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43
- 英文名：
Double chromogenic Immunofluorescence kit for Rat IgG(DyLight488&POD)
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海西格
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
1ml|2ml|5ml
产品名称：双显色免疫组化试剂盒(大鼠源一抗)(DyLight488和POD)
英文名称：Double chromogenic Immunofluorescence kit for Rat IgG(DyLight488&POD)
产品规格：1ml|2ml|5ml
发货周期：1～3天
本试剂盒适于一抗来源为大鼠的抗体，是专为免疫组化和其他免疫检测而设计的。链霉亲和素同亲和素一样，对生物素分子有极高的亲和力，是一般抗原抗体亲和力的一百万倍，兼具高敏感性，低背景和操作简便的优点。此免疫组化双显色试剂盒采用荧光素 DyLight 488 与过氧化物酶(POD)标记的链酶亲和素（SABC-DyLight 488+POD）。DyLight 是一种近年来被广泛应用的新型荧光染料，具有很好的光谱宽度、更强的荧光强度，更高的抗淬灭性和特异性，对 pH 不敏感、分子较小渗透性好等优势。DyLight 488 大吸收峰 493nm；大发射峰 518nm。呈黄绿色。加入显色剂 DAB 显色后，染色呈棕黄色。用户根据实验需要，可在同一张切片上用两套显示系统观察。
保存条件：4℃可保存一年，应避免冷冻。
石蜡片染色步骤：
1. 石蜡切片，常规脱蜡至水。
2. 3%H2O2去离子水室温孵育5-10分钟,以消除内源性过氧化物酶活性.PBS冲洗，5分钟×3次。
3. 根据需要选择抗原修复方式及强度。可热修复、酶修复或不修复。
4. 封闭。滴加用稀释后的正常兔血清封闭液(稀释比 1:10)，37℃孵育30分钟，甩干，勿洗。
5. 滴加一抗(大鼠IgG)，37℃孵育1-2小时或4℃过夜。PBS冲洗，5分钟×3次。
6. 滴加生物素化兔抗大鼠IgG，37℃孵育30 分钟。PBS冲洗，5分钟×3次。
7. 滴加SABC-DyLight 488(参考效价1:200-800)或SABC-POD(参考效价1:100)，37℃孵育30分钟。PBS冲洗，5分钟×3次。
8. 显色液显色，镜下控制反应时间。显色剂可选DAB(ZN1968)。自来水充分冲洗。
9. 根据需要进行苏木素(ZN1971)复染，染色时间为0.5-2分钟。选用中性树胶，水溶性封片剂(ZN2946)或抗荧光衰减封片剂(ZN1974)封片。
10. 结果观察。荧光显微镜下有黄绿色颗粒者为阳性染色。普通光学显微镜下有棕黄色颗粒者为阳性染色。
双显色免疫组化试剂盒(大鼠源一抗)(DyLight488和POD)细胞生物学研究有以下几个方面：
细胞生物学的研究内容十分广泛,主要包括：
①细胞核、染色体以及基因表达的研究；
②生物膜与细胞器的研究；
③细胞骨架体系的研究；
④细胞增殖及其调控；
⑤细胞分化及其调控；
⑥细胞的衰老与编程性死亡(凋亡)；
⑦细胞的起源与进化；⑧细胞工程.
细胞生物学研究的常用技术有哪些：
1.显微技术：包括显微观察,显微操作.
2细胞组分分析技术：离心分离技术,生物大分子定位技术,定量细胞化学分析技术.
