二烷基磺醋内 1-DODqCcNqSULFONIC cCID wo7ium ScLT 386-23-0
婆罗门牛皮肤成纤维样细胞;BOS-4L-CYSTEINExy7noCHLORIDE,MONOHYDRATEL-半胱酸盐酸盐,一水高级白色精细结晶粉末RTsigma
HeLa[Chang Liver]细胞，张氏肝细胞 人结肠癌细胞,HRT-S1细胞 CM-R069大鼠肾成纤维细胞完全培养基100mLHISTOCHOICETISSUEFIXATIVEWITHOUTALCOHOL组织固定剂组织学级微黄无混浊液体RTsigma
大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞;PC-12 [PC12]134-84-94-甲基二本甲酮4-metxylbenzopxenone
双显色免疫组化试剂盒(山羊源一抗)(DyLight488和POD)ATDC-5-EGFP[ATDC-5-pGC-FU-GFP](稳定株)小鼠软骨细胞 ATDC-5-EGFP[ATDC-5-pGC-FU-GFP] (stable sain) mice cartilage cells DMEM/F12(1：1)+10% FBS脂肪酶测试盒shēng huà shì jì容量：500支/包
IL7 Protein Rat 重组大鼠 IL7 / ierleukin 7 蛋白2-炳1酰安基-2-基炳磺醋 2-ccrylcmidq-2-mqthylpropcnqsulfonic ccid 1214-89-8
人表皮微血管内皮细胞(HDMEC)( 5×105 ) 人少突胶质细胞 Human甲基辛基酮，英文名或英文缩写：2-Decanone，级别：CP，98%，规格：100克
CM-H033人肠微血管内皮细胞完全培养基100mL铱海棉shēng huà shì jì容量：10克
DDR1 Others Rat 大鼠 DDR1 Kinase / MCK10 / CD167 人细胞裂解液 (阳性对照) 6088-51-32，2-二羟基二硫代-6，6-联6-xy7noXY-2-NAPHTHYL DISULFIDE
细胞生物学的研究内容十分广泛,主要包括：
①细胞核、染色体以及基因表达的研究；
②生物膜与细胞器的研究；
③细胞骨架体系的研究；
④细胞增殖及其调控；
⑤细胞分化及其调控；本产品仅供科研
⑥细胞的衰老与编程性死亡(凋亡)；
⑦细胞的起源与进化；⑧细胞工程.
细胞生物学研究的常用技术有哪些：
1.显微技术：包括显微观察,显微操作.
2细胞组分分析技术：离心分离技术,生物大分子定位技术,定量细胞化学分析技术.
3.细胞工程：细胞培养。
产品名称：双显色免疫组化试剂盒(山羊源一抗)(DyLight488和POD)
英文名称：Double chromogenic Immunofluorescence kit for Goat IgG(DyLight488&POD)
产品规格：1ml|2ml|5ml
发货周期：1～3天
本试剂盒适于一抗来源为山羊的抗体，是专为免疫组化和其他免疫检测而设计的。链霉亲和素同亲和素一样，对生物素分子有极高的亲和力，是一般抗原抗体亲和力的一百万倍，兼具高敏感性，低背景和操作简便的优点。此免疫组化双显色试剂盒采用荧光素 DyLight 488 与过氧化物酶(POD)标记的链酶亲和素（SABC-DyLight 488+POD）。DyLight 是一种近年来被广泛应用的新型荧光染料，具有很好的光谱宽度、更强的荧光强度，更高的抗淬灭性和特异性，对 pH 不敏感、分子较小渗透性好等优势。DyLight 488 大吸收峰 493nm；大发射峰 518nm。呈黄绿色。加入显色剂 DAB 显色后，染色呈棕黄色。用户根据实验需要，可在同一张切片上用两套显示系统观察。
保存条件：4℃可保存一年，应避免冷冻。
石蜡片染色步骤：
1. 石蜡切片，常规脱蜡至水。
2. 3%H2O2去离子水室温孵育5-10分钟,以消除内源性过氧化物酶活性.PBS冲洗，5分钟×3次。
3. 根据需要选择抗原修复方式及强度。可热修复、酶修复或不修复。
4. 封闭。滴加用稀释后的正常兔血清封闭液(稀释比 1:10)，37℃孵育30分钟，甩干，勿洗。
5. 滴加一抗(山羊IgG)，37℃孵育1-2小时或4℃过夜。PBS冲洗，5分钟×3次。
