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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
41
- 英文名:
Quick Antigen Retrieval Solution for Frozen Sections
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海西格
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
100ml
1、用Hanks液配制0.1%台盼蓝溶液;
2、用0.5%胰蛋白酶:0.2%EDTA=1:1混合液来消化培养的贴壁细胞;
3、再加入适量Hanks液制成细胞悬液;
4、将待染色细胞稀释至所需浓度(方法及浓度范围与细胞计数相同);
5、每0.1ml细胞悬液约加新鲜配制的染液一小滴,室温下染3—5min;
6、染色过的细胞材料,取一滴细胞悬液置玻片上,加盖玻片后放高倍镜下观察;
7、死亡的细胞着浅蓝色并膨大,无光泽。本产品仅供科研活细胞不着色并保持正常形态,有光泽;
8、计数1000个细胞中的活细胞和死细胞数目;
9、统计未染色细胞。可按公式计算出细胞活率
产品名称:冰冻切片快速抗原修复液(5X)
英文名称:Quick Antigen Retrieval Solution for Frozen Sections
产品规格:100ml
发货周期:1~3天
本品是一种特别适合用于冰冻切片的快速抗原修复液,只需室温孵育5分钟即可完成对冰冻切片样品使用多醛、甲醛或其它醛类试剂固定后的抗原修复。
细胞或组织用多醛、甲醛或其它醛类试剂固定后,会导致蛋白之间的交联(cross-link),从而遮蔽样品的抗原位点,导致免疫染色时染色信号减弱,甚至出现一些假阳性染色结果。
本抗原修复液含有了广泛使用的SDS等抗原修复试剂等,pH值约为7.4,可以快速有效地去除醛类固定试剂导致的蛋白之间的交联,充分暴露石蜡切片等样品中的抗原表位,从而大大改善免疫染色效果。
通常石蜡切片都需进行抗原修复处理,而冰冻切片可以不进行抗原修复处理。抗原修复会大大改善石蜡切片的免疫染色效果,但对于冰冻切片的染色效果很多文献资料表明也有显著改善。特别是当冰冻切片免疫染色效果欠佳时,可以考虑尝试进行抗原修复。从原理上来看,无论冰冻切片还是细胞爬片等,只要是用多醛、甲醛或其它醛类试剂固定的样品,进行抗原修复都会有效去除蛋白之间的交联,充分暴露抗原表位,从而大大改善免疫染色效果。
本产品特别适合用于冰冻切片的抗原修复并用于后续的免疫染色。
一个包装的本产品可以配制成500毫升抗原修复液(1X)。按照每个片子需要10毫升抗原修复液(1X)计算,一个包装的本产品可以用于50个样品。按照每个片子需要5毫升抗原修复液(1X)计算,则一个包装的本产品可以用于100个样品。
注意事项:
1. 抗原修复过程可以使用的染色缸和染色架或邮寄夹进行操作。塑料染色缸、染色架和邮寄夹可以很好地耐受沸水浴,而玻璃染色缸需避免骤冷骤热导致的玻璃破碎。
2. 本抗原修复液使用前必须用重蒸水或Milli-Q水稀释5倍,配制成抗原修复液(1X)。
细胞生物学研究有以下几个方面:
细胞生物学的研究内容十分广泛,主要包括:
①细胞核、染色体以及基因表达的研究;
②生物膜与细胞器的研究;
③细胞骨架体系的研究;
④细胞增殖及其调控;
⑤细胞分化及其调控;
⑥细胞的衰老与编程性死亡(凋亡);
⑦细胞的起源与进化;⑧细胞工程.
细胞生物学研究的常用技术有哪些:
1.显微技术:包括显微观察,显微操作.
2细胞组分分析技术:离心分离技术,生物大分子定位技术,定量细胞化学分析技术.