3.细胞工程：细胞培养。
具有显著特点：本产品仅供科研
灵敏度高，数据可靠，重现性好
操作简便，省时省力
水溶性，不需要换液，尤其适合于悬浮细胞
无需放射性同位素和有机溶剂，对细胞毒性低
为1瓶溶液，毋需预制，即开即用
适合于高通量药物筛选
细胞培养的优点：
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
以下是双显色免疫组化试剂盒(大鼠源一抗)(DyLight488和POD)的相关产品：
AKT3 Others Human 人 AKT3 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 贝沙罗汀-d4质量规格：美国进口Bexarotene d4
SMCFectagen? 平滑肌细胞转染试剂盒二氢酮洛芬(非对映)质量规格：美国进口Dihydro Ketoprofen (Mixture of Diastereomers)
LoVo细胞，人结肠癌细胞 HEK293,人胚肾上皮细胞,293A细胞 肾动脉平滑肌细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)二氢酮洛芬β-D-葡萄糖苷酸,非对映质量规格：美国进口Dihydro Ketoprofen β-D-Glucuronide, Mixture of Diastereomers
家兔肾细胞;RABK3来氟米特3-异构体质量规格：美国进口Leflunomide 3-Isomer
SFRP4 Others Mouse 小鼠 sFRP4 人细胞裂解液 (阳性对照) 油酸乙酯(>95.0%(GC))质量规格：>95.0%(GC)Ethyl Oleate
ACVRL1 Others Canine 狗 ALK1 / ACVRL1 人细胞裂解液 (阳性对照) O-苄基-L-酪氨酸O-Benzyl-L-tyrosine质量规格：0.98
人APP-PS1(M146L)双基因转染CHO细胞株;7WML6.0N-乙酰-L-赖氨酸/N6-三氟乙酰基-L-赖氨酸N-6-Trifluoroacetyl-L-lysine质量规格：>98%,BR
CaPan-Ⅱ/Capan-2细胞，人胰腺癌细胞 人胸腺激酶缺陷性细胞系,143TK细胞 C57BL/6小鼠T细胞瘤细胞;RMAO-苄基-L-丝氨酸O-Benzyl-L-serine质量规格：>98%,BR
IBRS-2(猪肾细胞) 5×106cells/瓶×2O-叔丁基-L-丝氨酸O-tert-Butyl-L-serine 质量规格：度98%,BR
Promocell C-21010 Mammary Epithelial Cell GrowthMedium, 上皮细胞生长培养基(即用型) 500mlIdelalisib;CAL101CAL-101 (GS-1101)质量规格：>99%,选择性p110δ抑制剂
PANC-1 人胰腺癌细胞CBZ-D-色酸shēng huà shì jì容量：25克
CL-0458U-118 MG(人脑星形胶质母细胞瘤)5×106cells/瓶×2S-腺苷蛋安醋队本磺醋流醋盐 cdqMqtioninq Disulfctq Tosylctq 97240--
人脑微血管内皮细胞柠檬酸 (无水, USP级) Citric acid (USP grade, 99.5-100.5%) 77-92-9 100G 核酸衍生物
人脐静脉内皮细胞(人膀胱癌细胞污染);ECV-304 [ECV304;ECV 304] 人肠静脉内皮细胞完全培养基 100mL啶-2-酸，英文名或英文缩写：DL-Proline，级别：BR，99%，规格：25克
人前列腺成纤维细胞HPrF16962-40-6扶钛酸铵TITANIUM
双显色免疫组化试剂盒(大鼠源一抗)(DyLight488和POD)B16-F10小鼠皮肤色素瘤细胞 B16-F10 mouse melanoma cell DMEM培养基+10%FBS无水以shēng huà shì jì容量：RT，避光5克
IL1RN Protein Human 重组人 IL-1RA / IL1RN 蛋白D-天冬酸 D-Aspartic acid,99% 1783-96-6 5G 通用试剂
PLC/PRF/5(人肝癌亚力山大细胞) 5×106cells/瓶×2 293T/17 [HEK 293T/17] (人胚肾细胞)同洛芬相关物质C Kqtoprofqn Rqlctqd CoMpound C;2-(3-ccrboxyphqnyl)propionic ccid 6843-92-1
CL-0236U-2 OS(人骨肉瘤细胞)5×106cells/瓶×2Amaranth酸性红27250毫克高，95%
IL1R1 Others Human 人 IL1R1 / CD121a 人细胞裂解液 (阳性对照) 103-50-4二苄Dibenzyl
操作步骤：本产品仅供科研
1、用Hanks液配制0.1%台盼蓝溶液；
2、用0.5%胰蛋白酶：0.2%EDTA=1：1混合液来消化培养的贴壁细胞；
3、再加入适量Hanks液制成细胞悬液；
4、将待染色细胞稀释至所需浓度（方法及浓度范围与细胞计数相同）；
5、每0.1ml细胞悬液约加新鲜配制的染液一小滴，室温下染3—5min；