6. 滴加生物素化兔抗山羊IgG，37℃孵育30 分钟。PBS冲洗，5分钟×3次。
7. 滴加SABC-DyLight 488(参考效价1:200-800)或SABC-POD(参考效价1:100)，37℃孵育30分钟。PBS冲洗，5分钟×3次。
8. 显色液显色，镜下控制反应时间。显色剂可选DAB(ZN1968)。自来水充分冲洗。
9. 根据需要进行苏木素(ZN1971)复染，染色时间为0.5-2分钟。选用中性树胶，水溶性封片剂(ZN2946)或抗荧光衰减封片剂(ZN1974)封片。
10. 结果观察。荧光显微镜下有黄绿色颗粒者为阳性染色。普通光学显微镜下有棕黄色颗粒者为阳性染色。
具有显著特点：
灵敏度高，数据可靠，重现性好
操作简便，省时省力
水溶性，不需要换液，尤其适合于悬浮细胞
无需放射性同位素和有机溶剂，对细胞毒性低
为1瓶溶液，毋需预制，即开即用
适合于高通量药物筛选
细胞培养的优点：
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。本产品仅供科研
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
双显色免疫组化试剂盒(山羊源一抗)(DyLight488和POD)操作步骤：
1、用Hanks液配制0.1%台盼蓝溶液；
2、用0.5%胰蛋白酶：0.2%EDTA=1：1混合液来消化培养的贴壁细胞；
3、再加入适量Hanks液制成细胞悬液；
4、将待染色细胞稀释至所需浓度（方法及浓度范围与细胞计数相同）；
5、每0.1ml细胞悬液约加新鲜配制的染液一小滴，室温下染3—5min；
6、染色过的细胞材料，取一滴细胞悬液置玻片上，加盖玻片后放高倍镜下观察；
7、死亡的细胞着浅蓝色并膨大，无光泽。活细胞不着色并保持正常形态，有光泽；
8、计数1000个细胞中的活细胞和死细胞数目；
9、统计未染色细胞。可按公式计算出细胞活率
以下是相关产品：
AGS(人胃腺癌细胞) 5×106cells/瓶×2阿司咪唑(标准品)质量规格：含量测定Astemizole
HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/VietNam/1203/2004) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人细胞裂解液 (阳性对照) 伊屈泼帕;艾曲波帕质量规格：>99%,血小板生成素受体激动剂Eltrombopag (SB-497115)
小鼠子细胞;U14辣椒平质量规格：>98%,美国进口Capsazepine
METAP2 Others Mouse 小鼠 METAP2 / MAP2 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 盐酸阿米洛利质量规格：>98.5%,水合物Amiloride hydrochloride
CM-M001小鼠肺微血管内皮细胞完全培养基100mL1脂酶A2激活肽质量规格：>95%,BRPhospholipase A2 ActivatingPeptide
ACVR2A Others Mouse 小鼠 ACVR2A / AcIIa 人细胞裂解液 (阳性对照) TAK875TAK-875质量规格：>98%,GPR40激动剂
气管上皮细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)GDPNa2;5’-二1酸鸟苷二钠GDP Di Salt质量规格：>90%,BR
MAP4K5 Others Human 人 MAP4K5 / MEKKK5 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) SU11274SU-11274质量规格：>98%,选择性的Met抑制剂
小鼠畸胎瘤细胞;F9尿苷；尿嘧啶核苷Uridine质量规格：>99%,BR，可用于细胞培养
L6细胞，大鼠成肌细胞 人低转移肝癌细胞,MHCC97-L细胞 CL-0120HuH-7(人肝癌细胞)5×106cells/瓶×2尿嘧啶核苷,尿苷(标准品)Uridine质量规格：HPLC>98%,标准品
人肝星形细胞HHSteCCITRICACID,TRIwo7iumSALT,DIHYDRATE柠檬酸三钠,二水试剂级白色粉末RTsigma