3.细胞工程:细胞培养。
具有显著特点:
灵敏度高,数据可靠,重现性好
操作简便,省时省力
水溶性,不需要换液,尤其适合于悬浮细胞
无需放射性同位素和有机溶剂,对细胞毒性低
为1瓶溶液,毋需预制,即开即用
适合于高通量药物筛选
细胞培养的优点:
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录本产品仅供科研
采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
以下是冰冻切片快速抗原修复液(5X)的相关产品:
CM-H085人脐动脉平滑肌细胞完全培养基100mL细胞增殖示踪荧光探针(CFDA SE)质量规格:≥90%,用于荧光标记CFDA SE;Carboxyfluorescein diacetate, succinimidyl ester
SCG3 Others Human 人 SCG3 / Secretogranin 3 人细胞裂解液 (阳性对照) CAPE (咖啡酸苯乙酯)质量规格:>98%,BRCAPE (Caffeic Acid Phenethylester)
人牙周膜成纤维细胞HPLF丁二1(>98%,BR)质量规格:>98%,BRSuccinic anhydride
GC-2spd细胞,小鼠精母细胞 人癌细胞,ZR75-30细胞 神经前体细胞分化培养基NPCM吐温60质量规格:BRTween-60
牛肾细胞;MDBK酵母多糖 A(>98% (HPLC),BC)质量规格:>98% (HPLC),BCZymosan A from Saccharomyces cerevisiae
CRP Others Human 人 CRP / C-Reactive Protein 人细胞裂解液 (阳性对照) 异香草醛(>98%,BR)质量规格:>98%,BRIsovanillin
AsPC-1 人转移胰腺腺癌细胞异香草醛(标准品)质量规格:>99%,标准品Isovanillin
HuH-6人肝母细胞瘤细胞 HuH-6 human hepatoblastoma cell DMEM+10% FBS氧化镧(>99%,EP)质量规格:>99%,EPLanthanum(III) oxide
BMP2 Protein Danio rerio (zebrafish) 重组斑马鱼 BMP-2 / BMP2A 蛋白氯化镁六水(分子生物学)质量规格:>99%,分子生物学级Magnesium chloride, hexahydrate
人肾脏上皮细胞(HREpiC)( 5×105 ) MN-c, 小鼠皮质神经元 Mouse醋酸锰四水质量规格:>98%,BCManganese (II) acetate, tetrahydrate
EGF Others Mouse 小鼠 EGF / Epidermal Growth Factor 人细胞裂解液 (阳性对照) NDSB-211质量规格:BRNDSB-211
人骨肉瘤细胞;U-2 OS [U2OS;U2-OS;U-2OS]中性红染色液质量规格:Ind GradeNeutral red solution(1X)
NP69-SV40T细胞,永生化鼻咽上皮细胞系 小鼠细胞,C127细胞 非洲绿猴肾细胞系/HCV-NS2;Vero-HCV-NS2镍粉(>99.5%,SP)质量规格:>99.5%,SPNickel powder
MS1(小鼠胰岛内皮细胞) 5×106cells/瓶×2耐尔蓝A(>65%,BS)质量规格:>65%,BSNile blue A
Promocell C-23160 Skeletal Muscle Cell GrowthMedium KIT, 骨骼肌细胞生长培养基套装 500mlN2-异丁酰-2'-脱氧鸟甙质量规格:>98%,BRibu-dG
冰冻切片快速抗原修复液(5X)CM-R017大鼠胰腺导管上皮细胞完全培养基100mL尼罗丝,英文名或英文缩写:Nile Red,级别:试剂级,98%,水合物,规格:10毫克
DPEP1 Others Human 人 Dehydropeptidase-I / DPEP1 人细胞裂解液 (阳性对照) 环炳基溴烷 (Bromomqthyl)cyclopropcnq 7021-34-2
人结膜成纤维细胞HConF来区坐相关物质A Lqtrozolq Rqlctqd CoMpound c;4,4'-(1H-1,3,4-triczol-1-ylMqthylqnq)dibqnzonitnilq 1
ALVA细胞,人前列腺癌细胞 大鼠气管上皮细胞,RTE细胞 大鼠脑膜细胞RMCDL-2-AminobutyricacidDL-α-基1克BR,99%
J774A.1(小鼠单核巨噬细胞) 5×106cells/瓶×2;溴化硼Boron tribroMide
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文献和实验不完全:使用正常山羊血清或 1%~5% BSA 封闭 1h。 (5)离子相互作用造成的背景:降低抗体稀释液的离子强度。 (6)切片或细胞过于干燥或孵育温度过高:实验过程中请保持切片处于湿润状态,一抗孵育时尽量使用 4℃ 过夜孵育。 (7)内源性过氧化物酶残余:适度延长内源性过氧化物酶阻断剂阻断时间。 (8)样本于缓冲液或抗原修复液中浸泡太久:样本在溶液中浸泡时间不要超过 24h。 Q4:为什么会出现非特异性染色,如何避免? (1)抗体孵育时间过长、抗体浓度高易增加非特异性染色:由于本试剂盒使用
抗原修复方法 Antigen Retrieval Methods
技术即可检测到特定抗原。 恢复表位免疫反应性的方法有很多种。即使是改变抗体稀释液的pH值或阳离子浓度这样简单的方法,也能影响抗体与其表位的亲和力。对于部分掩蔽的表位,在进行抗原修复之前,可以先尝试延长一抗的孵育时间。然而,这一步骤也需要进一步优化,包括合适的抗体浓度、孵育时间和温度。在讨论抗原修复方法时,通常将其分为两大类:蛋白酶诱导表位修复(PIER)和热诱导表位修复(HIER)。一旦优化,抗原修复的效果将非常显著。 蛋白酶诱导表位修复(PIER) 在PIER方法中,蛋白酶K、胰蛋白酶和胃
一、石蜡切片和冰冻切片的比较? 1、要求做冰冻切片的不一定能做石蜡切片,这是我向一老师请教得出的结论。因为作石蜡切片时要高温烤片,可能会破坏组织的抗原性,如果组织的抗原性较稳定,则可作石蜡切片;但是要求做石蜡切片的,可作冰冻切片。 2、冰冻切片的优点是能够较好的保存组织的抗原免疫活性,做免疫组化时不需抗原修复这一步。缺点是细胞内易形成冰晶而破坏细胞结构,可能会使抗原弥散;切片厚度较石蜡的厚,做的片子没石蜡的漂亮。当你买一抗时,目录上都写着做什么样的切片,如果它写着只能做冰冻,就不能做石蜡,如写
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