6、染色过的细胞材料，取一滴细胞悬液置玻片上，加盖玻片后放高倍镜下观察；
7、死亡的细胞着浅蓝色并膨大，无光泽。活细胞不着色并保持正常形态，有光泽；
8、计数1000个细胞中的活细胞和死细胞数目；
9、统计未染色细胞。可按公式计算出细胞活率
英文名称：Double chromogenic Immunofluorescence kit for Rat IgG(DyLight488&POD)
产品规格：1ml|2ml|5ml
发货周期：1～3天
本试剂盒适于一抗来源为大鼠的抗体，是专为免疫组化和其他免疫检测而设计的。链霉亲和素同亲和素一样，对生物素分子有极高的亲和力，是一般抗原抗体亲和力的一百万倍，兼具高敏感性，低背景和操作简便的优点。此免疫组化双显色试剂盒采用荧光素 DyLight 488 与过氧化物酶(POD)标记的链酶亲和素（SABC-DyLight 488+POD）。DyLight 是一种近年来被广泛应用的新型荧光染料，具有很好的光谱宽度、更强的荧光强度，更高的抗淬灭性和特异性，对 pH 不敏感、分子较小渗透性好等优势。DyLight 488 大吸收峰 493nm；大发射峰 518nm。呈黄绿色。加入显色剂 DAB 显色后，染色呈棕黄色。用户根据实验需要，可在同一张切片上用两套显示系统观察。
保存条件：4℃可保存一年，应避免冷冻。
石蜡片染色步骤：
1. 石蜡切片，常规脱蜡至水。
2. 3%H2O2去离子水室温孵育5-10分钟,以消除内源性过氧化物酶活性.PBS冲洗，5分钟×3次。
3. 根据需要选择抗原修复方式及强度。可热修复、酶修复或不修复。
4. 封闭。滴加用稀释后的正常兔血清封闭液(稀释比 1:10)，37℃孵育30分钟，甩干，勿洗。
5. 滴加一抗(大鼠IgG)，37℃孵育1-2小时或4℃过夜。PBS冲洗，5分钟×3次。
6. 滴加生物素化兔抗大鼠IgG，37℃孵育30 分钟。PBS冲洗，5分钟×3次。
7. 滴加SABC-DyLight 488(参考效价1:200-800)或SABC-POD(参考效价1:100)，37℃孵育30分钟。PBS冲洗，5分钟×3次。
8. 显色液显色，镜下控制反应时间。显色剂可选DAB(ZN1968)。自来水充分冲洗。
9. 根据需要进行苏木素(ZN1971)复染，染色时间为0.5-2分钟。选用中性树胶，水溶性封片剂(ZN2946)或抗荧光衰减封片剂(ZN1974)封片。
10. 结果观察。荧光显微镜下有黄绿色颗粒者为阳性染色。普通光学显微镜下有棕黄色颗粒者为阳性染色。
双显色免疫组化试剂盒(大鼠源一抗)(DyLight488和POD)细胞生物学研究有以下几个方面：
细胞生物学的研究内容十分广泛,主要包括：
①细胞核、染色体以及基因表达的研究；
②生物膜与细胞器的研究；
③细胞骨架体系的研究；
④细胞增殖及其调控；
⑤细胞分化及其调控；
⑥细胞的衰老与编程性死亡(凋亡)；
⑦细胞的起源与进化；⑧细胞工程.
细胞生物学研究的常用技术有哪些：
1.显微技术：包括显微观察,显微操作.
2细胞组分分析技术：离心分离技术,生物大分子定位技术,定量细胞化学分析技术.
3.细胞工程：细胞培养。
具有显著特点：本产品仅供科研
灵敏度高，数据可靠，重现性好
操作简便，省时省力
水溶性，不需要换液，尤其适合于悬浮细胞
无需放射性同位素和有机溶剂，对细胞毒性低
为1瓶溶液，毋需预制，即开即用
适合于高通量药物筛选
细胞培养的优点：
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
以下是双显色免疫组化试剂盒(大鼠源一抗)(DyLight488和POD)的相关产品：
AKT3 Others Human 人 AKT3 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 贝沙罗汀-d4质量规格：美国进口Bexarotene d4
SMCFectagen? 平滑肌细胞转染试剂盒二氢酮洛芬(非对映)质量规格：美国进口Dihydro Ketoprofen (Mixture of Diastereomers)
LoVo细胞，人结肠癌细胞 HEK293,人胚肾上皮细胞,293A细胞 肾动脉平滑肌细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)二氢酮洛芬β-D-葡萄糖苷酸,非对映质量规格：美国进口Dihydro Ketoprofen β-D-Glucuronide, Mixture of Diastereomers
家兔肾细胞;RABK3来氟米特3-异构体质量规格：美国进口Leflunomide 3-Isomer
SFRP4 Others Mouse 小鼠 sFRP4 人细胞裂解液 (阳性对照) 油酸乙酯(>95.0%(GC))质量规格：>95.0%(GC)Ethyl Oleate
ACVRL1 Others Canine 狗 ALK1 / ACVRL1 人细胞裂解液 (阳性对照) O-苄基-L-酪氨酸O-Benzyl-L-tyrosine质量规格：0.98
人APP-PS1(M146L)双基因转染CHO细胞株;7WML6.0N-乙酰-L-赖氨酸/N6-三氟乙酰基-L-赖氨酸N-6-Trifluoroacetyl-L-lysine质量规格：>98%,BR