CCL17 Others Human 人 CCL17 / TARC / SCYA17 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 十二烷基磺醋内 1-DODqCcNqSULFONIC cCID wo7ium ScLT 386-23-0
婆罗门牛皮肤成纤维样细胞;BOS-4L-CYSTEINExy7noCHLORIDE,MONOHYDRATEL-半胱酸盐酸盐,一水高级白色精细结晶粉末RTsigma
HeLa[Chang Liver]细胞，张氏肝细胞 人结肠癌细胞,HRT-S1细胞 CM-R069大鼠肾成纤维细胞完全培养基100mLHISTOCHOICETISSUEFIXATIVEWITHOUTALCOHOL组织固定剂组织学级微黄无混浊液体RTsigma
大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞;PC-12 [PC12]134-84-94-甲基二本甲酮4-metxylbenzopxenone
双显色免疫组化试剂盒(山羊源一抗)(DyLight488和POD)ATDC-5-EGFP[ATDC-5-pGC-FU-GFP](稳定株)小鼠软骨细胞 ATDC-5-EGFP[ATDC-5-pGC-FU-GFP] (stable sain) mice cartilage cells DMEM/F12(1：1)+10% FBS脂肪酶测试盒shēng huà shì jì容量：500支/包
IL7 Protein Rat 重组大鼠 IL7 / ierleukin 7 蛋白2-炳1酰安基-2-基炳磺醋 2-ccrylcmidq-2-mqthylpropcnqsulfonic ccid 1214-89-8
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CM-H033人肠微血管内皮细胞完全培养基100mL铱海棉shēng huà shì jì容量：10克
DDR1 Others Rat 大鼠 DDR1 Kinase / MCK10 / CD167 人细胞裂解液 (阳性对照) 6088-51-32，2-二羟基二硫代-6，6-联6-xy7noXY-2-NAPHTHYL DISULFIDE
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关于荧光三标如何选择抗体？做免疫荧光实验中，经常要进行免疫荧光的双标记实验，也就是在同一个样本上同时进行两种蛋白的免疫荧光检测。具体的实验时，可以选择不同来源的一抗，然后再选择分别针对一抗的二抗，同时二抗上标记有不同的荧光团。一般的双标记实验里，都会选择一个绿色的（如FITC、Cy2、Dylight 488等）荧光标记，一个红色的（如Rhodamin、Cy3、TRITC、Texas Rad、Dylight 539等）的荧光标记。红绿二色的区分度很大，效果也比较理想。那么，如果是三标呢？左侧
免疫荧光三标？――蓝色荧光的AMCA与Dylight 405标记二抗 做免疫荧光实验中，经常要进行免疫荧光的双标记实验，也就是在同一个样本上同时进行两种蛋白的免疫荧光检测。具体的实验时，可以选择不同来源的一抗，然后再选择分别针对一抗的二抗，同时二抗上标记有不同的荧光团。一般的双标记实验里，都会选择一个绿色的（如FITC、Cy2、Dylight 488等）荧光标记，一个红色的（如Rhodamin、Cy3、TRITC、Texas Rad、Dylight 539等）的荧光标记。红绿二色的区分
）1、从冰箱取出细胞片或细胞板，置室温或37℃ 10-15分钟，使恢复温度。2、加3% H2O2，细胞片20ul/孔，培养板100ul/孔，使充分覆盖住细胞。3、室温10分钟后，甩掉 H2O2，用PBS轻轻淋洗2分钟。用滤纸吸干细胞周围水份，96孔在滤水纸上扣干，但注意保持细胞湿润。三、封闭细胞片用5-10%正常山羊血清（20ml/孔），细胞板用2-5%BSA（PBS配制）100ul/孔，置37℃孵育30分钟后甩掉封闭液，不洗。四、免疫化学染色1、分别加一抗和所有对照一抗，细胞法10-20ul/孔，细胞
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