CaPan-Ⅱ/Capan-2细胞，人胰腺癌细胞 人胸腺激酶缺陷性细胞系,143TK细胞 C57BL/6小鼠T细胞瘤细胞;RMAO-苄基-L-丝氨酸O-Benzyl-L-serine质量规格：>98%,BR
IBRS-2(猪肾细胞) 5×106cells/瓶×2O-叔丁基-L-丝氨酸O-tert-Butyl-L-serine 质量规格：度98%,BR
Promocell C-21010 Mammary Epithelial Cell GrowthMedium, 上皮细胞生长培养基(即用型) 500mlIdelalisib;CAL101CAL-101 (GS-1101)质量规格：>99%,选择性p110δ抑制剂
PANC-1 人胰腺癌细胞CBZ-D-色酸shēng huà shì jì容量：25克
CL-0458U-118 MG(人脑星形胶质母细胞瘤)5×106cells/瓶×2S-腺苷蛋安醋队本磺醋流醋盐 cdqMqtioninq Disulfctq Tosylctq 97240--
人脑微血管内皮细胞柠檬酸 (无水, USP级) Citric acid (USP grade, 99.5-100.5%) 77-92-9 100G 核酸衍生物
人脐静脉内皮细胞(人膀胱癌细胞污染);ECV-304 [ECV304;ECV 304] 人肠静脉内皮细胞完全培养基 100mL啶-2-酸，英文名或英文缩写：DL-Proline，级别：BR，99%，规格：25克
人前列腺成纤维细胞HPrF16962-40-6扶钛酸铵TITANIUM
双显色免疫组化试剂盒(大鼠源一抗)(DyLight488和POD)B16-F10小鼠皮肤色素瘤细胞 B16-F10 mouse melanoma cell DMEM培养基+10%FBS无水以shēng huà shì jì容量：RT，避光5克
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PLC/PRF/5(人肝癌亚力山大细胞) 5×106cells/瓶×2 293T/17 [HEK 293T/17] (人胚肾细胞)同洛芬相关物质C Kqtoprofqn Rqlctqd CoMpound C;2-(3-ccrboxyphqnyl)propionic ccid 6843-92-1
CL-0236U-2 OS(人骨肉瘤细胞)5×106cells/瓶×2Amaranth酸性红27250毫克高，95%
IL1R1 Others Human 人 IL1R1 / CD121a 人细胞裂解液 (阳性对照) 103-50-4二苄Dibenzyl
操作步骤：本产品仅供科研
1、用Hanks液配制0.1%台盼蓝溶液；
2、用0.5%胰蛋白酶：0.2%EDTA=1：1混合液来消化培养的贴壁细胞；
3、再加入适量Hanks液制成细胞悬液；
4、将待染色细胞稀释至所需浓度（方法及浓度范围与细胞计数相同）；
5、每0.1ml细胞悬液约加新鲜配制的染液一小滴，室温下染3—5min；
6、染色过的细胞材料，取一滴细胞悬液置玻片上，加盖玻片后放高倍镜下观察；
7、死亡的细胞着浅蓝色并膨大，无光泽。活细胞不着色并保持正常形态，有光泽；
8、计数1000个细胞中的活细胞和死细胞数目；
9、统计未染色细胞。可按公式计算出细胞活率
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文献和实验相关实验
关于荧光三标如何选择抗体？做免疫荧光实验中，经常要进行免疫荧光的双标记实验，也就是在同一个样本上同时进行两种蛋白的免疫荧光检测。具体的实验时，可以选择不同来源的一抗，然后再选择分别针对一抗的二抗，同时二抗上标记有不同的荧光团。一般的双标记实验里，都会选择一个绿色的（如FITC、Cy2、Dylight 488等）荧光标记，一个红色的（如Rhodamin、Cy3、TRITC、Texas Rad、Dylight 539等）的荧光标记。红绿二色的区分度很大，效果也比较理想。那么，如果是三标呢？左侧
免疫荧光三标？――蓝色荧光的AMCA与Dylight 405标记二抗 做免疫荧光实验中，经常要进行免疫荧光的双标记实验，也就是在同一个样本上同时进行两种蛋白的免疫荧光检测。具体的实验时，可以选择不同来源的一抗，然后再选择分别针对一抗的二抗，同时二抗上标记有不同的荧光团。一般的双标记实验里，都会选择一个绿色的（如FITC、Cy2、Dylight 488等）荧光标记，一个红色的（如Rhodamin、Cy3、TRITC、Texas Rad、Dylight 539等）的荧光标记。红绿二色的区分
多，需要分别设定阳性和阴性对照。 二、注意事项 1、荧光染色后一般在1h内完成观察，或于4℃保存4h，时间过长，可能会使荧光提前衰退。 2、每次试验均需设置以下三种对照： (1) 阳性对照：阳性血清+荧光标记物; (2) 阴性对照：阴性血清+荧光标记物; (3) 荧光标记物对照：PBS+荧光标记物。 三、免疫荧光双标的经验之谈 1、选取一抗时，要求来源于两种不同的动物，我用的是来源于家兔和大鼠的抗体，二抗
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